摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
缩略词(Abbreviations) | 第14-15页 |
前言 | 第15-38页 |
1. HIV相关背景 | 第15-28页 |
1.1. HIV病毒简介 | 第15-16页 |
1.2. HIV的流行情况 | 第16-18页 |
1.3. HIV-1基因组及功能 | 第18-19页 |
1.4. HIV-1蛋白结构特征 | 第19-26页 |
1.5. HIV-1生活周期 | 第26-28页 |
2. HIV疫苗的研究进展 | 第28-32页 |
2.1. HIV疫苗研发的挑战 | 第28-29页 |
2.2. HIV疫苗设计的研究进展 | 第29-32页 |
3. HIV表位聚焦的免疫原展示策略 | 第32-36页 |
3.1. HIV中和抗体识别的表位类型 | 第33-34页 |
3.2. 利用外源支架展示表位的策略 | 第34-35页 |
3.3. 利用病毒颗粒蛋白展示表位的策略 | 第35-36页 |
4. 本研究思路、方法及意义 | 第36-38页 |
材料与方法 | 第38-55页 |
1. 材料 | 第38-40页 |
1.1. 主要仪器 | 第38-39页 |
1.2. 菌种和质粒 | 第39页 |
1.3. 病毒细胞及实验动物 | 第39页 |
1.4. 酶和单抗 | 第39-40页 |
1.5. 其他试剂及常用耗材 | 第40页 |
2. 方法 | 第40-55页 |
2.1. 常用溶液及培养基配制 | 第40-43页 |
2.2. 常规分子生物学实验 | 第43-46页 |
2.3. HIV-1衣壳重组蛋白表达纯化及分析 | 第46-49页 |
2.4. 细胞生物学实验 | 第49-50页 |
2.5. PEI转染 | 第50页 |
2.6. HIV病毒感染滴度检测 | 第50页 |
2.7. TZM-bl细胞中和试验 | 第50-51页 |
2.8. 细胞免疫荧光实验 | 第51页 |
2.9. 流式细胞仪分析(Flow Cytometry,FCM) | 第51-52页 |
2.10. 动物实验方法 | 第52-55页 |
结果与分析 | 第55-82页 |
1. CA-N21C/A22C-V3蛋白的克隆构建与表达、纯化 | 第55-64页 |
1.1. CA-N21C/A22C-V3重组蛋白的设计 | 第55-57页 |
1.2. CA-N21C/A22C-V3蛋白的克隆构建 | 第57-60页 |
1.3. CA-N21C/A22C-V3蛋白的可溶性表达 | 第60页 |
1.4. CA-N21C/A22C-V3蛋白的纯化摸索 | 第60-63页 |
1.5. 小结 | 第63-64页 |
2. CA-N21C/A22C-V3蛋白的性质分析 | 第64-67页 |
2.1. CA-N21C/A22C-V3蛋白与抗体反应活性分析 | 第64页 |
2.2. CA-N21C/A22C-V3体外颗粒组装分析 | 第64-66页 |
2.3. 小结 | 第66-67页 |
3. CA-N21C/A22C-V3蛋白的免疫原性分析 | 第67-76页 |
3.1. CA-N21C/A22C-V3蛋白免疫剂量摸索 | 第67-69页 |
3.2. 免疫血清抗体滴度检测 | 第69-71页 |
3.3. 免疫血清与病毒反应性验证 | 第71页 |
3.4. 免疫血清中和活性检测 | 第71-74页 |
3.5. 免疫小鼠细胞免疫应答分析 | 第74-76页 |
3.6. 小结 | 第76页 |
4. CA-N21C/A22C为载体插入其他的ENV表位的分析 | 第76-82页 |
4.1. CA-N21C/A22C融合V1V2区段的克隆构建及表达纯化 | 第77-79页 |
4.2. CA-N21C/A22C-V1V2免疫小鼠血清滴度检测及中和活性分析 | 第79-82页 |
讨论 | 第82-86页 |
1. 以CA-N21C/A22C为载体展示外源片段的优势 | 第82-83页 |
2. 融合蛋白表达纯化及免疫原性评价 | 第83-84页 |
3. HIV疫苗的创新型研究方向 | 第84-86页 |
小结与展望 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-98页 |
致谢 | 第98页 |