摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩写词 | 第8-12页 |
1 前言 | 第12-22页 |
1.1 高盐对植物的危害 | 第12页 |
1.2 抗盐过程的调控和抗盐调控基因 | 第12-18页 |
1.2.1 离子转运家族 | 第12-15页 |
1.2.2 转录因子调控 | 第15页 |
1.2.3 SOS信号通路 | 第15-16页 |
1.2.4 MAPK通路 | 第16-17页 |
1.2.5 响应盐胁迫的其他类基因 | 第17-18页 |
1.3 棉花耐盐性相关研究 | 第18-21页 |
1.3.1 抗盐相关基因 | 第18-20页 |
1.3.2 不同棉花品种间的调控差异 | 第20-21页 |
1.4 立题依据 | 第21-22页 |
2 材料和方法 | 第22-34页 |
2.1 实验材料、菌株和载体 | 第22-23页 |
2.2 常用生物学网站和软件 | 第23页 |
2.3 实验试剂 | 第23-25页 |
2.3.1 常用培养基 | 第23页 |
2.3.2 抗生素溶液 | 第23-24页 |
2.3.3 Na~+染色试剂 | 第24页 |
2.3.4 VIGS溶液 | 第24页 |
2.3.5 生理生化指标测定相关溶液 | 第24页 |
2.3.6 酵母相关溶液和培养基 | 第24-25页 |
2.4 棉花相关溶液和培养基 | 第25-26页 |
2.4.1 生根培养基 | 第25-26页 |
2.4.2 Hoagland水培溶液 | 第26页 |
2.5 实验方法 | 第26-32页 |
2.5.1 棉花的培育 | 第26-27页 |
2.5.2 酵母和棉花RNA的提取、反转录和PCR | 第27页 |
2.5.3 棉花DNA的提取与鉴定 | 第27页 |
2.5.4 载体构建 | 第27-28页 |
2.5.5 酵母筛库与检测 | 第28-29页 |
2.5.6 酵母转化 | 第29-30页 |
2.5.7 酵母回补实验 | 第30页 |
2.5.8 Na~+、K~+含量测定 | 第30-31页 |
2.5.9 Na~+染色 | 第31页 |
2.5.10 生理生化指标测定 | 第31页 |
2.5.11 烟草瞬时转化 | 第31页 |
2.5.12 病毒诱导基因沉默技术 | 第31-32页 |
2.6 引物 | 第32-34页 |
3 结果与分析 | 第34-50页 |
3.1 盐处理下GbSRP1的表达模式分析 | 第34页 |
3.2 GbSRP1干涉材料的耐盐性分析 | 第34-37页 |
3.2.1 沉默GbSRP1降低棉花的耐盐性 | 第35-36页 |
3.2.2 GbSRP1干涉材料Na~+、K~+含量的测定 | 第36-37页 |
3.2.3 GbSRP1干涉材料的Na~+染色 | 第37页 |
3.3 GbSRP1在酵母中的耐盐性分析 | 第37-39页 |
3.4 GbSRP1超表达棉花植株的耐盐性分析 | 第39-42页 |
3.4.1 GbSRP1超表达棉花材料的获得及分子鉴定 | 第39-40页 |
3.4.2 GbSRP1超表达植株的耐盐性鉴定 | 第40-42页 |
3.5 GbSRP1互作蛋白的筛选 | 第42-50页 |
3.5.1 GbSRP1诱饵载体的构建 | 第42页 |
3.5.2 GbSRP1蛋白自激活验证和毒性检测 | 第42-44页 |
3.5.3 Mating筛选互作蛋白并测序 | 第44-45页 |
3.5.4 互作蛋白的BIFC验证 | 第45-46页 |
3.5.5 筛选的互作蛋白的定位分析 | 第46-50页 |
4 讨论 | 第50-54页 |
4.1 GbSRP1干涉材料盐处理转运Na~+能力降低 | 第50-51页 |
4.2 GbSRP1可以提高酵母离子突变体的抗盐性 | 第51页 |
4.3 GbSRP1超表达棉花的抗盐性分析 | 第51-52页 |
4.4 与GbSRP1互作蛋白的筛选及其分析 | 第52-54页 |
5 结论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
致谢 | 第64-66页 |