中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写词表 | 第12-13页 |
第1章 绪论 | 第13-20页 |
1.1 幽门螺杆菌感染与相关疾病的流行病学研究现状 | 第13-14页 |
1.2 幽门螺杆菌基因多态性以及毒力基因的研究概括 | 第14-16页 |
1.3 幽门螺杆菌抗生素耐药与耐药机制的研究进展 | 第16-20页 |
第2章 随机扩增多态性DNA(RAPD)方法对幽门螺杆菌基因组多态性的研究 | 第20-32页 |
2.1 材料与方法 | 第20-26页 |
2.1.1 研究对象 | 第20页 |
2.1.2 试剂与仪器 | 第20-22页 |
2.1.2.1 主要试剂 | 第20-21页 |
2.1.2.2 主要仪器 | 第21-22页 |
2.1.3 主要培养基的制备 | 第22-23页 |
2.1.3.1 布氏肉汤转运培养基 | 第22页 |
2.1.3.2 Karmali培养基 | 第22页 |
2.1.3.3 50 ×TAE | 第22页 |
2.1.3.4 2%琼脂糖凝胶 | 第22-23页 |
2.1.4 胃黏膜组织的采集与培养 | 第23页 |
2.1.4.1 标本取材 | 第23页 |
2.1.4.2 分离培养 | 第23页 |
2.1.4.3 纯培养 | 第23页 |
2.1.5 H.pylori菌株生物学鉴定方法 | 第23-24页 |
2.1.5.1 革兰氏染色镜检 | 第23-24页 |
2.1.5.2 快速尿素酶实验 | 第24页 |
2.1.5.3 氧化酶实验 | 第24页 |
2.1.5.4 触酶实验 | 第24页 |
2.1.6 尿素酶A(ureA)基因和16SrRNA基因的检测鉴定 | 第24-25页 |
2.1.7 RAPD随机引物序列 | 第25页 |
2.1.8 RAPD随机引物的反应体系 | 第25页 |
2.1.9 RAPD随机引物的循环参数 | 第25页 |
2.1.10 凝胶电泳检测目的条带 | 第25-26页 |
2.1.11 统计学处理 | 第26页 |
2.2 结果 | 第26-30页 |
2.2.1 H.pylori生物学鉴定结果 | 第26页 |
2.2.2 H.pylori基因鉴定结果 | 第26-28页 |
2.2.2.1 尿素酶A(ureA)基因检测 | 第26-27页 |
2.2.2.2 PCR扩增16SrRNA基因检测 | 第27-28页 |
2.2.3 H.pylori病理诊断结果 | 第28页 |
2.2.4 RAPD随机引物的检测 | 第28-30页 |
2.2.4.1 RAPD稳定性及重复性实验 | 第28-29页 |
2.2.4.2 RAPD扩增随机引物的基因图谱 | 第29页 |
2.2.4.3 RAPD基因型与临床疾病的关系 | 第29-30页 |
2.3 讨论 | 第30-32页 |
第3章 幽门螺杆菌对常用抗生素耐药性的测定 | 第32-39页 |
3.1 材料和方法 | 第32-34页 |
3.1.1 主要实验用品及抗生素 | 第32页 |
3.1.2 测定H.pylori对七种抗生素的MIC | 第32-34页 |
3.1.2.1 抗生素溶液配制 | 第32页 |
3.1.2.2 含抗生素的哥伦比亚血琼脂培养基的配制 | 第32-33页 |
3.1.2.3 接种菌液的制备 | 第33页 |
3.1.2.4 接种H.pylori细菌 | 第33页 |
3.1.2.5 H.pylori对抗生素MIC结果的判定 | 第33-34页 |
3.2 结果 | 第34-37页 |
3.2.1 H.pylori对七种抗生素的耐药率 | 第34-35页 |
3.2.2 H.pylori对七种抗生素的药敏实验结果 | 第35-36页 |
3.2.3 多重耐药的H.pylori菌株 | 第36-37页 |
3.3 讨论 | 第37-39页 |
第4章 幽门螺杆菌抗生素的耐药性与毒力基因的相关性的研究 | 第39-48页 |
4.1 材料和方法 | 第39-41页 |
4.1.1 主要实验用品及抗生素 | 第39页 |
4.1.2 PCR扩增cagA、vacA、iceA基因及其亚型 | 第39-41页 |
4.1.2.1 各基因引物序列及扩增产物长度 | 第39-40页 |
4.1.2.2 cagA、vacA、iceA基因PCR反应体系 | 第40页 |
4.1.2.3 PCR反应的循环参数 | 第40页 |
4.1.2.4 PCR反应凝胶电泳检测 | 第40-41页 |
4.1.3 统计学分析 | 第41页 |
4.2 结果 | 第41-46页 |
4.2.1 H.pylori毒力基因cagA、vacA、iceA的检出结果 | 第41-42页 |
4.2.2 H.pylori耐药性与毒力基因的关系 | 第42-46页 |
4.2.2.1 cagA基因与抗生素耐药性之间的相关性 | 第42-43页 |
4.2.2.2 vacA基因s区各亚型与抗生素耐药性之间的关系 | 第43-44页 |
4.2.2.3 vacA基因m区各亚型与抗生素耐药性之间的关系 | 第44-45页 |
4.2.2.4 vacA基因i区各亚型与抗生素耐药性之间的关系 | 第45页 |
4.2.2.5 iceA基因各亚型与抗生素耐药性之间的关系 | 第45-46页 |
4.3 讨论 | 第46-48页 |
第5章 幽门螺杆菌对克拉霉素的耐药机制分析 | 第48-57页 |
5.1 材料与方法 | 第48-49页 |
5.1.1 琼脂稀释法 | 第48页 |
5.1.2 复苏克拉霉素耐药菌株 | 第48页 |
5.1.3 PCR扩增23SrRNA目的基因 | 第48-49页 |
5.1.3.1 扩增目的片段 | 第48页 |
5.1.3.2 PCR反应体系 | 第48-49页 |
5.1.3.3 PCR的循环参数 | 第49页 |
5.1.3.4 凝胶电泳检测目的条带 | 第49页 |
5.1.3.5 PCR扩增产物测序 | 第49页 |
5.1.4 测序序列分析 | 第49页 |
5.2 结果 | 第49-56页 |
5.2.1 PCR扩增23SrRNA目的基因的检测 | 第49-50页 |
5.2.2 突变位点测序图谱 | 第50-53页 |
5.2.3 突变位点用ClustalW比对分析 | 第53-55页 |
5.2.4 23 SrRNA突变位点分析 | 第55-56页 |
5.3 讨论 | 第56-57页 |
第6章 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
附录 | 第68-73页 |