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使用转录激活子样因子核酸酶对(TALENs)山羊iPS细胞中PRNP基因的靶向敲除

Abstract第7页
Abbreviation第10-11页
1. Research Background第11-18页
    1.1 Introduction of prion disease第11-12页
    1.2 Gene targeting tools第12-18页
2. Objective第18-20页
3. Methods and Materials第20-29页
    3.1 Materials第20-22页
        3.1.1 Reagents第20-21页
        3.1.2 Cell Line第21页
        3.1.3 TALEN plasmid第21页
        3.1.4 Main experimental instruments and equipments第21-22页
    3.2 Experimental Methods第22-29页
        3.2.1 Allocation of chemicals needed for cell culture第22页
        3.2.2 Cell Culture第22页
        3.2.3 Cryopreservation of goat iPS cell第22-23页
        3.2.4 Thawing of goat iPSCs cryopreserved第23-24页
        3.2.5 Transfection of TALEN plasmid第24-26页
        3.2.6 TALEN Efficiency Detection第26-27页
        3.2.7 Identification of PRNP knockout cell lines第27页
        3.2.8 Immunofluorescence and Alkaline Phosphatase Assay第27页
        3.2.9 In Vitro Differentiation of goat iPSCs第27-28页
        3.2.10 In Vitro Differentiation of goat iPSCs第28-29页
4. Results第29-36页
    4.1 TALENs activities for targeting to endogenous PRNP gene in goat第29-31页
    4.2 Disruption of PRNP in goat iPSCs using TALENs第31-33页
    4.3 Characterization of PRNP~(+/-) goat iPSCs第33-36页
5. Discussion第36-40页
6. Conclusion第40-41页
References第41-52页
Acknowledgements第52-53页
Publications第53页

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