| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 肿瘤治疗方法 | 第12-13页 |
| 1.1.1 传统方法 | 第12-13页 |
| 1.2 基因治疗 | 第13-18页 |
| 1.2.1 基因治疗的策略 | 第13-14页 |
| 1.2.2 治疗基因的选择 | 第14-16页 |
| 1.2.2.1 DNA | 第14-15页 |
| 1.2.2.2 RNA | 第15-16页 |
| 1.2.2.3 核酶 | 第16页 |
| 1.2.3 p53基因 | 第16-18页 |
| 1.3 基因递送载体 | 第18-20页 |
| 1.3.1 病毒类基因递送载体 | 第18页 |
| 1.3.2 非病毒类基因递送载体 | 第18-20页 |
| 1.4 酶促化学偶联聚合反应的研究 | 第20-22页 |
| 1.4.1 聚合方法的选择 | 第20-21页 |
| 1.4.2 酶促化学偶联聚合反应的优势 | 第21页 |
| 1.4.3 酶促聚合反应制备的聚合物的应用 | 第21-22页 |
| 1.5 本课题研究思路 | 第22-24页 |
| 第2章 Chol-g-PMSC-PPDL介导p53基因递送诱导HeLa细胞增殖与迁移抑制的研究 | 第24-56页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 实验材料 | 第24-27页 |
| 2.2.1 质粒与细胞株 | 第24页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第25页 |
| 2.2.4 主要溶液的配制 | 第25-27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-36页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第27-28页 |
| 2.3.2 p53和pEGFP-N3质粒的提取 | 第28页 |
| 2.3.3 Chol-g-PMSC-PPDL载体的制备及表征 | 第28-29页 |
| 2.3.4 Chol-g-PMSC-PPDL/p53基因纳米复合物的制备及表征 | 第29-30页 |
| 2.3.5 检测Chol-g-PMSC-PPDL载体对HeLa细胞的毒性 | 第30-31页 |
| 2.3.6 细胞增殖抑制实验 | 第31页 |
| 2.3.7 细胞凋亡实验 | 第31页 |
| 2.3.8 Live/Dead细胞染色实验 | 第31-32页 |
| 2.3.9 细胞周期阻滞实验 | 第32页 |
| 2.3.10 相关蛋白表达量检测 | 第32页 |
| 2.3.11 Caspase-3、-8和-9活性检测 | 第32-33页 |
| 2.3.12 qPCR检测p53mRNA表达水平 | 第33-35页 |
| 2.3.13 集落形成实验 | 第35页 |
| 2.3.14 细胞迁移实验 | 第35页 |
| 2.3.15 Transwell实验 | 第35-36页 |
| 2.3.16 细胞线粒体膜电位的检测 | 第36页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第36-54页 |
| 2.4.1 Chol-g-PMSC-PPDL载体的表征 | 第36-41页 |
| 2.4.2 Chol-g-PMSC-PPDL/p53纳米复合物的表征 | 第41-44页 |
| 2.4.3 纳米复合物介导p53的递送 | 第44-45页 |
| 2.4.4 纳米复合物抑制细胞增殖的研究 | 第45-48页 |
| 2.4.5 纳米复合物对HeLa细胞增殖抑制机制的研究 | 第48-52页 |
| 2.4.6 Chol-g-PMSC-PPDL/p53抑制肿瘤细胞的迁移和浸润 | 第52-54页 |
| 2.5 本章小结 | 第54-56页 |
| 第3章 Chol-g-PMSC-PPDL介导p53基因递送诱导PC-3细胞增殖与迁移抑制的研究 | 第56-75页 |
| 3.1 引言 | 第56页 |
| 3.2 实验材料 | 第56-57页 |
| 3.2.1 质粒与细胞株 | 第56页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第56页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第56-57页 |
| 3.2.4 主要溶液的配制 | 第57页 |
| 3.3 实验方法 | 第57-63页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第57-58页 |
| 3.3.2 p53质粒的提取 | 第58页 |
| 3.3.3 Chol-g-PMSC-PPDL载体的制备 | 第58页 |
| 3.3.4 Chol-g-PMSC-PPDL/p53纳米复合物的制备 | 第58页 |
| 3.3.5 检测Chol-g-PMSC-PPDL载体对PC-3细胞的毒性 | 第58-59页 |
| 3.3.6 细胞增殖抑制实验 | 第59页 |
| 3.3.7 细胞凋亡实验 | 第59页 |
| 3.3.8 Live/Dead细胞染色实验 | 第59-60页 |
| 3.3.9 细胞周期阻滞实验 | 第60页 |
| 3.3.10 相关蛋白表达量检测 | 第60页 |
| 3.3.11 Caspase-3、-8和-9活性检测 | 第60-61页 |
| 3.3.12 qPCR检测p53mRNA表达水平 | 第61-62页 |
| 3.3.13 集落形成实验 | 第62页 |
| 3.3.14 细胞迁移实验 | 第62-63页 |
| 3.3.15 Transwell实验 | 第63页 |
| 3.3.16 细胞线粒体膜电位的检测 | 第63页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第63-73页 |
| 3.4.1 纳米复合物介导p53的递送 | 第63-65页 |
| 3.4.2 纳米复合物抑制细胞增殖的研究 | 第65-68页 |
| 3.4.3 纳米复合物对PC-3细胞增殖抑制机制的研究 | 第68-71页 |
| 3.4.4 Chol-g-PMSC-PPDL/p53抑制肿瘤细胞的迁移和浸润 | 第71-73页 |
| 3.5 本章小结 | 第73-75页 |
| 全文总结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-80页 |
| 攻读硕士期间的研究成果及所获奖励 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
