| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·日本血吸虫及其生活史 | 第10-11页 |
| ·血吸虫的危害 | 第11-12页 |
| ·日本血吸虫在我国流行及防治 | 第12页 |
| ·血吸虫疫苗研究现状 | 第12-15页 |
| ·虫源性疫苗 | 第13页 |
| ·合成肽疫苗 | 第13页 |
| ·抗独特型抗体疫苗 | 第13页 |
| ·基因工程疫苗与核酸疫苗 | 第13-15页 |
| ·展望 | 第15-16页 |
| ·Argonaute蛋白(AGO)的研究 | 第16-17页 |
| ·AGO对miRNA和siRNA的选择性 | 第16-17页 |
| ·AGO与Dicer之间的作用 | 第17页 |
| ·小结 | 第17-18页 |
| 第二章 日本血吸虫Argonaute蛋白(AGO)家族成员AGO2和AGO3的研究 | 第18-48页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·主要试剂和酶 | 第18页 |
| ·菌种和实验动物 | 第18-19页 |
| ·实验仪器 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-30页 |
| ·RNA提取 | 第19-20页 |
| ·3'RACE和5'RACE基因特异引物 | 第20页 |
| ·3'RACE反应所需RNA的处理 | 第20-21页 |
| ·3'RACE套式PCR反应扩增SjAGO2、SjAGO3基因3'末端 | 第21-22页 |
| ·5'RACE反应所需RNA的处理 | 第22-23页 |
| ·5'RACE套式PCR反应扩增SjAGO2、SjAGO3基因5'末端 | 第23-24页 |
| ·全长序列拼接 | 第24-25页 |
| ·AGO2、AGO3重组质粒的构建 | 第25-26页 |
| ·SDS-PAGE分析重组蛋白在大肠杆菌中表达时相 | 第26-27页 |
| ·重组蛋白大肠杆菌中大量表达 | 第27页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第27页 |
| ·SjAGO2、SjAGO3蛋白免疫昆明小鼠制备多克隆抗体 | 第27-28页 |
| ·Western blot分析血吸虫全虫蛋白与多克隆抗体特异性反应 | 第28-29页 |
| ·实时定量分析SjAGO3在血吸虫不同时期的转录情况 | 第29页 |
| ·Western blot分析SjAGO2和SjAGO3蛋白不同时期表达情况以及雌雄虫中表达差异 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-46页 |
| ·SjAGO2、SjAGO3 RACE结果 | 第30-32页 |
| ·SjAGO2、SjAGO3蛋白的全长cDNA及生物信息学分析 | 第32-39页 |
| ·AGO2、AGO3重组蛋白表达 | 第39-43页 |
| ·ELISA检测不同时间抗AGO2、AGO3 IgG变化情况 | 第43页 |
| ·Western blot分析多克隆抗体和日本血吸虫全虫蛋白特异结合 | 第43-44页 |
| ·AGO3不同时期转录分析 | 第44-45页 |
| ·AGO2、AGO3不同时期以及雌雄虫表达差异分析 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 小结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 硕士期间发表的文章 | 第55-56页 |
| 附录1 | 第56-57页 |
