| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 miRNA的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1.1 miRNA的发现历程 | 第11页 |
| 1.1.2 miRNA的结构及其分类 | 第11页 |
| 1.1.3 miRNA的生物合成及作用机制 | 第11-12页 |
| 1.1.4 miRNA的表达特征 | 第12-13页 |
| 1.1.5 miRNA的功能 | 第13页 |
| 1.2 果蝇的免疫研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.1 果蝇的生物学特性以及优势 | 第13-14页 |
| 1.2.2 果蝇的免疫学概况 | 第14页 |
| 1.2.3 果蝇的体液免疫 | 第14-15页 |
| 1.2.4 果蝇的细胞免疫 | 第15-16页 |
| 1.3 miRNA调控果蝇免疫的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.4 本论文研究的意义 | 第18-19页 |
| 1.5 本论文的创新点 | 第19-20页 |
| 1.6 本论文的技术路线 | 第20-21页 |
| 第2章 miR-964相关果蝇株生存情况统计 | 第21-27页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料、试剂和仪器 | 第21-22页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第22页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-24页 |
| 2.3.1 果蝇的饲养 | 第22-23页 |
| 2.3.2 果蝇样品的收集 | 第23-24页 |
| 2.3.3 果蝇的菌液刺激 | 第24页 |
| 2.3.4 果蝇致死率的观察 | 第24页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第24-26页 |
| 2.4.1 miR-964相关果蝇株生存情况 | 第24-26页 |
| 2.5 讨论 | 第26-27页 |
| 第3章 miR-964负调控果蝇Toll信号通路 | 第27-42页 |
| 3.1 引言 | 第27页 |
| 3.2 实验材料、试剂和仪器 | 第27-28页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第28页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第28页 |
| 3.3 实验方法 | 第28-35页 |
| 3.3.1 果蝇的饲养 | 第28-29页 |
| 3.3.2 果蝇样品的收集 | 第29-30页 |
| 3.3.3 果蝇的菌液刺激 | 第30页 |
| 3.3.4 miR-964回复果蝇的构建 | 第30-31页 |
| 3.3.5 果蝇Drosomycin-GFP报告基因系统 | 第31页 |
| 3.3.6 果蝇的总RNA的提取 | 第31-32页 |
| 3.3.7 果蝇的基因实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
| 3.3.8 果蝇的miRNA实时荧光定量PCR | 第33-35页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第35-40页 |
| 3.4.1 野生型果蝇受M.luteus刺激后体内基因miR-964的表达量 | 第35-36页 |
| 3.4.2 miR-964相关果蝇株受M.luteus刺激后体内抗菌肽基因Drs的表达量 | 第36-38页 |
| 3.4.3 miR-964回复果蝇检测结果 | 第38-40页 |
| 3.4.3.1 miR-964回复果蝇qRT-PCR检测结果 | 第38-39页 |
| 3.4.3.2 miR-964回复果蝇Drosomycin-GFP报告基因系统检测结果 | 第39-40页 |
| 3.5 讨论 | 第40-42页 |
| 第4章 miR-964靶基因的预测和筛选 | 第42-46页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 实验材料 | 第42-43页 |
| 4.2.1 TargetScan预测软件 | 第42页 |
| 4.2.2 miRanda预测软件 | 第42-43页 |
| 4.2.3 PITA预测软件 | 第43页 |
| 4.3 实验方法 | 第43页 |
| 4.3.1 数据收集 | 第43页 |
| 4.3.2 靶基因预测软件 | 第43页 |
| 4.3.3 Draw Venn Diagram和Cytoscape软件分析 | 第43页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第43-45页 |
| 4.4.1 Toll信号通路相关的miR-964靶基因预测结果 | 第43-45页 |
| 4.5 讨论 | 第45-46页 |
| 第5章 体外验证miR-964靶标关系 | 第46-54页 |
| 5.1 引言 | 第46页 |
| 5.2 实验材料、试剂和仪器 | 第46-48页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第47页 |
| 5.2.3 实验仪器 | 第47-48页 |
| 5.3 实验方法 | 第48-50页 |
| 5.3.1 果蝇S2细胞的培养 | 第48页 |
| 5.3.2 双荧光素酶报告系统实验的构建和检测 | 第48-50页 |
| 5.4 实验结果与分析 | 第50-53页 |
| 5.4.1 miR-964相关靶位点信息 | 第50-51页 |
| 5.4.2 双荧光素酶报告系统实验检测结果 | 第51-53页 |
| 5.5 讨论 | 第53-54页 |
| 第6章 体内验证miR-964靶标关系 | 第54-65页 |
| 6.1 引言 | 第54页 |
| 6.2 实验材料、试剂和仪器 | 第54-56页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第54-55页 |
| 6.2.2 实验试剂 | 第55页 |
| 6.2.3 实验仪器 | 第55-56页 |
| 6.3 实验方法 | 第56-62页 |
| 6.3.1 果蝇的饲养 | 第56-57页 |
| 6.3.2 果蝇样品的收集 | 第57页 |
| 6.3.3 果蝇的菌液刺激 | 第57-58页 |
| 6.3.4 果蝇的总RNA的提取 | 第58页 |
| 6.3.5 果蝇的基因实时荧光定量PCR | 第58-60页 |
| 6.3.6 Western Blotting | 第60-62页 |
| 6.4 实验结果与分析 | 第62-64页 |
| 6.4.1 miR-964高表达果蝇受M.luteus刺激后体内其他基因的表达量 | 第62-63页 |
| 6.4.2 Western Blotting结果 | 第63-64页 |
| 6.5 讨论 | 第64-65页 |
| 第7章 结论 | 第65-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
