| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 文献综述 | 第15-25页 |
| 1 m6A相关的研究现状和进展 | 第16-24页 |
| 1.1 最早m6A检测方法的建立 | 第16-18页 |
| 1.2 m6A的甲基化酶、去甲基化酶及识别因子的发现 | 第18-22页 |
| 1.2.1 m6A的甲基化酶：mettl3、mettl14和WTAP蛋白 | 第18-20页 |
| 1.2.2 哺乳动物中的m6A去甲基化酶：fto/alkbh5 | 第20-21页 |
| 1.2.3 哺乳动物中的m6A的识别因子 | 第21-22页 |
| 1.2.3.1 YTH蛋白结构域作为m6A的识别因子 | 第21-22页 |
| 1.3 小鼠睾丸与卵巢 | 第22-23页 |
| 1.4 研究前景 | 第23-24页 |
| 展望 | 第24-25页 |
| 引言 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-37页 |
| 2.1 材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 实验小鼠品系 | 第26页 |
| 2.1.2 实验所用细胞系 | 第26页 |
| 2.1.3 实验所用主要抗体 | 第26页 |
| 2.1.4 实验主要耗材 | 第26-27页 |
| 2.1.5 实验主要试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.6 实验所用RT-PCR引物 | 第28页 |
| 2.1.7 主要仪器 | 第28-29页 |
| 2.2 小鼠饲养方法 | 第29页 |
| 2.2.1 小鼠饲养 | 第29页 |
| 2.2.2 饲养方式 | 第29页 |
| 2.3 小鼠睾丸及卵巢摘取 | 第29-30页 |
| 2.3.1 成年期小鼠睾丸和卵巢的摘取 | 第29页 |
| 2.3.2 小鼠12.5dpc的获取方式 | 第29-30页 |
| 2.3.3 12.5 dpc期小鼠睾丸和卵巢的摘取及保存 | 第30页 |
| 2.4 细胞相关实验和方法 | 第30-31页 |
| 2.4.1 冻存液的配制 | 第30页 |
| 2.4.2 293 T细胞培养液的配制 | 第30页 |
| 2.4.3 293 T细胞的复苏 | 第30页 |
| 2.4.4 293 T细胞的传代 | 第30-31页 |
| 2.5 生物化学与分子生物学相关实验方法 | 第31-33页 |
| 2.5.1 睾丸和卵巢组织或细胞的总RNA提取 | 第31-32页 |
| 2.5.2 RNA梯度稀释方法 | 第32页 |
| 2.5.3 cDNA合成 | 第32页 |
| 2.5.4 实时定量PCR反应 | 第32-33页 |
| 2.6 点杂交 | 第33页 |
| 2.7 液质联用质谱实验方法 | 第33-35页 |
| 2.7.1 配制标准品 | 第33-34页 |
| 2.7.2 配置标准品的具体方法 | 第34-35页 |
| 2.8 小鼠不同时期睾丸、卵巢组织的石蜡包埋和HE染色 | 第35-36页 |
| 2.8.1 组织包埋 | 第35页 |
| 2.8.2 HE染色 | 第35-36页 |
| 2.9 免疫荧光染色 | 第36页 |
| 2.10 统计学分析 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-53页 |
| 3.1 小鼠睾丸和卵巢组织的形态特征 | 第37-38页 |
| 3.2 小鼠不同时期睾丸和卵巢组织学特征 | 第38-43页 |
| 3.2.1 雄性小鼠12.5dpc期及新生一周睾丸组织学特征 | 第38-39页 |
| 3.2.2 成年小鼠的睾丸组织学特征 | 第39-40页 |
| 3.2.3 雌性小鼠12.5dpc期及新生一周卵巢组织学特征 | 第40-41页 |
| 3.2.4 小鼠成年期卵巢黄体期的组织学特征 | 第41-42页 |
| 3.2.5 小鼠成年期卵巢卵泡期的组织学特征 | 第42-43页 |
| 3.3 m6A在小鼠睾丸和卵巢组织内不同时期的分布定位 | 第43-45页 |
| 3.3.1 m6A在雄性小鼠睾丸组织内不同时期的分布定位 | 第43-44页 |
| 3.3.2 m6A在雌性小鼠的卵巢组织内不同时期的分布定位 | 第44-45页 |
| 3.4 点杂交所示m6A信号在小鼠睾丸和卵巢组织内不同时期的变化 | 第45-46页 |
| 3.4.1 m6A在雄性小鼠睾丸组织内不同时期点杂交结果 | 第45页 |
| 3.4.2 m6A在雌性小鼠卵巢组织内不同时期点杂交结果 | 第45-46页 |
| 3.5 通过LC-MS所测m6A含量在小鼠睾丸和卵巢不同时期的变化 | 第46-49页 |
| 3.5.1 质谱实验标准品测量及标准曲线的建立 | 第46-47页 |
| 3.5.2 雄性小鼠睾丸组织内不同时期m6A含量变化 | 第47-48页 |
| 3.5.3 雌性小鼠卵巢组织内不同时期m6A含量变化 | 第48-49页 |
| 3.6 m6A的甲基转移酶和去甲基转移酶的表达量在小鼠睾丸和卵巢组织中不同时期表达量的变化 | 第49-53页 |
| 3.6.1 甲基转移酶mettl3/mettl14表达量的升高促进了睾丸组织中m6A含量上升 | 第49-50页 |
| 3.6.2 甲基转移酶mettl3/mettl14表达量的升高促进了卵巢组织中m6A含量上升 | 第50页 |
| 3.6.3 去甲基转移酶fto/alkbh5表达量的升高促进了睾丸不同时期组织中m6A含量降低 | 第50-51页 |
| 3.6.4 去甲基转移酶fto/alkbh5表达量的升高促进了卵巢不同时期组织中m6A含量降低 | 第51-52页 |
| 3.6.5 甲基转移酶mettl3/mettl14和去甲基转移酶fto/alkbh5在小鼠睾丸不同时期的表达量对比 | 第52页 |
| 3.6.6 甲基转移酶mettl3/mettl14和去甲基转移酶fto/alkbh5在小鼠卵巢不同时期的表达量对比 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| 4.1 m6A在小鼠的睾丸和卵巢的不同时期的分布定位 | 第53-54页 |
| 4.2 m6A在小鼠睾丸和卵巢组织内不同时期的含量差异 | 第54-55页 |
| 4.3 甲基化酶(mettl3/mettl14)在小鼠睾丸和卵巢组织中不同时期的表达差异 | 第55页 |
| 4.4 去甲基化酶(fto/alkbh5)在小鼠睾丸和卵巢组织中不同时期的表达差异 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 附录 生化与分子生物学实验常用缓冲液配方 | 第64-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
