| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 1 材料与方法 | 第15-33页 |
| 1.1 主要实验仪器 | 第15页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第15-16页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第16-20页 |
| 1.4 实验方法 | 第20-33页 |
| 1.4.1 细胞复苏 | 第20页 |
| 1.4.2 细胞传代 | 第20-21页 |
| 1.4.3 细胞计数与铺板 | 第21页 |
| 1.4.4 细胞转染 | 第21-22页 |
| 1.4.5 细胞冻存 | 第22页 |
| 1.4.6 蛋白质的提取及浓度的测定 | 第22-23页 |
| 1.4.7 WesternBlot | 第23-25页 |
| 1.4.8 RNA的提取 | 第25页 |
| 1.4.9 反转录 | 第25-26页 |
| 1.4.10 RealtimePCR | 第26页 |
| 1.4.11 免疫荧光 | 第26-27页 |
| 1.4.12 构建质粒 | 第27-30页 |
| 1.4.13 Pulldown | 第30页 |
| 1.4.14 溶酶体PH检测 | 第30-31页 |
| 1.4.15 蛋白降解检测 | 第31页 |
| 1.4.16 分离溶酶体 | 第31-33页 |
| 2 实验结果 | 第33-47页 |
| 2.1 晶状体上皮细胞中,过表达HSF4b增强蛋白的稳定性 | 第33-34页 |
| 2.2 敲除alphaB-crystallin明显降低Hsf4介导的ATP6V1A的蛋白稳定性 | 第34-36页 |
| 2.3 AlphaB-crystallin缺失促进ATP6V1A的泛素化,促其通过泛素蛋白酶体途径降解 | 第36-39页 |
| 2.4 ATP6V1A与alphaB-crystallin在溶酶体上相互作用 | 第39-40页 |
| 2.5 AlphaB-crystallin只与ATP6V1A亚基相互作用 | 第40-41页 |
| 2.6 AlphaB-crystallin的各截短体与ATP6V1A无相互作用,磷酸化修饰也不参与其与ATP6V1A的相互作用 | 第41-43页 |
| 2.7 mTOR通路参与ATP6V1A与alphaB-crystallin的相互作用,进而调控溶酶体PH | 第43-47页 |
| 3 讨论 | 第47-51页 |
| 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 综述 溶酶体在器官发育中的作用 | 第55-69页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 在读期间参加的学术活动及研究成果 | 第71-72页 |
