摘要 | 第6-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
简写及缩略语 | 第13-14页 |
绪论 | 第14-15页 |
第一部分 文献综述 | 第15-33页 |
第一章 PCV2感染与miRNA的作用 | 第15-33页 |
1 PCV2对猪业生产的危害 | 第15-16页 |
2 PCV2的生物学特征 | 第16-19页 |
2.1 病毒的结构、分类与培养 | 第16页 |
2.2 病毒基因特征与编码蛋白 | 第16-17页 |
2.3 PCV2感染与宿主免疫反应 | 第17-19页 |
3 宿主miRNA功能研究进展 | 第19-22页 |
3.1 miRNA生物合成 | 第19-21页 |
3.2 miRNA表达谱鉴定 | 第21页 |
3.3 miRNA靶位点的识别和预测 | 第21页 |
3.4 miRNA靶基因鉴定 | 第21-22页 |
3.5 miRNA调控基因表达的分子机理 | 第22页 |
4 miRNA的免疫调节作用 | 第22-25页 |
4.1 miRNA在抗感染固有免疫应答中的作用 | 第22-23页 |
4.2 miRNA在宿主-病毒互作中的地位 | 第23-25页 |
参考文献 | 第25-33页 |
第二部分 试验研究 | 第33-79页 |
第二章 PCV2d毒株的分离鉴定与全基因测序 | 第33-47页 |
1 材料与方法 | 第33-40页 |
1.1 材料 | 第33-34页 |
1.2 毒株分离 | 第34-37页 |
1.3 分离株全基因组扩增 | 第37-39页 |
1.4 分离株的间接免疫荧光(IFA)鉴定 | 第39-40页 |
1.5 分离株的细胞半数感染量(TCID_(50))的测定 | 第40页 |
2 结果与分析 | 第40-44页 |
2.1 病毒液的PCR鉴定 | 第40-41页 |
2.2 分离株全基因组的扩增 | 第41-42页 |
2.3 分离株全基因组及其所编码的氨基酸序列分析 | 第42-44页 |
2.4 分离株间接免疫荧光(IFA)检测 | 第44页 |
2.5 PCV2分离株TCID50测定 | 第44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-47页 |
第三章 PCV2感染PK15过程中miRNA-98对病毒复制与表达的作用 | 第47-63页 |
1 材料与方法 | 第48-54页 |
1.1 材料 | 第48页 |
1.2 PCV2感染PK15细胞模型的建立 | 第48页 |
1.3 高通量测序筛选PCV2复制相关miRNA | 第48-49页 |
1.4 感染细胞miRNA-98表达量的检测 | 第49-51页 |
1.5 过表达miRNA-98对PCV2复制的影响 | 第51-53页 |
1.6 miRNA-98对宿主免疫系统的影响 | 第53-54页 |
2 结果 | 第54-58页 |
2.1 miRNA的筛选 | 第54页 |
2.2 miRNA的表达 | 第54-55页 |
2.3 miRNA-98对PCV2复制与表达的影响 | 第55-57页 |
2.4 miRNA-98调节宿主免疫功能 | 第57-58页 |
3 讨论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-63页 |
第四章 miRNA-98调控PCV2复制与表达的靶基因鉴定 | 第63-79页 |
1 材料与方法 | 第63-69页 |
1.1 材料 | 第63-64页 |
1.2 miRNA-98靶基因的预测 | 第64页 |
1.3 双荧光素酶报告基因载体质粒的构建 | 第64-67页 |
1.4 双荧光报告系统检测miRNA-98与其预测靶点结合情况 | 第67-68页 |
1.5 miRNA-98对细胞ALG11、GANAB和MAN2A2表达的影响 | 第68页 |
1.6 细胞周期与凋亡的检测 | 第68-69页 |
2 结果 | 第69-75页 |
2.1 miRNA-98靶基因的预测 | 第69-71页 |
2.2 靶基因的验证 | 第71-74页 |
2.3 miRNA-98调节细胞凋亡与周期 | 第74-75页 |
3 讨论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-79页 |
结论 | 第79-81页 |
致谢 | 第81-83页 |
攻读硕士学位期间论文发表情况 | 第83页 |