| 主要缩略语 | 第1-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-36页 |
| 第一节 抗菌肽研究概况 | 第15-27页 |
| 1 抗菌肽研究进展 | 第15-21页 |
| ·抗菌肽的分类及结构特点 | 第15-17页 |
| ·抗菌肽的生物学活性 | 第17-18页 |
| ·抗菌肽的作用机理 | 第18-19页 |
| ·抗菌肽的基因工程 | 第19-21页 |
| ·抗菌肽的应用前景及需解决的问题 | 第21页 |
| 2 抗菌肽Protegrin和PR-39的研究进展 | 第21-27页 |
| ·抗菌肽Protegrin和PR-39的结构特征 | 第22-23页 |
| ·抗菌肽Protegrin和PR-39的基因表达与调控 | 第23-24页 |
| ·抗菌肽Protegrin和PR-39的生物学活性 | 第24-25页 |
| ·抗菌肽Protegrin和PR-39的作用机理 | 第25-27页 |
| 第二节 抗菌肽在农业中的应用 | 第27-31页 |
| 1 抗菌肽在畜牧业中的应用 | 第27-28页 |
| ·在饲料添加剂中的应用 | 第27页 |
| ·抗菌肽在畜禽疾病防治中的作用 | 第27-28页 |
| ·抗菌肽在转基因动物中的研究 | 第28页 |
| 2 抗菌肽在种植业中的应用 | 第28-31页 |
| ·转抗菌肽基因工程在模式植物中的应用 | 第29页 |
| ·转抗菌肽基因工程在木本植物中的应用 | 第29页 |
| ·转抗菌肽基因工程在蔬菜遗传育种中的应用 | 第29-31页 |
| 第三节 异源蛋白的表达系统 | 第31-34页 |
| 2 真核表达系统 | 第31-32页 |
| 3 紫花苜蓿作为生物反应器的研究进展 | 第32-34页 |
| 第四节 本研究的目的与意义 | 第34-36页 |
| 第二章 抗菌肽Protegrin-1、PR-39在大肠杆菌中融合表达 | 第36-55页 |
| 1 材料与方法 | 第36-47页 |
| ·质粒、菌株和酶 | 第36-37页 |
| ·培养基及化学试剂的配制 | 第37-38页 |
| ·Proterin-1和PR-39成熟肽基因的合成 | 第38-43页 |
| ·重组原核表达载体的构建与鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组抗菌肽的表达 | 第44-45页 |
| ·融合蛋白的Western blot检测 | 第45-46页 |
| ·重组蛋白的纯化及活性检测 | 第46-47页 |
| ·重组抗菌肽含量的测定 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-53页 |
| ·目的基因的合成和原核表达载体的构建 | 第47-48页 |
| ·融合蛋白的表达及SDSPAGE分析 | 第48-50页 |
| ·融合蛋白的Western blot检测 | 第50页 |
| ·融合蛋白和抗菌肽的纯化 | 第50-52页 |
| ·重组抗菌肽含量的测定结果 | 第52页 |
| ·重组抗菌肽的抑菌活性 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 第三章 抗菌肽PG-1和PR-39在大肠杆菌中的串联表达 | 第55-67页 |
| 1 材料与方法 | 第55-61页 |
| ·质粒、菌株和酶 | 第55页 |
| ·培养基及化学试剂的配制 | 第55-56页 |
| ·抗菌肽PR-39和PG-1串联基因的合成 | 第56-57页 |
| ·重组原核表达载体的构建与鉴定 | 第57-58页 |
| ·融合蛋白的表达及SDS-PAGE分析 | 第58-59页 |
| ·融合蛋白的Western blot检测 | 第59-60页 |
| ·重组蛋白的纯化及活性检测 | 第60-61页 |
| ·PR-39和PG-1的抑菌活性的测定 | 第61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-65页 |
| ·PR-39和PG-1成熟肽串联基因的合成和原核表达载体的构建 | 第61-62页 |
| ·融合蛋白的表达及SDS-PAGE分析 | 第62页 |
| ·融合蛋白的Western blot检测 | 第62-63页 |
| ·融合蛋白和抗菌肽的纯化 | 第63-64页 |
| ·重组蛋白的产量 | 第64页 |
| ·重组抗菌肽的活性检测 | 第64页 |
| ·重组抗菌肽对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用 | 第64-65页 |
| 3 讨论 | 第65-67页 |
| 第四章 抗菌肽PR-39和PG-1在紫花苜蓿中串联表达研究 | 第67-91页 |
| 1 材料与方法 | 第67-82页 |
| ·材料 | 第67-68页 |
| ·目的基因的设计 | 第68-71页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第71-74页 |
| ·农杆菌质粒电转化 | 第74-75页 |
| ·农杆菌介导的苜蓿遗传转化程序 | 第75-76页 |
| ·植株的移栽 | 第76-77页 |
| ·转抗菌肽紫花苜蓿的DNA水平鉴定 | 第77-78页 |
| ·转抗菌肽紫花苜蓿表达鉴定 | 第78-82页 |
| ·转化植株抑菌活性检测 | 第82页 |
| 2 结果与分析 | 第82-88页 |
| ·目的基因的扩增及植物表达载体的构建 | 第82-84页 |
| ·目的基因对根癌农杆菌LBA4404电转化的鉴定 | 第84-85页 |
| ·转抗菌肽基因紫花苜蓿的DNA水平鉴定 | 第85-86页 |
| ·转抗菌肽基因紫花苜蓿表达检测 | 第86-87页 |
| ·转基因植株的抑菌活性 | 第87-88页 |
| 3 讨论 | 第88-91页 |
| 提示、创新点及后续研究展望 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-106页 |
| 附录1.细菌培养基的配制 | 第106-107页 |
| 附录2:植物组培基础培养基的配制 | 第107-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 博士期间发表论文情况 | 第110页 |
