摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第9-13页 |
1 研究背景 | 第13-14页 |
2 总体思路 | 第14-16页 |
第一章 RACK1 mRNA及蛋白的表达检测 | 第16-35页 |
研究对象 | 第16-17页 |
1 标本来源 | 第16-17页 |
2 细胞株 | 第17页 |
试验仪器,耗材与试剂 | 第17-19页 |
1 主要试验仪器及耗材 | 第17-18页 |
2 主要实验试剂 | 第18-19页 |
试验方法 | 第19-27页 |
1 HE染色确定病理性质及病理分级 | 第19页 |
2 胶质瘤细胞株的培养及处理 | 第19-20页 |
3 实时定量荧光PCR(Real-Time PCR)检测组织标本及细胞株中RACK1mRNA | 第20-24页 |
4 Western Blot(蛋白质免疫印迹)检测RACK1蛋白 | 第24-27页 |
结果 | 第27-32页 |
讨论 | 第32-35页 |
第二章 RACK1 siRNA瞬时干扰U87-MG及CHG-5细胞系后对其生物学行为的影响 | 第35-55页 |
前言 | 第35-36页 |
实验对象 | 第36页 |
试验仪器,耗材与试剂 | 第36-37页 |
1 试验仪器和耗材 | 第36页 |
2 主要试剂 | 第36-37页 |
试验方法 | 第37-40页 |
1 siRNA靶向干扰RACK1的表达 | 第37-38页 |
2 Real-Time PCR检测siRNA干扰后U87-MG和CHG-5细胞株RACK1mRNA的表达 | 第38页 |
3 Western-Blot检测干扰siRNA后U87-MG和CHG-5细胞株RACK1蛋白的表达 | 第38页 |
4 MTT检测细胞的增殖 | 第38-39页 |
5 Transwell法检测细胞的侵袭能力 | 第39页 |
6 凋亡检测 | 第39-40页 |
实验结果 | 第40-51页 |
讨论 | 第51-55页 |
第三章 体内试验重组慢病毒载体稳定转染U87-MG细胞株干扰RACK1基因及裸鼠成瘤模型的建立 | 第55-69页 |
前言 | 第55-56页 |
材料和方法 | 第56-58页 |
1 主要试验仪器 | 第56页 |
2 主要实验试剂 | 第56-57页 |
3 实验对象 | 第57-58页 |
试验方法 | 第58-63页 |
1 酶切pLV克隆载体 | 第58-59页 |
2 连接和转化 | 第59页 |
3 阳性克隆的鉴定 | 第59-60页 |
4 用质粒大量抽提试剂盒制备不含内毒素用于转染的质粒DNA | 第60页 |
5 病毒收集及浓缩 | 第60-61页 |
6 转染U87-MG | 第61-62页 |
7 裸鼠成瘤实验 | 第62-63页 |
结果 | 第63-66页 |
讨论 | 第66-69页 |
第四章 RACK1正向调控胶质瘤细胞的分子机制的初步研究及临床应用分析 | 第69-83页 |
前言 | 第69-70页 |
材料和方法 | 第70页 |
实验方法 | 第70-72页 |
1 细胞处理 | 第70页 |
2 检测方法 | 第70-71页 |
3 统计学分析处理 | 第71-72页 |
结果 | 第72-81页 |
讨论 | 第81-83页 |
结论 | 第83-84页 |
创新性及意义 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-91页 |
综述 | 第91-110页 |
参考文献 | 第102-110页 |
博士期间发表论文 | 第110-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
个人简历 | 第112页 |