| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 毒素-抗毒素系统的概述 | 第12-16页 |
| 1.1.1 毒素-抗毒素系统的简介 | 第12页 |
| 1.1.2 毒素-抗毒素系统的分类 | 第12-14页 |
| 1.1.3 Ⅱ型毒素-抗毒素系统的特性 | 第14页 |
| 1.1.4 Ⅱ型毒素-抗毒素系统的分类及研究进展 | 第14-15页 |
| 1.1.5 Ⅱ型毒素-抗毒素系统的功能 | 第15-16页 |
| 1.1.5.1 基因调控 | 第15-16页 |
| 1.1.5.2 形成保持菌 | 第16页 |
| 1.1.5.3 抗噬菌体 | 第16页 |
| 1.2 鱼腥藻PCC7120概况 | 第16-19页 |
| 1.2.1 蓝藻简介 | 第16页 |
| 1.2.2 蓝细菌全基因组测序 | 第16-17页 |
| 1.2.3 蓝细菌的遗传系统 | 第17-18页 |
| 1.2.3.1 藻胆体 | 第17页 |
| 1.2.3.2 基因转移系统 | 第17-18页 |
| 1.2.3.3 异形胞分化 | 第18页 |
| 1.2.4 蓝藻水华 | 第18-19页 |
| 1.3 PCC7120中的毒素-抗毒素系统 | 第19-20页 |
| 1.4 研究内容和意义 | 第20-22页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第20-21页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第21-22页 |
| 第2章 基因alr9029/asr9028的克隆与表达 | 第22-37页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 实验材料 | 第22-26页 |
| 2.2.1 藻种 | 第22-23页 |
| 2.2.2 菌种及载体 | 第23-24页 |
| 2.2.3 实验所需仪器 | 第24页 |
| 2.2.4 实验所需药品及试剂 | 第24-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.3.1 同源基因生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.3.2 引物设计及目的基因PCR | 第26-28页 |
| 2.3.2.1 引物设计 | 第27页 |
| 2.3.2.2 目的基因提取 | 第27页 |
| 2.3.2.3 目的基因PCR | 第27-28页 |
| 2.3.3 克隆及表达载体构建 | 第28-29页 |
| 2.3.3.1 感受态制备 | 第28页 |
| 2.3.3.2 克隆载体构建 | 第28-29页 |
| 2.3.3.3 表达载体构建 | 第29页 |
| 2.3.4 蛋白表达 | 第29-30页 |
| 2.3.4.1 IPTG诱导蛋白表达 | 第29页 |
| 2.3.4.2 SDS-PAGE检测 | 第29-30页 |
| 2.4 实验结果 | 第30-35页 |
| 2.4.1 alr9029-asr9028基因序列分析 | 第30-32页 |
| 2.4.2 基因alr9029和asr9028的PCR结果 | 第32页 |
| 2.4.3 表达载体成功构建 | 第32-33页 |
| 2.4.4 alr9029对BL21的影响 | 第33-34页 |
| 2.4.5 毒素和抗毒素基因在BL21中的表达 | 第34-35页 |
| 2.5 讨论 | 第35-37页 |
| 第3章 目的蛋白的纯化和活性分析 | 第37-41页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 实验材料 | 第37-38页 |
| 3.2.1 菌种 | 第37页 |
| 3.2.2 Ni柱和抗体 | 第37页 |
| 3.2.3 实验所需仪器 | 第37页 |
| 3.2.4 实验试剂 | 第37-38页 |
| 3.3 实验方法 | 第38-39页 |
| 3.3.1 蛋白样品准备 | 第38页 |
| 3.3.2 目的蛋白纯化 | 第38页 |
| 3.3.3 Western Blot | 第38-39页 |
| 3.4 实验结果 | 第39-40页 |
| 3.4.1 蛋白纯化SDS-PAGE检测 | 第39页 |
| 3.4.2 Western Blot检测 | 第39-40页 |
| 3.5 讨论 | 第40-41页 |
| 第4章 缺失突变体构建 | 第41-47页 |
| 4.1 引言 | 第41页 |
| 4.2 实验材料 | 第41-42页 |
| 4.2.1 藻种 | 第41页 |
| 4.2.2 菌种及载体 | 第41-42页 |
| 4.2.3 实验所需仪器 | 第42页 |
| 4.2.4 实验所需药品及试剂 | 第42页 |
| 4.3 实验方法 | 第42-44页 |
| 4.3.1 整合载体构建 | 第42-43页 |
| 4.3.2 缺失突变体构建 | 第43-44页 |
| 4.4 实验结果 | 第44-46页 |
| 4.4.1 整合载体双酶切检测 | 第44-45页 |
| 4.4.2 PCR检测结果 | 第45-46页 |
| 4.5 讨论 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 附录A 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
