| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-16页 |
| 1.1 日本沼虾的概况及主要病害 | 第10页 |
| 1.1.1 日本沼虾的概况 | 第10页 |
| 1.1.2 日本沼虾的主要病害 | 第10页 |
| 1.2 无脊椎动物的免疫防御机制 | 第10-12页 |
| 1.2.1 物理防御 | 第10-11页 |
| 1.2.2 体液免疫 | 第11-12页 |
| 1.2.3 细胞免疫 | 第12页 |
| 1.2.4 模式识别受体 | 第12页 |
| 1.3 无脊椎动物的免疫相关信号通路 | 第12-13页 |
| 1.3.1 Toll信号通路 | 第13页 |
| 1.3.2 IMD信号通路 | 第13页 |
| 1.4 凝集素 | 第13-14页 |
| 1.4.1 凝集素的分类 | 第13-14页 |
| 1.4.2 纤维胶凝蛋白(Ficolin) | 第14页 |
| 1.5 本研究的目的、内容及意义 | 第14-15页 |
| 1.6 实验技术路线 | 第15-16页 |
| 第二章 两种ficolin-like蛋白在日本沼虾先天免疫防御中的作用 | 第16-42页 |
| 2.1 引言 | 第16-17页 |
| 2.2 材料与方法 | 第17-28页 |
| 2.2.1 实验动物、菌株及载体 | 第17页 |
| 2.2.2 主要试剂和仪器 | 第17-18页 |
| 2.2.3 主要实验试剂配方 | 第18-19页 |
| 2.2.4 日本沼虾的免疫刺激 | 第19-20页 |
| 2.2.5 总RNA提取和cDNA合成 | 第20页 |
| 2.2.6 日本沼虾MnFico1和MnFico2全长克隆 | 第20-21页 |
| 2.2.7 序列信息分析 | 第21-22页 |
| 2.2.8 组织分布和表达模式 | 第22页 |
| 2.2.9 RNA干扰(RNAi)和抗菌肽的表达 | 第22-23页 |
| 2.2.10 MnFico1和MnFico2重组蛋白的表达和纯化 | 第23-25页 |
| 2.2.11 细菌结合实验 | 第25-26页 |
| 2.2.12 糖结合实验 | 第26页 |
| 2.2.13 细菌凝集实验 | 第26页 |
| 2.2.14 细菌清除实验 | 第26-28页 |
| 2.3 结果 | 第28-39页 |
| 2.3.1 MnFico1和MnFico2的基因克隆 | 第28-30页 |
| 2.3.2 MnFico1和MnFico2的系统发育分析及多序列比对 | 第30-32页 |
| 2.3.3 MnFico1和MnFico2的组织分布和表达模式 | 第32-33页 |
| 2.3.4 MnFico1和MnFico2 RNAi后AMP基因的表达 | 第33-36页 |
| 2.3.5 MnFicos的重组表达及其结合活性 | 第36-38页 |
| 2.3.6 rMnFico1和rMnFico2的凝集活性和细菌清除实验 | 第38-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-42页 |
| 第三章 日本沼虾MnToll1基因调节抗菌肽的表达 | 第42-52页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 材料和方法 | 第42-44页 |
| 3.2.1 实验动物及免疫刺激 | 第42-43页 |
| 3.2.2 主要试剂、仪器及菌株 | 第43页 |
| 3.2.3 RNA提取和cDNA合成 | 第43页 |
| 3.2.4 日本沼虾MnToll1 cDNA全长克隆 | 第43页 |
| 3.2.5 序列信息分析 | 第43页 |
| 3.2.6 组织分布和表达模式 | 第43页 |
| 3.2.7 RNA干扰(RNAi)和抗菌肽的表达 | 第43-44页 |
| 3.3 结果 | 第44-50页 |
| 3.3.1 日本沼虾中MnToll1的鉴定及系统发育分析 | 第44-46页 |
| 3.3.2 MnToll1的组织分布和表达模式 | 第46-47页 |
| 3.3.3 抗菌肽的表达受到MnToll1在日本沼虾中的调节 | 第47-50页 |
| 3.4 讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 日本沼虾的免疫缺陷同系物(IMD)克隆和功能研究 | 第52-63页 |
| 4.1 引言 | 第52页 |
| 4.2 材料和方法 | 第52-54页 |
| 4.2.1 实验动物及免疫刺激 | 第52页 |
| 4.2.2 主要试剂、仪器、菌株及载体 | 第52页 |
| 4.2.3 RNA提取和cDNA合成 | 第52-53页 |
| 4.2.4 日本沼虾MnIMD cDNA全长克隆 | 第53页 |
| 4.2.5 序列信息分析 | 第53页 |
| 4.2.6 组织分布和表达模式 | 第53页 |
| 4.2.7 MnIMD重组蛋白的表达和纯化及抗体制备 | 第53页 |
| 4.2.8 Western blot法检测组织分布 | 第53页 |
| 4.2.9 RNA干扰(RNAi)和抗菌肽的表达 | 第53-54页 |
| 4.3 结果 | 第54-61页 |
| 4.3.1 MnIMD的全长cEDNA | 第54-55页 |
| 4.3.2 MnIMD的序列和系统发育分析 | 第55-57页 |
| 4.3.3 MnIMD的组织分布和表达模式 | 第57-59页 |
| 4.3.4 MnIMD调节抗菌肽的表达 | 第59-61页 |
| 4.4 讨论 | 第61-63页 |
| 全文总结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
