摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 文献综述 | 第13-30页 |
1 鱼类抗性选择育种研究进展 | 第14-22页 |
1.1 抗寒选育 | 第14-16页 |
1.2 耐高温选育 | 第16-17页 |
1.3 耐低氧选育 | 第17页 |
1.4 耐盐碱选育 | 第17-18页 |
1.5 抗病育种 | 第18-22页 |
1.5.1 关于免疫和抗病机理研究 | 第18-19页 |
1.5.2 杂交抗病育种 | 第19页 |
1.5.3 基因和分子标记辅助育种 | 第19-20页 |
1.5.4 转抗病基因选育 | 第20-21页 |
1.5.5 抗性选择育种与抗病家系选育 | 第21-22页 |
2 草鱼抗性相关的主要生理生化指标研究进展 | 第22-25页 |
2.1 抗氧化防御系统研究进展 | 第22-23页 |
2.2 鱼类主要体液免疫因子研究进展 | 第23-25页 |
3 草鱼出血病相关基因XCR1、DF、PLG及FⅧ的研究进展 | 第25-29页 |
3.1 FⅧ(凝血因子Ⅷ)研究进展 | 第26-27页 |
3.2 PLG(纤溶酶原)研究进展 | 第27-28页 |
3.3 DF(补体D因子)研究进展 | 第28-29页 |
3.4 XCR1(趋化因子受体1)研究进展 | 第29页 |
4 本论文研究的目的和意义 | 第29-30页 |
第二章 不同群体的抗逆相关血液生化指标比较 | 第30-38页 |
1 材料与方法 | 第30-32页 |
1.1 材料 | 第30-31页 |
1.2 主要试剂 | 第31页 |
1.3 主要仪器 | 第31页 |
1.4 样品的采样及指标的测定 | 第31页 |
1.5 统计分析 | 第31-32页 |
2 结果与分析 | 第32-34页 |
2.1 不同草鱼群体及赤眼鳟抗逆相关血液生化指标 | 第32页 |
2.2 GCRV处理对草鱼免疫性能的作用 | 第32-33页 |
2.3 草鱼与赤眼鳟在抗逆相关血液生化指标上的差异 | 第33-34页 |
3 讨论 | 第34-37页 |
3.1 五组鱼抗氧化能力的分析 | 第34-35页 |
3.2 五组鱼免疫功能的分析 | 第35-37页 |
4 小结 | 第37-38页 |
第三章 免疫因子在不同群体的差异表达研究 | 第38-50页 |
1 材料和方法 | 第38-40页 |
1.1 材料 | 第38页 |
1.2 方法 | 第38-40页 |
1.2.1 取样 | 第38页 |
1.2.2 样品RNA提取及cDNA模板的合成 | 第38-39页 |
1.2.2.1 RNA提取 | 第38页 |
1.2.2.2 CDNA模板的合成 | 第38-39页 |
1.2.3 荧光定量PCR引物设计 | 第39页 |
1.2.4 待测样品荧光定量PCR | 第39-40页 |
1.2.5 计算基因的相对定量表达 | 第40页 |
2 结果分析 | 第40-47页 |
2.1 XCR1基因在5组鱼中的差异表达 | 第40-41页 |
2.2 CCR4基因在5组鱼中的差异表达 | 第41页 |
2.3 X基因在5组鱼中的差异表达 | 第41-42页 |
2.4 NGFR基因在5组鱼中的差异表达 | 第42页 |
2.5 TGF-β3基因在5组鱼中的差异表达 | 第42-43页 |
2.6 FⅡ基因在5组鱼中的差异表达 | 第43页 |
2.7 FⅦ基因在5组鱼中的差异表达 | 第43-44页 |
2.8 PLG基因在5组鱼中的差异表达 | 第44-45页 |
2.9 DF基因在5组鱼中的差异表达 | 第45页 |
2.10 C1Q基因在5组鱼中的差异表达 | 第45页 |
2.11 C2基因在5组鱼中的差异表达 | 第45-46页 |
2.12 C3基因在5组鱼中的差异表达 | 第46页 |
2.13 C5基因在5组鱼中的差异表达 | 第46-47页 |
3 讨论 | 第47-49页 |
4 小结 | 第49-50页 |
第四章 草鱼FⅧ、PLG、DF、XCR1基因的克隆与表达 | 第50-95页 |
1 材料和方法 | 第50-55页 |
1.1 材料 | 第50页 |
1.1.1 草鱼鱼种 | 第50页 |
1.1.2 草鱼出血病毒 | 第50页 |
1.2 方法 | 第50-55页 |
1.2.1 人工攻毒 | 第50页 |
1.2.2 取样 | 第50-51页 |
1.2.3 样品RNA提取 | 第51页 |
1.2.4 cDNA的合成 | 第51页 |
1.2.5 引物设计 | 第51-52页 |
1.2.6 草鱼FⅧ、PLG、DF及XCR1基因cDNA片段的扩增 | 第52-53页 |
1.2.7 PCR产物的回收与纯化 | 第53页 |
1.2.8 制备感受态细胞 | 第53页 |
1.2.9 目的片段连接和转化 | 第53-54页 |
1.2.10 序列分析 | 第54页 |
1.2.11 系统发育树的构建 | 第54页 |
1.2.12 荧光定量PCR及数据分析 | 第54-55页 |
2 结果分析 | 第55-90页 |
2.1 草鱼凝血因子FⅧ基因克隆和表达 | 第55-64页 |
2.1.1 FⅧ基因cDNA序列及分析 | 第55-57页 |
2.1.2 草鱼FⅧ基因氨基酸序列分析 | 第57-59页 |
2.1.3 FⅧ基因系统进化树构建 | 第59-60页 |
2.1.4 FⅧ基因的mRNA表达分析 | 第60-64页 |
2.2 草鱼凝血因子PLG基因克隆和表达 | 第64-73页 |
2.2.1 PLG基因cDNA序列及分析 | 第64-66页 |
2.2.2 草鱼PLG基因氨基酸序列分析 | 第66-68页 |
2.2.3 PLG基因系统进化树构建 | 第68-69页 |
2.2.4 PLG基因的mRNA表达分析 | 第69-73页 |
2.3 草鱼补体因子D(DF)基因克隆和表达 | 第73-81页 |
2.3.1 DF基因cDNA序列及分析 | 第73-74页 |
2.3.2 草鱼DF基因氨基酸序列分析 | 第74-76页 |
2.3.2.1 草鱼DF基因氨基酸理化性质分析 | 第74-75页 |
2.3.2.2 DF氨基酸序列同源性分析 | 第75-76页 |
2.3.3 DF基因系统进化树构建 | 第76-77页 |
2.3.4 DF基因的mRNA表达分析 | 第77-81页 |
2.4 草鱼XCR1基因克隆和表达 | 第81-90页 |
2.4.1 草鱼XCR1基因cDNA序列及分析 | 第81-82页 |
2.4.2 草鱼XCR1基因氨基酸序列分析 | 第82-84页 |
2.4.3 XCR1基因系统进化树构建 | 第84-85页 |
2.4.4 XCR1基因的mRNA表达分析 | 第85-90页 |
3 讨论 | 第90-93页 |
3.1 FⅧ基因的克隆与表达 | 第90-91页 |
3.2 PLG基因的克隆与表达 | 第91-92页 |
3.3 DF基因的克隆与表达 | 第92页 |
3.4 XCR1基因的克隆与表达 | 第92-93页 |
4 小结 | 第93-95页 |
第五章 结论、创新点及研究展望 | 第95-97页 |
1 结论 | 第95-96页 |
1.1 抗性选育抗病草鱼 | 第95页 |
1.2 与草鱼出血病紧密相关的FⅧ、PLG、DF、XCR1的克隆与表达分析 | 第95-96页 |
2 创新点 | 第96页 |
3 下一步研究展望 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-112页 |
致谢 | 第112-113页 |
作者简介 | 第113-115页 |
附录 | 第115-118页 |