| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第13-21页 |
| 1.1 木霉防治灰霉的直接生防机制 | 第13-15页 |
| 1.1.1 木霉的重寄生作用 | 第13-14页 |
| 1.1.2 木霉的抗生作用 | 第14-15页 |
| 1.1.3 木霉的竞争作用 | 第15页 |
| 1.2 木霉防治灰霉的间接生防机制 | 第15-20页 |
| 1.2.1 木霉在植物表面及内部的定殖 | 第15-17页 |
| 1.2.2 木霉与植物互作过程中植物的表征变化 | 第17页 |
| 1.2.3 木霉与植物互作过程中植物的激素变化 | 第17-18页 |
| 1.2.4 木霉与植物互作过程中植物的转录水平变化 | 第18-19页 |
| 1.2.5 木霉与植物互作过程抗性相关蛋白的变化 | 第19-20页 |
| 1.3 课题的意义 | 第20-21页 |
| 第二章 功能木霉菌株的筛选与鉴定 | 第21-35页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.2.1 供试菌株 | 第21页 |
| 2.2.2 供试植物 | 第21页 |
| 2.2.3 供试培养基 | 第21-22页 |
| 2.2.4 仪器设备 | 第22-23页 |
| 2.2.5 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.2.6 溶液配方 | 第24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.3.1 拮抗木霉菌株的筛选 | 第24-25页 |
| 2.3.2 具有促生作用的木霉菌株的分离 | 第25页 |
| 2.3.3 功能木霉菌株的形态学鉴定 | 第25页 |
| 2.3.4 功能木霉菌株的分子生物学鉴定 | 第25-27页 |
| 2.3.4.1 木霉H9菌液的制备 | 第25页 |
| 2.3.4.2 木霉基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.3.4.3 ITS序列的PCR扩增 | 第26页 |
| 2.3.4.4 18S rDNA序列的PCR扩增 | 第26-27页 |
| 2.3.4.5 TEF-1α序列的PCR扩增 | 第27页 |
| 2.3.4.6 PCR产物序列分析及系统发育树构建 | 第27页 |
| 2.4 结果与分析 | 第27-33页 |
| 2.4.1 拮抗灰霉菌的木霉菌株筛选 | 第27-28页 |
| 2.4.2 木霉菌株对黄瓜促生长作用 | 第28-29页 |
| 2.4.3 木霉菌株H9的菌种鉴定 | 第29-33页 |
| 2.4.3.1 木霉H9在不同培养基的生长形态 | 第29页 |
| 2.4.3.2 木霉的显微形态鉴定 | 第29-31页 |
| 2.4.3.3 木霉H9菌株的分子生物学鉴定 | 第31-33页 |
| 2.5 小结 | 第33-35页 |
| 第三章 木霉H9与黄瓜互作引起黄瓜系统抗性的研究 | 第35-49页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 实验材料 | 第35-36页 |
| 3.2.1 供试菌株 | 第35页 |
| 3.2.2 供试植物 | 第35-36页 |
| 3.2.3 供试营养液 | 第36页 |
| 3.3 实验方法 | 第36-42页 |
| 3.3.1 黄瓜幼苗的培养 | 第36-37页 |
| 3.3.2 菌种的培养及孢子液制备 | 第37页 |
| 3.3.2.1 木霉H9孢子液的制备 | 第37页 |
| 3.3.2.2 灰霉的培养及孢子液制备 | 第37页 |
| 3.3.3 木霉H9对黄瓜的诱导接种 | 第37页 |
| 3.3.4 灰霉的挑战接种 | 第37页 |
| 3.3.5 木霉与黄瓜互作防治灰霉病的效果 | 第37-38页 |
| 3.3.6 木霉在黄瓜根部定殖的透射电镜观察 | 第38-39页 |
| 3.3.7 黄瓜植株内激素相关基因的表达情况 | 第39-41页 |
| 3.3.7.1 实验处理及所用引物序列 | 第39-40页 |
| 3.3.7.2 实时荧光定量检测与茉莉酸、乙烯、水杨酸相关标记基因的表达 | 第40-41页 |
| 3.3.8 黄瓜叶片中植物激素的检测 | 第41-42页 |
| 3.3.8.1 实验处理 | 第41页 |
| 3.3.8.2 样品处理 | 第41页 |
| 3.3.8.3 激素的提取 | 第41页 |
| 3.3.8.4 JA、SA标准溶液的配制 | 第41-42页 |
| 3.3.8.5 液相条件 | 第42页 |
| 3.3.8.6 质谱条件 | 第42页 |
| 3.3.8.7 样品中激素含量的计算 | 第42页 |
| 3.3.8.8 数据处理 | 第42页 |
| 3.4 结果与分析 | 第42-47页 |
| 3.4.1 木霉H9与黄瓜互作防治灰霉病的效果 | 第42-43页 |
| 3.4.2 木霉H9在植物根部的定殖 | 第43页 |
| 3.4.3 茉莉酸、乙烯、水杨酸相关基因的表达情况 | 第43-47页 |
| 3.4.3.1 茉莉酸相关基因的表达 | 第43-45页 |
| 3.4.3.2 乙烯相关基因的表达 | 第45-46页 |
| 3.4.3.3 水杨酸相关基因的表达 | 第46-47页 |
| 3.4.4 黄瓜内茉莉酸和水杨酸激素含量 | 第47页 |
| 3.5 小结 | 第47-49页 |
| 第四章 木霉-黄瓜互作转录组分析 | 第49-63页 |
| 4.1 引言 | 第49页 |
| 4.2 实验材料 | 第49-50页 |
| 4.2.1 供试菌株 | 第49页 |
| 4.2.2 供试植物 | 第49-50页 |
| 4.2.3 植物营养液 | 第50页 |
| 4.3 实验方法 | 第50-53页 |
| 4.3.1 实验设计 | 第50-51页 |
| 4.3.2 样品处理 | 第51页 |
| 4.3.3 RNA提取质检 | 第51页 |
| 4.3.4 转录组测序 | 第51页 |
| 4.3.5 数据预处理 | 第51-52页 |
| 4.3.6 基因组比对 | 第52页 |
| 4.3.7 基因表达定量和差异基因筛选 | 第52页 |
| 4.3.8 差异基因的富集分析 | 第52-53页 |
| 4.4 结果与分析 | 第53-62页 |
| 4.4.1 RNA质量分析 | 第53页 |
| 4.4.2 测序质量分析 | 第53-54页 |
| 4.4.3 基因表达定量和差异基因筛选结果分析 | 第54页 |
| 4.4.4 GO和KEGG富集分析结果 | 第54-58页 |
| 4.4.5 转录组分析总结 | 第58-62页 |
| 4.5 小结 | 第62-63页 |
| 第五章 木霉-黄瓜互作蛋白组学研究 | 第63-77页 |
| 5.1 引言 | 第63页 |
| 5.2 实验材料 | 第63-64页 |
| 5.2.1 供试菌株 | 第63页 |
| 5.2.2 供试植物 | 第63-64页 |
| 5.2.3 植物营养液 | 第64页 |
| 5.3 实验方法 | 第64-66页 |
| 5.3.1 实验处理 | 第64-65页 |
| 5.3.2 样品处理 | 第65页 |
| 5.3.3 蛋白提取方法 | 第65页 |
| 5.3.4 LC-MS/MS质谱检测条件 | 第65-66页 |
| 5.3.4.1 LC-MS/MS质谱设备规格 | 第65页 |
| 5.3.4.2 LC-MS/MS缓冲液 | 第65-66页 |
| 5.3.4.3 LC-MS/MS的液相方法 | 第66页 |
| 5.4 结果与分析 | 第66-75页 |
| 5.4.1 蛋白质鉴定 | 第66页 |
| 5.4.2 Proteinpilot搜索参数 | 第66-67页 |
| 5.4.3 鉴定结果统计 | 第67页 |
| 5.4.4 蛋白覆盖分布 | 第67页 |
| 5.4.5 蛋白组数据分析 | 第67-75页 |
| 5.4.5.1 Unique肽段分步 | 第67-68页 |
| 5.4.5.2 肽段长度分布 | 第68页 |
| 5.4.5.3 差异蛋白质功能注释 | 第68-69页 |
| 5.4.5.4 GO注释 | 第69-70页 |
| 5.4.5.5 代谢通路分析 | 第70-74页 |
| 5.4.5.6 茉莉酸、乙烯和水杨酸途径中差异蛋白的GO富集 | 第74页 |
| 5.4.5.7 茉莉酸通路的差异蛋白表达情况 | 第74-75页 |
| 5.4.5.8 乙烯通路的差异蛋白表达情况 | 第75页 |
| 5.4.5.9 水杨酸通路的差异蛋白表达 | 第75页 |
| 5.5 小结 | 第75-77页 |
| 第六章 结论 | 第77-79页 |
| 6.1 结论 | 第77页 |
| 6.2 展望 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 攻读学位期间所取得的相关科研成果 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
