中文摘要 | 第5-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
目录 | 第12-14页 |
縮略词表 | 第14-16页 |
前言 | 第16-18页 |
第一部分 年青组与衰老组HSF中miR-217的表达 | 第18-25页 |
前言 | 第18页 |
材料和方法 | 第18-22页 |
1 研究对象 | 第18页 |
2 仪器设备和主要试剂 | 第18-20页 |
3 实验方法 | 第20-22页 |
结果 | 第22-24页 |
1 总 RNA 的鉴定 | 第22-23页 |
2 实时定量PCR标准曲线和溶解曲线 | 第23页 |
3 自然衰老组与传代衰老组HSF中miR-217表达水平的比较 | 第23-24页 |
讨论 | 第24页 |
结论 | 第24-25页 |
第二部分 miR-217对人皮肤成纤维细胞衰老的作用 | 第25-37页 |
前言 | 第25页 |
材料和方法 | 第25-33页 |
1 研究对象 | 第25页 |
2 仪器设备和主要试剂 | 第25-29页 |
3 实验方法 | 第29-33页 |
结果 | 第33-35页 |
1 比较空白病毒载体与hsa-miR-217慢病毒载体转染年青组HSF细胞 | 第33页 |
2 比较空白病毒载体与hsa-miR-217慢病毒载体转染年青组HSF细胞 | 第33-34页 |
3 比较空白病毒载体与hsa-miR-217慢病毒载体转染年青组HSF细胞后细胞增殖能力情况 | 第34-35页 |
4 比较空白病毒载体与hsa-miR-217慢病毒载体转染年青组HSF细胞后衰老蛋白P53、P21、sirt1蛋白表达水平 | 第35页 |
讨论 | 第35-36页 |
结论 | 第36-37页 |
第三部分 miR-217直接调控HSF中DNMT1的表达及机制 | 第37-49页 |
前言 | 第37页 |
材料与方法 | 第37-41页 |
1 研究对象 | 第37页 |
2 主要仪器设备与试剂 | 第37-40页 |
3 实验方法 | 第40-41页 |
结果 | 第41-45页 |
1 MICRORNA.ORG网站预测到DNMT1 3'UTR区域存在miR-217的结合位点 | 第41页 |
2 双荧光素酶报告基因系统证实miR-217与DNMT1 3'UTR区域结合 | 第41-42页 |
3 年青组HSF中过表达miR-217后,DNMT1的表达量变化 | 第42-43页 |
4 DNMT1在传代衰老模型中的表达水平 | 第43页 |
5 年青组HSF抑制DNMT1表达量后,HSF的衰老指标变化 | 第43-44页 |
6 老年组HSF中转染hsa-miR-217 shRNA慢病毒后,再转染DNMT1-shRNA慢病毒载体后,HSF的衰老表型变化 | 第44-45页 |
讨论 | 第45-47页 |
结论 | 第47-49页 |
第四部分 总结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
综述 | 第54-67页 |
参考文献 | 第60-67页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第67-68页 |
所获奖励 | 第67页 |
参与的主要课题 | 第67页 |
论文 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |