| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-22页 |
| 1.1 表乳糖概述 | 第13-16页 |
| 1.1.1 表乳糖的来源 | 第13页 |
| 1.1.2 化学法合成表乳糖 | 第13页 |
| 1.1.3 酶法转化制备表乳糖 | 第13-16页 |
| 1.1.4 表乳糖的益生功能 | 第16页 |
| 1.2 仔猪肠道微生物概述 | 第16-18页 |
| 1.2.1 仔猪肠道微生物的特点 | 第16-17页 |
| 1.2.2 寡糖对仔猪肠道的益生作用 | 第17-18页 |
| 1.3 乳杆菌概述 | 第18-19页 |
| 1.3.1 乳杆菌的特点 | 第18页 |
| 1.3.2 乳杆菌对多糖的降解和利用 | 第18-19页 |
| 1.4 研究背景和意义 | 第19-20页 |
| 1.5 研究内容和目标 | 第20-21页 |
| 1.6 技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 表乳糖的制备与检测 | 第22-38页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第22-25页 |
| 2.2.1 实验材料和试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 | 第23页 |
| 2.2.3 培养基及相关溶液的配制 | 第23-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-31页 |
| 2.3.1 大肠杆菌pPIC9k-RaCE/Top10质粒提取 | 第25页 |
| 2.3.2 质粒pPIC9k-RaCE/Top10转化毕赤酵母GS | 第25-26页 |
| 2.3.3 阳性转化子的筛选 | 第26-28页 |
| 2.3.4 RaCE的诱导表达 | 第28页 |
| 2.3.5 BSA法测定酶蛋白浓度 | 第28页 |
| 2.3.6 RaCE的酶学性质测定 | 第28-29页 |
| 2.3.7 表乳糖的制备 | 第29-30页 |
| 2.3.8 中压制备色谱纯化表乳糖 | 第30-31页 |
| 2.4 结果与分析 | 第31-37页 |
| 2.4.1 重组质粒酶切产物检测结果 | 第31页 |
| 2.4.2 阳性转化子筛选结果 | 第31-33页 |
| 2.4.3 RaCE的酶活测定 | 第33页 |
| 2.4.4 pH和温度对RaCE活性的影响 | 第33-34页 |
| 2.4.5 底物浓度对转化率的影响 | 第34页 |
| 2.4.6 表乳糖的大量制备 | 第34-35页 |
| 2.4.7 表乳糖的纯化 | 第35-37页 |
| 2.5 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 仔猪肠道中可利用表乳糖的乳杆菌的筛选 | 第38-51页 |
| 3.1 引言 | 第38页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第38-40页 |
| 3.2.1 实验材料和试剂 | 第38-39页 |
| 3.2.2 实验室仪器与设备 | 第39页 |
| 3.2.3 培养基及相关溶液的配制 | 第39-40页 |
| 3.3 实验方法 | 第40-42页 |
| 3.3.1 粪便样品的采集处理 | 第40页 |
| 3.3.2 高通量测序分析 | 第40页 |
| 3.3.3 仔猪粪便中乳杆菌的筛选 | 第40-41页 |
| 3.3.4 可利用表乳糖的乳杆菌筛选 | 第41-42页 |
| 3.3.5 乳杆菌抑菌活性评价 | 第42页 |
| 3.4 结果与分析 | 第42-50页 |
| 3.4.1 仔猪粪便中微生物多样性测序结果 | 第42-44页 |
| 3.4.2 仔猪粪便中的乳酸菌筛选结果 | 第44-47页 |
| 3.4.3 可利用表乳糖的乳杆菌筛选结果 | 第47-49页 |
| 3.4.4 乳杆菌抑菌活性评价 | 第49-50页 |
| 3.5 本章小结 | 第50-51页 |
| 第四章 唾液乳杆菌利用表乳糖的代谢机制初探 | 第51-65页 |
| 4.1 引言 | 第51页 |
| 4.2 实验材料与设备 | 第51-53页 |
| 4.2.1 实验材料和试剂 | 第51-52页 |
| 4.2.2 实验仪器与设备 | 第52页 |
| 4.2.3 培养基及相关溶液的配制 | 第52-53页 |
| 4.3 实验方法 | 第53-58页 |
| 4.3.1 唾液乳杆菌利用表乳糖的转录组数据测定 | 第53页 |
| 4.3.2 转录组数据分析 | 第53页 |
| 4.3.3 表乳糖代谢有关的基因的功能验证 | 第53-57页 |
| 4.3.4 唾液乳杆菌利用表乳糖的代谢产物的测定 | 第57页 |
| 4.3.5 唾液乳杆菌细胞内外的β-半乳糖苷酶的测定 | 第57-58页 |
| 4.4 结果与分析 | 第58-64页 |
| 4.4.1 唾液乳杆菌利用表乳糖的转录组数据分析 | 第58-59页 |
| 4.4.2 ORF1874、ORF1875、ORF1794的功能验证结果 | 第59-61页 |
| 4.4.3 唾液乳杆菌利用表乳糖的代谢产物的鉴定结果 | 第61-63页 |
| 4.4.4 唾液乳杆菌细胞内β-半乳糖苷酶的检测结果 | 第63页 |
| 4.4.5 唾液乳杆菌的表乳糖代谢机制 | 第63-64页 |
| 4.5 本章小结 | 第64-65页 |
| 第五章 结论与建议 | 第65-66页 |
| 5.1 结论 | 第65页 |
| 5.2 创新点 | 第65页 |
| 5.3 建议 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简历 | 第73页 |
