链霉菌SH-62中羊毛硫抗生素和雷纳霉素类似物生物合成基因簇的研究
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语(Abbreviations) | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-22页 |
| 1 抗生素的种类 | 第12-15页 |
| 2 羊毛硫抗生素的研究 | 第15-21页 |
| 2.1 羊毛硫抗生素的分类和一般生物合成机制 | 第15-17页 |
| 2.2 羊毛硫抗生素的作用机制 | 第17-18页 |
| 2.3 获取新型羊毛硫抗生素的方法 | 第18-19页 |
| 2.4 提高羊毛硫抗生素产量的方法 | 第19-20页 |
| 2.5 羊毛硫抗生素的应用前景 | 第20-21页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-39页 |
| 1 实验材料 | 第22-31页 |
| 1.1 实验所用的菌株和质粒 | 第22-24页 |
| 1.2 引物 | 第24-26页 |
| 1.3 培养基 | 第26-28页 |
| 1.4 主要生化试剂 | 第28-30页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第30-31页 |
| 2 实验方法 | 第31-39页 |
| 2.1 链霉菌培养及菌种保藏 | 第31-32页 |
| 2.2 大肠杆菌质粒提取 | 第32-33页 |
| 2.3 酶连反应 | 第33页 |
| 2.4 DNA片段胶回收试剂盒回收 | 第33页 |
| 2.5 普通感受态细胞制备及DNA转化 | 第33-34页 |
| 2.6 PCR扩增反应 | 第34页 |
| 2.7 链霉菌基因组总DNA的提取 | 第34页 |
| 2.8 链霉菌质粒DNA的小量提取 | 第34-35页 |
| 2.9 醋酸钠纯化DNA | 第35页 |
| 2.10 大肠杆菌-链霉菌属间接合转移 | 第35-36页 |
| 2.11 链霉菌生物活性测定 | 第36页 |
| 2.12 链霉菌发酵萃取 | 第36页 |
| 2.13 HPLC检测 | 第36-37页 |
| 2.14 LC-MS分析 | 第37页 |
| 2.15 生物信息学分析工具 | 第37-39页 |
| 第三章 羊毛硫抗生素合成基因簇lah的研究 | 第39-66页 |
| 1 前言 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-64页 |
| 2.1 生物信息学分析 | 第39-45页 |
| 2.2 Lah基因簇的异源表达 | 第45-51页 |
| 2.3 关键基因的敲除 | 第51-57页 |
| 2.4 超表达质粒的构建 | 第57-64页 |
| 3 讨论 | 第64-66页 |
| 第四章 lem基因簇的研究 | 第66-76页 |
| 1 前言 | 第66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-74页 |
| 2.1 异源表达菌株的生物活性测定和HPLC分析 | 第66-69页 |
| 2.2 关键基因lemL的敲除 | 第69-74页 |
| 3 讨论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
