摘要 | 第9-10页 |
英文摘要 | 第10页 |
1 前言 | 第12-18页 |
1.1 研究的目的与意义 | 第12页 |
1.2 文献综述 | 第12-17页 |
1.2.1 C2H2型锌指蛋白的概念与结构 | 第12-13页 |
1.2.2 C2H2型锌指蛋白的分类 | 第13-14页 |
1.2.3 C2H2型锌指蛋白的功能 | 第14-16页 |
1.2.4 番茄中的C2H2型锌指蛋白 | 第16-17页 |
1.3 技术路线 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-30页 |
2.1 番茄C2H2型锌指蛋白家族生物信息学的分析 | 第18页 |
2.1.1 番茄C2H2型锌指蛋白家族成员的鉴定和进化分析 | 第18页 |
2.1.2 番茄C2H2型锌指蛋白基因结构和基序分析 | 第18页 |
2.1.3 番茄C2H2型锌指蛋白基因染色体定位 | 第18页 |
2.1.4 番茄C2H2型锌指蛋白基因顺式作用元件分析 | 第18页 |
2.2 番茄C2H2型锌指蛋白基因组织特异性表达及胁迫处理下荧光定量表达分析 | 第18-22页 |
2.2.1 植物材料和胁迫处理 | 第18-19页 |
2.2.2 营养液的配制 | 第19页 |
2.2.3 RNA的提取和反转录 | 第19-22页 |
2.3 番茄C2H2型锌指蛋白基因SlZF-36VIGS分析 | 第22-28页 |
2.3.1 pTRV2:SlZF-36沉默载体构建 | 第22-26页 |
2.3.2 番茄植株侵染 | 第26-27页 |
2.3.3 SlZF-36沉默植株鉴定 | 第27页 |
2.3.4 SlZF-36沉默植株胁迫处理及基因表达量检测 | 第27-28页 |
2.4 胁迫植株的相关生理指标的测定 | 第28-30页 |
2.4.1 丙二醛(MDA)活性检测 | 第28页 |
2.4.2 过氧化物酶(POD)活性检测 | 第28-29页 |
2.4.3 气孔观察 | 第29页 |
2.4.4 活性氧检测 | 第29页 |
2.4.5 叶绿素荧光参数检测 | 第29-30页 |
3 结果与分析 | 第30-45页 |
3.1 番茄C2H2型锌指蛋白家族生物信息学的分析 | 第30-34页 |
3.1.1 番茄C2H2型锌指蛋白家族成员鉴定及进化分析 | 第30页 |
3.1.2 番茄C2H2型锌指蛋白基因结构和基序分析 | 第30-32页 |
3.1.3 番茄C2H2型锌指蛋白基因染色体定位 | 第32页 |
3.1.4 番茄C2H2型锌指蛋白基因顺式作用元件分析 | 第32-34页 |
3.2 番茄C2H2型锌指蛋白基因组织特异性表达分析 | 第34-35页 |
3.2.1 植物组织取样结果 | 第34页 |
3.2.2 RNA提取结果 | 第34页 |
3.2.3 组织特异性表达分析 | 第34-35页 |
3.3 番茄C2H2型锌指蛋白基因在胁迫处理下荧光定量表达分析 | 第35-37页 |
3.3.1 胁迫处理下番茄叶片总RNA提取 | 第35-36页 |
3.3.2 胁迫处理基因的表达分析 | 第36-37页 |
3.4 pTRV2:SlZF-36基因沉默载体的构建及农杆菌侵染 | 第37-39页 |
3.4.1 SlZF-36片段扩增 | 第37页 |
3.4.2 pTRV2空载质粒及pTRV2:PDS质粒提取 | 第37页 |
3.4.3 质粒双酶切鉴定 | 第37页 |
3.4.4 重组质粒测序结果 | 第37页 |
3.4.5 PDS沉默结果 | 第37-38页 |
3.4.6 SlZF-36沉默植株胁迫处理表型观察结果 | 第38-39页 |
3.5 SlZF-36沉默植株和空载对照植株胁迫处理基因表达量检测 | 第39-40页 |
3.6 SlZF-36沉默植株相关生理指标的测定 | 第40-45页 |
3.6.1 丙二醛(MDA)活性检测 | 第40-42页 |
3.6.2 过氧化物酶(POD)活性检测 | 第42页 |
3.6.3 气孔观察 | 第42页 |
3.6.4 活性氧检测 | 第42-44页 |
3.6.5 叶绿素荧光参数检测 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
4.1 番茄C2H2型锌指转录因子家族生物信息学分析 | 第45页 |
4.2 番茄C2H2型转录因子家族基因表达分析 | 第45-46页 |
4.3 番茄SlZF-36基因沉默载体遗传转化分析 | 第46-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第54页 |