| 摘要 | 第9-10页 |
| ABSTRACT | 第10页 |
| 第一章 绪论 | 第11-30页 |
| 1.1 研究背景及目的意义 | 第11-13页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第13-27页 |
| 1.2.1 藤壶简介 | 第13-16页 |
| 1.2.2 藤壶胶的成分与功能研究 | 第16-20页 |
| 1.2.3 藤壶胶的交联固化机制 | 第20-22页 |
| 1.2.4 藤壶52kDa胶蛋白 | 第22-27页 |
| 1.3 本课题主要研究内容 | 第27-30页 |
| 第二章 大肠杆菌表达红巨藤壶52kDa胶蛋白 | 第30-53页 |
| 2.1 红巨藤壶Mrcp-52k基因的获取 | 第30-34页 |
| 2.1.1 Mrcp-52k基因密码子偏好性分析 | 第31页 |
| 2.1.2 Mrcp-52k基因的优化与合成 | 第31-34页 |
| 2.2 Mrcp-52k基因载体的构建 | 第34-40页 |
| 2.2.1 PCR扩增Mrcp-52k基因片段 | 第34-37页 |
| 2.2.2 酶切Mrcp-52k基因片段与载体 | 第37-38页 |
| 2.2.3 Mrcp-52k基因和载体连接与测序验证 | 第38-40页 |
| 2.3 Mrcp-52k蛋白的诱导表达 | 第40-48页 |
| 2.3.1 重组质粒转化宿主菌株BL21(DE3) | 第41-43页 |
| 2.3.2 Mrcp-52k蛋白的诱导表达 | 第43-48页 |
| 2.4 rMrcp-52k蛋白的纯化与定量 | 第48-51页 |
| 2.4.1 rMrcp-52k蛋白的纯化 | 第49-50页 |
| 2.4.2 rMrcp-52k蛋白的浓缩与定量 | 第50-51页 |
| 2.5 本章小结 | 第51-53页 |
| 第三章 毕赤酵母表达红巨藤壶52kDa胶蛋白 | 第53-73页 |
| 3.1 Mrcp-52k基因的优化及合成 | 第53-57页 |
| 3.2 Mrcp-52k基因载体的构建 | 第57-63页 |
| 3.2.1 PCR扩增Mrcp-52k基因片段 | 第58-60页 |
| 3.2.2 酶切Mrcp-52k基因片段与载体 | 第60-61页 |
| 3.2.3 连接Mrcp-52k基因和载体与测序验证 | 第61-63页 |
| 3.3 重组质粒的转化及验证 | 第63-68页 |
| 3.3.1 重组质粒的线性化与转化 | 第63-65页 |
| 3.3.2 X-33菌株转化子的表型筛选 | 第65-68页 |
| 3.4 Mrcp-52k基因在X-33菌株中的诱导表达 | 第68-71页 |
| 3.5 本章小结 | 第71-73页 |
| 第四章 红巨藤壶rMrcp-52k的功能研究 | 第73-83页 |
| 4.1 红巨藤壶rMrcp-52k蛋白的黏性检测 | 第74-77页 |
| 4.1.1 CBB染色定性观察rMrcp-52k蛋白的粘附情况 | 第74-75页 |
| 4.1.2 QCM定量检测rMrcp-52k蛋白的黏性 | 第75-77页 |
| 4.2 红巨藤壶rMrcp-52k蛋白的形貌观察 | 第77-78页 |
| 4.3 红巨藤壶rMrcp-52k蛋白的自组装研究 | 第78-81页 |
| 4.3.1 硫黄素T染色鉴定 | 第79-80页 |
| 4.3.2 原子力显微镜检测 | 第80-81页 |
| 4.4 本章小结 | 第81-83页 |
| 第五章 结论与展望 | 第83-85页 |
| 5.1 主要结论 | 第83-84页 |
| 5.2 展望 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-89页 |
| 参考文献 | 第89-95页 |
| 作者在学期间取得的学术成果 | 第95-96页 |
| 附录一 常用溶液配方 | 第96-97页 |
| 附录二 主要仪器设备 | 第97-98页 |
| 附录三 实验步骤 | 第98页 |
