| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语 | 第10-11页 |
| 绪论 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-26页 |
| 第一章 犬流感的病原学与诊断 | 第12-26页 |
| 1 犬流感病毒的病原学特性 | 第12-17页 |
| 1.1 病原学分类 | 第12页 |
| 1.2 犬流感的流行状况 | 第12-13页 |
| 1.3 形态特点和理化特性 | 第13页 |
| 1.4 基因组结构与编码蛋白 | 第13-15页 |
| 1.5 病毒增殖特性 | 第15-17页 |
| 1.6 CIV种间传播机制 | 第17页 |
| 2 CIV的培养特性 | 第17页 |
| 3 症状和治疗 | 第17-18页 |
| 4 犬流感病毒的分离鉴定 | 第18-19页 |
| 4.1 血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI) | 第18页 |
| 4.2 逆转录PCR检测 | 第18-19页 |
| 4.3 RT-LAMP检测 | 第19页 |
| 5 疫苗和预防 | 第19页 |
| 6 公共卫生学意义 | 第19-20页 |
| 7 单克隆抗体技术 | 第20-21页 |
| 参考文献 | 第21-26页 |
| 第二部分 试验研究 | 第26-54页 |
| 第二章 犬流感病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 | 第26-42页 |
| 1 材料与方法 | 第27-33页 |
| 1.1 病毒、细胞和动物 | 第27页 |
| 1.2 主要试剂 | 第27页 |
| 1.3 杂交瘤细胞株的建立 | 第27-29页 |
| 1.4 杂交瘤细胞的筛选 | 第29-30页 |
| 1.5 单克隆抗体腹水的制备及纯化 | 第30-31页 |
| 1.6 单克隆抗体亚类鉴定 | 第31页 |
| 1.7 单克隆抗体效价测定 | 第31页 |
| 1.8 杂交瘤细胞株稳定性测定 | 第31页 |
| 1.9 单克隆抗体特异性鉴定 | 第31-32页 |
| 1.10 血凝(HA)试验与血凝抑制(HI)试验 | 第32页 |
| 1.11 单克隆抗体中和活性测定 | 第32-33页 |
| 2 结果 | 第33-38页 |
| 2.1 犬流感病毒抗原的制备 | 第33页 |
| 2.2 杂交瘤细胞株的建立 | 第33-34页 |
| 2.3 单克隆抗体的纯化 | 第34页 |
| 2.4 单克隆抗体的亚类鉴定 | 第34页 |
| 2.5 单克隆抗体的效价测定 | 第34-35页 |
| 2.6 杂交瘤细胞株稳定性测定 | 第35页 |
| 2.7 单克隆抗体特异性鉴定 | 第35-37页 |
| 2.8 血凝(HA)试验与血凝抑制(HI)试验 | 第37页 |
| 2.9 单克隆抗体中和活性测定 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-42页 |
| 第三章 犬流感病毒单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立 | 第42-54页 |
| 1 材料与方法 | 第42-46页 |
| 1.1 病毒与试剂 | 第42-43页 |
| 1.2 单克隆抗体腹水的制备与纯化 | 第43页 |
| 1.3 单克隆抗体的标记 | 第43页 |
| 1.4 捕获抗体和酶标抗体工作浓度的确定 | 第43-44页 |
| 1.5 夹心ELISA试验条件的优化 | 第44页 |
| 1.6 夹心ELISA判定标准的确定 | 第44-45页 |
| 1.7 特异性试验 | 第45页 |
| 1.8 重复性试验 | 第45页 |
| 1.9 临床样品检测 | 第45-46页 |
| 2 结果 | 第46-49页 |
| 2.1 捕获抗体和酶标抗体工作浓度的优化 | 第46页 |
| 2.2 夹心ELISA试验条件的优化 | 第46-48页 |
| 2.3 夹心ELISA判定标准的确定 | 第48页 |
| 2.4 特异性检验 | 第48-49页 |
| 2.5 重复性试验 | 第49页 |
| 2.6 临床样品检测 | 第49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 结论 | 第54-56页 |
| 附录: 常用试剂的配制 | 第56-60页 |
| 致谢 | 第60页 |