中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略语/符号说明 | 第12-13页 |
前言 | 第13-20页 |
研究现状、成果 | 第13-18页 |
研究目的、方法 | 第18-20页 |
一、人源精子膜蛋白免疫多肽的筛选及生物信息学研究 | 第20-29页 |
1.1 对象和方法 | 第21-22页 |
1.1.1 材料对象 | 第21页 |
1.1.2 实验方法 | 第21-22页 |
1.2 结果 | 第22-25页 |
1.2.1 利用NCBI和UniProtKB蛋白数据库查询人源精子膜蛋白 | 第22页 |
1.2.2 人源精子膜蛋白SPACA_1、SPACA_3、SPAG_8和OR1D2跨膜区域预测分析 | 第22-23页 |
1.2.3 人源精子膜蛋白SPACA_1、SPACA_3、SPAG_8和OR1D2信号肽分析 | 第23-24页 |
1.2.4 人源精子膜蛋白SPACA_1、SPACA_3、SPAG_8和OR1D2疏水性分析 | 第24-25页 |
1.3 讨论 | 第25-28页 |
1.4 小结 | 第28-29页 |
二、制备人源精子膜蛋白多克隆抗体及鉴定研究 | 第29-52页 |
2.1 对象和方法 | 第29-42页 |
2.1.1 实验动物 | 第29页 |
2.1.2 实验材料 | 第29-35页 |
2.1.2.1 实验仪器 | 第29-31页 |
2.1.2.2 实验试剂 | 第31-32页 |
2.1.2.3 主要试剂配置方法 | 第32-35页 |
2.1.3 实验方法 | 第35-42页 |
2.1.3.1 多肽抗原与KLH偶联及纯化 | 第35-36页 |
2.1.3.2 动物免疫 | 第36-37页 |
2.1.3.3 抗体血清的制备 | 第37-38页 |
2.1.3.4 饱和硫酸铵法纯化抗体 | 第38页 |
2.1.3.5 抗体浓度测定 | 第38页 |
2.1.3.6 人源精子膜蛋白可溶性抗原的制备 | 第38-39页 |
2.1.3.7 酶联免疫吸附实验测定血清抗体效价 | 第39-40页 |
2.1.3.8 人精子细胞免疫荧光染色 | 第40-41页 |
2.1.3.9 Western blot 实验 | 第41-42页 |
2.1.3.10 统计方法 | 第42页 |
2.2 结果 | 第42-49页 |
2.2.1 ELISA检测SPACA_1、SPACA_3、SPAG_8和OR1D2抗体效价 | 第42-44页 |
2.2.2 SPACA_1、SPACA_3、SPAG_8和OR1D2蛋白在人源精子的表达及占位 | 第44-49页 |
2.2.3 Western blot鉴定抗体特异性反应结果 | 第49页 |
2.3 讨论 | 第49-50页 |
2.4 小结 | 第50-52页 |
三、免疫靶向纳米金的制备及应用 | 第52-66页 |
3.1 对象和方法 | 第54-57页 |
3.1.1 实验试剂 | 第54页 |
3.1.2 实验仪器 | 第54页 |
3.1.3 实验试剂配制 | 第54-55页 |
3.1.4 试验方法 | 第55-57页 |
3.2 结果 | 第57-62页 |
3.2.1 利用柠檬酸钠还原法制备纳米金的表征 | 第57页 |
3.2.2 免疫靶向纳米金的表征 | 第57-62页 |
3.3 讨论 | 第62-65页 |
3.4 小结 | 第65-66页 |
四、高通量测序研究抗精子抗体对成熟精子的作用机制 | 第66-88页 |
4.1 对象和方法 | 第67-72页 |
4.1.1 实验试剂 | 第67页 |
4.1.2 实验仪器 | 第67页 |
4.1.3 实验方法 | 第67-72页 |
4.2 实验结果 | 第72-84页 |
4.2.1 实验质检结果 | 第72-74页 |
4.2.1.1 精子RNA质控结果 | 第72页 |
4.2.1.2 构建文库质检结果 | 第72-74页 |
4.2.1.3 测序结果质控 | 第74页 |
4.2.2 数据分析结果 | 第74-84页 |
4.2.2.1 测序序列质量评估 | 第74-75页 |
4.2.2.2 数据预处理 | 第75-76页 |
4.2.2.3 基因组比对结果统计 | 第76页 |
4.2.2.4 表达相关性分析 | 第76-77页 |
4.2.2.5 差异基因表达分析 | 第77-80页 |
4.2.2.6 GO聚类分析 | 第80-82页 |
4.2.2.7 KEGG pathway 聚类分析结果 | 第82-83页 |
4.2.2.8 RT-PCR 验证结果 | 第83-84页 |
4.3 讨论 | 第84-86页 |
4.4 小结 | 第86-88页 |
全文结论 | 第88-89页 |
论文创新点 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-96页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第96-98页 |
综述 抗精子抗体对生育影响的研究 | 第98-117页 |
综述参考文献 | 第111-117页 |
致谢 | 第117-118页 |
个人简历 | 第118页 |