| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| Catalogue | 第10-12页 |
| Abbreviation | 第12-14页 |
| Introduction | 第14-38页 |
| 1. Materials and methods | 第38-53页 |
| 1.1 Immunochemistry analysis | 第38-46页 |
| 1.1.1 Reagent and materials | 第38页 |
| 1.1.2 Antigens | 第38-39页 |
| 1.1.3 Animal Immunizations | 第39页 |
| 1.1.3.1 Rabbits | 第39页 |
| 1.1.3.2 Mice | 第39页 |
| 1.1.4 Production of hybridomas and monoclonal antibody | 第39-42页 |
| 1.1.4.1 Spleen collection from immunized mice | 第40页 |
| 1.1.4.2 Preparation of the cells | 第40-41页 |
| 1.1.4.3 Cell fusion | 第41-42页 |
| 1.1.4.4 Screening and expansion of positive clones | 第42页 |
| 1.1.4.5 Subcloning by limiting dilution | 第42页 |
| 1.1.5 Antibody purification | 第42页 |
| 1.1.6 Western blot analysis | 第42-43页 |
| 1.1.7 Serum bGH measurement | 第43-44页 |
| 1.1.8 Serum IGF-1 measurement | 第44页 |
| 1.1.9 Milk IGF-1 measurement | 第44-46页 |
| 1.1.9.1 Pre-treatment of the samples | 第44-45页 |
| 1.1.9.2 Preparation of the standards | 第45页 |
| 1.1.9.3 Sandwich ELISA | 第45页 |
| 1.1.9.4 Assay performances | 第45-46页 |
| 1.1.9.5 Comparison with acid-ethanol extraction in colostrum | 第46页 |
| 1.2 Experimental design for rbGH treatment of buffalos | 第46-53页 |
| 1.2.1 Gene expression analysis | 第47-53页 |
| 1.2.1.1 RNA extraction | 第47页 |
| 1.2.1.2 Primer design | 第47-48页 |
| 1.2.1.3 Choice of the reference genes | 第48-50页 |
| 1.2.1.4 Real-Time PCR | 第50页 |
| 1.2.1.5 Microarray | 第50-52页 |
| 1.2.1.6 Statistical analysis | 第52-53页 |
| 2. Results and Discussion | 第53-82页 |
| 2.1 Immunoenzymatic method to measure GH and IGF-1 | 第53-71页 |
| 2.1.1 Production of rabbit and mouse polyclonal antibodies anti-bGH | 第53-54页 |
| 2.1.2 Hybridoma production for serum GH quantification | 第54-56页 |
| 2.1.3 Double sandwich ELISA system for serum GH | 第56-57页 |
| 2.1.4 Assessment of the characteristic of anti-IGF-1 antibody | 第57-58页 |
| 2.1.5 The sample processing and sandwich ELISA for the measurement of IGF-1 | 第58-61页 |
| 2.1.6 Test performances | 第61-63页 |
| 2.1.7 Hormones variation after treatment | 第63-71页 |
| 2.1.7.1 Milk yield | 第63-64页 |
| 2.1.7.2 Serum GH variation after treatment | 第64-67页 |
| 2.1.7.3 Serum IGF-1 variation after treatment | 第67-69页 |
| 2.1.7.4 Milk IGF-1 variation after treatment | 第69-71页 |
| 2.2 Searching of biomarkers by gene expression analysis in the white blood cells | 第71-82页 |
| 2.2.1 Microarray of bovine genome | 第72页 |
| 2.2.2 Gene expression analysis by Real-Time PCR | 第72-82页 |
| 2.2.2.1 Choice of the reference genes | 第73-74页 |
| 2.2.2.2 Effect of GH treatment on gene expression | 第74-82页 |
| 5. Conclusion | 第82-84页 |
| Reference | 第84-98页 |
| Appendix | 第98-104页 |
| Acknowledgements | 第104页 |
| Published papers during the period of PhD course | 第104页 |
