| 中文摘要 | 第4-8页 |
| abstract | 第8-12页 |
| 缩略词注释表 | 第15-16页 |
| 第1章 综述 | 第16-27页 |
| 1.1 肝癌 | 第16-18页 |
| 1.1.1 肝癌的研究现状 | 第16页 |
| 1.1.2 肝癌的分子机制 | 第16-18页 |
| 1.2 细胞凋亡 | 第18-20页 |
| 1.3 肿瘤细胞的迁移与侵袭 | 第20-21页 |
| 1.4 Bcl-2蛋白家族 | 第21-25页 |
| 1.4.1 BH3-only蛋白 | 第22页 |
| 1.4.2 Noxa与Puma蛋白 | 第22-25页 |
| 1.5 人端粒酶与肝癌 | 第25-27页 |
| 第2章 材料和方法 | 第27-41页 |
| 2.1 器材与设备 | 第27页 |
| 2.2 实验材料 | 第27-30页 |
| 2.2.1 细胞系 | 第27页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第27-29页 |
| 2.2.3 Real-time PCR 引物（种属：人） | 第29-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-41页 |
| 2.3.1 pcTERT-Noxa、pcTRET-Puma重组质粒的构建 | 第30-31页 |
| 2.3.2 大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第31页 |
| 2.3.3 质粒转化 | 第31页 |
| 2.3.4 质粒提取 | 第31-32页 |
| 2.3.5 HepG2细胞培养 | 第32-33页 |
| 2.3.6 HepG2细胞转染 | 第33-34页 |
| 2.3.7 实验分组 | 第34页 |
| 2.3.8 CCK-8法分析转染后HepG2细胞增殖情况 | 第34页 |
| 2.3.9 Hoechst33258染色分析转染后HepG2细胞凋亡情况 | 第34-35页 |
| 2.3.10 Annexin V-FITC分析转染后HepG2细胞凋亡情况 | 第35页 |
| 2.3.11 克隆形成实验分析转染后HepG2细胞增殖情况 | 第35-36页 |
| 2.3.12 细胞划痕实验分析转染后HepG2细胞迁移情况 | 第36页 |
| 2.3.13 Transwell实验分析转染后HepG2细胞迁移与侵袭情况 | 第36-37页 |
| 2.3.14 细胞总蛋白提取 | 第37页 |
| 2.3.15 蛋白免疫印迹(western blot) | 第37-39页 |
| 2.3.16 RNA提取及逆转录 | 第39-40页 |
| 2.3.17 实时荧光定量PCR(Real-time PCR) | 第40-41页 |
| 第3章 实验结果 | 第41-58页 |
| 3.1 pcTERT-Noxa和pcTERT-Puma重组质粒的鉴定 | 第41页 |
| 3.2 光学显微镜下观察重组质粒转染后HepG2细胞形态变化 | 第41-42页 |
| 3.3 重组质粒转染HepG2细胞后Noxa、PumamRNA表达水平 | 第42-43页 |
| 3.4 CCK-8法检测重组质粒转染后HepG2细胞生存率 | 第43-44页 |
| 3.5 Hoechst33258染色观察重组质粒转染后HepG2细胞凋亡形态 | 第44-45页 |
| 3.6 Annexin V-FITC法检测重组质粒转染后HepG2细胞凋亡率 | 第45-46页 |
| 3.7 克隆形成实验分析重组质粒转染后HepG2细胞增殖能力 | 第46-48页 |
| 3.8 细胞划痕实验分析重组质粒转染后HepG2细胞迁移能力 | 第48-50页 |
| 3.9 Transwell实验分析重组质粒转染后HepG2细胞迁移与侵袭能力 | 第50-53页 |
| 3.10 Real-timePCR检测重组质粒转染HepG2细胞后凋亡与迁移侵袭相关基因mRNA表达水平 | 第53-55页 |
| 3.11 免疫印迹分析重组质粒转染HepG2细胞后凋亡相关蛋白表达水平 | 第55-57页 |
| 3.12 pcTERT-Noxa、pcTERT-Puma质粒差异性影响HepG2细胞和HL7702 细胞生存率 | 第57-58页 |
| 第4章 讨论 | 第58-61页 |
| 第5章 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
