| 目录 | 第4-6页 |
| 英文縮略词及中英文对照索引 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-12页 |
| Abstract | 第12-17页 |
| 第一部分Wiit5a蛋白在膀耽移行细胞癌中的表达及意义 | 第19-33页 |
| 1 前言 | 第19-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 标本来源 | 第20页 |
| 2.1.2 临床简要病理资料 | 第20页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-24页 |
| 2.2.1 免疫组织化学 | 第21-22页 |
| 2.2.2 阳性结果判定 | 第22页 |
| 2.2.3 RNA的提取及逆转录 | 第22-23页 |
| 2.2.4 Real-time PCR | 第23-24页 |
| 2.3 统计学分析 | 第24页 |
| 3 结果 | 第24-26页 |
| 3.1 Wnt5a在各组膀胱癌组织及其癌旁组织中的表达改变及临床相关性 | 第24-26页 |
| 3.1.1 Wnt5a蛋白在正常膀胱黏膜组织、膀胱乳头状瘤及膀胱尿路上皮癌中的表达 | 第24-25页 |
| 3.1.2 Wnt5a蛋白的表达与膀胱尿路上皮癌生物学行为的关系 | 第25-26页 |
| 3.1.3 Real-time PCR检测Wnt5a在各组织中的表达改变 | 第26页 |
| 4 讨论 | 第26-28页 |
| 5 结论 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-33页 |
| 第二部分 Wnt5a对人膀胱细胞癌细胞体外增殖、迁移及侵袭能力的影响 | 第33-53页 |
| 1 前言 | 第33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第33-35页 |
| 2.1.1 细胞株来源 | 第33页 |
| 2.1.2 主要仪器和设备 | 第33-34页 |
| 2.1.3 主要试剂及耗材 | 第34-35页 |
| 2.2 稳定Wnt5a过表达及敲低的膀胱癌细胞株的构建 | 第35-37页 |
| 2.2.1 接种细胞 | 第35页 |
| 2.2.2 转染 | 第35页 |
| 2.2.3 WntSa逆转录病毒的感染 | 第35-37页 |
| 2.3 Western blot | 第37-38页 |
| 2.3.1 蛋白收集及蛋白定量 | 第37页 |
| 2.3.2 凝胶电泳及转膜 | 第37-38页 |
| 2.3.3 —抗、二抗鮮育迎影 | 第38页 |
| 2.4 MTT法检测各组细胞生长率 | 第38-39页 |
| 2.5 Transwell小室迁移实验 | 第39页 |
| 2.6 划痕实验 | 第39-40页 |
| 3 结果 | 第40-45页 |
| 3.1 Western Blot检测Wnt5a在BIU-87和J82细胞中的表达 | 第40页 |
| 3.2 Wnt5a稳定敲低和过表达膀胱癌细胞株的建立 | 第40-41页 |
| 3.3 Wnt5a敲低对J82细胞株增殖的影响 | 第41-42页 |
| 3.4 Wnt5a敲低对J82细胞株运动迁移能力的影响 | 第42页 |
| 3.5 Wnt5a敲低对J82细胞侵袭能力的影响 | 第42-43页 |
| 3.6 Wnt5a过表达对BIU-87细胞株增殖的影响 | 第43-44页 |
| 3.7 Wnt5a过表达对BIU-87细胞株迁移能力的影响 | 第44页 |
| 3.8 Wnt5a过表达对BIU-87细胞侵袭能力的影响 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 第三部分 Wnt5a对膀胱癌细胞体外转移机制的初步探讨 | 第53-65页 |
| 1 前言 | 第53页 |
| 2 材料与方法 | 第53-54页 |
| 2.1 材料 | 第53-54页 |
| 2.2 实验设备见前两部分 | 第54页 |
| 2.3 试剂配制见前两部分 | 第54页 |
| 2.4 实验方法 | 第54页 |
| 2.4.1 免疫印迹 | 第54页 |
| 2.4.2 real time-PCR | 第54页 |
| 3 结果 | 第54-57页 |
| 3.1 Wnt5a敲低对高转移膀胱癌细胞J82中EMT标志分子的影响 | 第54-55页 |
| 3.2 Wnt5a高表达对浅表型膀胱癌细胞中EMT分子的影响 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 综述一 | 第65-87页 |
| Acknowledgments | 第82-83页 |
| References | 第83-87页 |
| 综述二 | 第87-98页 |
| References | 第95-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第100页 |
