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Ficolin-like、Toll和IMD在日本沼虾先天免疫中的功能研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 绪论第10-16页
    1.1 日本沼虾的概况及主要病害第10页
        1.1.1 日本沼虾的概况第10页
        1.1.2 日本沼虾的主要病害第10页
    1.2 无脊椎动物的免疫防御机制第10-12页
        1.2.1 物理防御第10-11页
        1.2.2 体液免疫第11-12页
        1.2.3 细胞免疫第12页
        1.2.4 模式识别受体第12页
    1.3 无脊椎动物的免疫相关信号通路第12-13页
        1.3.1 Toll信号通路第13页
        1.3.2 IMD信号通路第13页
    1.4 凝集素第13-14页
        1.4.1 凝集素的分类第13-14页
        1.4.2 纤维胶凝蛋白(Ficolin)第14页
    1.5 本研究的目的、内容及意义第14-15页
    1.6 实验技术路线第15-16页
第二章 两种ficolin-like蛋白在日本沼虾先天免疫防御中的作用第16-42页
    2.1 引言第16-17页
    2.2 材料与方法第17-28页
        2.2.1 实验动物、菌株及载体第17页
        2.2.2 主要试剂和仪器第17-18页
        2.2.3 主要实验试剂配方第18-19页
        2.2.4 日本沼虾的免疫刺激第19-20页
        2.2.5 总RNA提取和cDNA合成第20页
        2.2.6 日本沼虾MnFico1和MnFico2全长克隆第20-21页
        2.2.7 序列信息分析第21-22页
        2.2.8 组织分布和表达模式第22页
        2.2.9 RNA干扰(RNAi)和抗菌肽的表达第22-23页
        2.2.10 MnFico1和MnFico2重组蛋白的表达和纯化第23-25页
        2.2.11 细菌结合实验第25-26页
        2.2.12 糖结合实验第26页
        2.2.13 细菌凝集实验第26页
        2.2.14 细菌清除实验第26-28页
    2.3 结果第28-39页
        2.3.1 MnFico1和MnFico2的基因克隆第28-30页
        2.3.2 MnFico1和MnFico2的系统发育分析及多序列比对第30-32页
        2.3.3 MnFico1和MnFico2的组织分布和表达模式第32-33页
        2.3.4 MnFico1和MnFico2 RNAi后AMP基因的表达第33-36页
        2.3.5 MnFicos的重组表达及其结合活性第36-38页
        2.3.6 rMnFico1和rMnFico2的凝集活性和细菌清除实验第38-39页
    2.4 讨论第39-42页
第三章 日本沼虾MnToll1基因调节抗菌肽的表达第42-52页
    3.1 引言第42页
    3.2 材料和方法第42-44页
        3.2.1 实验动物及免疫刺激第42-43页
        3.2.2 主要试剂、仪器及菌株第43页
        3.2.3 RNA提取和cDNA合成第43页
        3.2.4 日本沼虾MnToll1 cDNA全长克隆第43页
        3.2.5 序列信息分析第43页
        3.2.6 组织分布和表达模式第43页
        3.2.7 RNA干扰(RNAi)和抗菌肽的表达第43-44页
    3.3 结果第44-50页
        3.3.1 日本沼虾中MnToll1的鉴定及系统发育分析第44-46页
        3.3.2 MnToll1的组织分布和表达模式第46-47页
        3.3.3 抗菌肽的表达受到MnToll1在日本沼虾中的调节第47-50页
    3.4 讨论第50-52页
第四章 日本沼虾的免疫缺陷同系物(IMD)克隆和功能研究第52-63页
    4.1 引言第52页
    4.2 材料和方法第52-54页
        4.2.1 实验动物及免疫刺激第52页
        4.2.2 主要试剂、仪器、菌株及载体第52页
        4.2.3 RNA提取和cDNA合成第52-53页
        4.2.4 日本沼虾MnIMD cDNA全长克隆第53页
        4.2.5 序列信息分析第53页
        4.2.6 组织分布和表达模式第53页
        4.2.7 MnIMD重组蛋白的表达和纯化及抗体制备第53页
        4.2.8 Western blot法检测组织分布第53页
        4.2.9 RNA干扰(RNAi)和抗菌肽的表达第53-54页
    4.3 结果第54-61页
        4.3.1 MnIMD的全长cEDNA第54-55页
        4.3.2 MnIMD的序列和系统发育分析第55-57页
        4.3.3 MnIMD的组织分布和表达模式第57-59页
        4.3.4 MnIMD调节抗菌肽的表达第59-61页
    4.4 讨论第61-63页
全文总结第63-64页
参考文献第64-74页
在读期间发表的学术论文及研究成果第74-75页
致谢第75页

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