| 致谢 | 第4-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-14页 |
| 1.1 植物对氮素的吸收利用 | 第8-9页 |
| 1.2 GS参与的氮素同化 | 第9页 |
| 1.3 高等植物GS的分类及功能 | 第9-10页 |
| 1.4 高等植物GS的表达调控 | 第10-12页 |
| 1.4.1 转录调控 | 第11页 |
| 1.4.2 转录后调控 | 第11页 |
| 1.4.3 翻译后修饰 | 第11-12页 |
| 1.5 GS的结构 | 第12-14页 |
| 2 引言 | 第14-15页 |
| 3 材料与方法 | 第15-21页 |
| 3.1 实验材料 | 第15页 |
| 3.1.1 原核表达材料 | 第15页 |
| 3.1.2 植物材料 | 第15页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第15页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第15页 |
| 3.2 实验方法 | 第15-21页 |
| 3.2.1 GS多克隆抗体制备 | 第15-17页 |
| 3.2.1.1 目的基因扩增 | 第15-16页 |
| 3.2.1.2 构建克隆载体 | 第16-17页 |
| 3.2.1.3 TaGS异源诱导表达与纯化 | 第17页 |
| 3.2.1.4 纯化的GS蛋白作为抗原制备多克隆抗体并检验特异性 | 第17页 |
| 3.2.2 GS粗酶液制备 | 第17-18页 |
| 3.2.3 Western-blot鉴定GS同工酶表达 | 第18页 |
| 3.2.4 电泳分离鉴定GS同工酶 | 第18-19页 |
| 3.2.5 胶内GS酶活性检测 | 第19页 |
| 3.2.6 活性蛋白的电印迹检测 | 第19页 |
| 3.2.7 GS同工酶亚基组成的鉴定 | 第19-20页 |
| 3.2.7.1 2DCNE/SDS-PAGE鉴定八种植物GS同工酶亚基组成 | 第19-20页 |
| 3.2.7.2 2DBNE/SDS-PAGE鉴定玉米GS同工酶亚基组成 | 第20页 |
| 3.2.8 LC-MS/MS测定GS蛋白序列 | 第20-21页 |
| 4 结果与分析 | 第21-33页 |
| 4.1 GS多克隆抗体制备 | 第21-23页 |
| 4.1.1 pET28a-GS1和pET28a-GS2原核表达载体的构建与鉴定 | 第21页 |
| 4.1.2 TaGS1和TaGS2基因的原核诱导表达和纯化 | 第21-22页 |
| 4.1.3 GS多克隆抗体检测 | 第22-23页 |
| 4.2 不同植物GS同工酶表达特性及亚基鉴定 | 第23-24页 |
| 4.3 不同植物GS全酶大小的鉴定 | 第24-26页 |
| 4.4 不同植物GS亚基组成的鉴定 | 第26-28页 |
| 4.5 不同植物GS同工酶聚合状态的鉴定 | 第28页 |
| 4.6 玉米不同组织GS同工酶表达特点 | 第28-29页 |
| 4.7 玉米GS同工酶大小鉴定 | 第29-31页 |
| 4.8 玉米GS同工酶聚合状态的鉴定 | 第31-33页 |
| 5 结论与讨论 | 第33-35页 |
| 参考文献 | 第35-42页 |
| 英文摘要 | 第42页 |
