| 缩略词 | 第8-10页 |
| 摘要 | 第10-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 第一章 前言 | 第16-24页 |
| 1 研究背景 | 第16-21页 |
| 1.1 内源乙烯对植物的生理作用 | 第17页 |
| 1.2 乙烯合成途径关键酶基因ACS基因和ACO基因的研究现状 | 第17-20页 |
| 1.3 水仙的研究现状 | 第20-21页 |
| 2 本研究的意义、内容和技术路线 | 第21-24页 |
| 2.1 研究意义 | 第21-22页 |
| 2.2 研究内容 | 第22页 |
| 2.3 研究技术路线 | 第22-24页 |
| 第二章 水仙NtACS1基因的克隆分析及遗传转化 | 第24-42页 |
| 1 材料 | 第24-25页 |
| 1.1 植物材料 | 第24页 |
| 1.2 菌种及试剂 | 第24-25页 |
| 2 方法 | 第25-31页 |
| 2.1 水仙花瓣总RNA提取及cDNA的合成 | 第25页 |
| 2.2 PCR引物的设计与合成 | 第25-26页 |
| 2.3 '云香'水仙ACS基因cDNA克隆 | 第26-27页 |
| 2.4 生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 2.5 '云香'水仙ACS基因的表达分析 | 第28-29页 |
| 2.6 NtACS1基因过表达载体的构建 | 第29页 |
| 2.7 叶盘法转化烟草及抗性植株的筛选 | 第29-30页 |
| 2.8 转基因植株的分子检测 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-41页 |
| 3.1 '云香'水仙ACS基因的克隆与序列分析 | 第31-32页 |
| 3.2 NtACS1蛋白的结构分析 | 第32-33页 |
| 3.3 NtACS1蛋白的基本特性分析 | 第33-34页 |
| 3.4 NtACS1蛋白的系统发育分析 | 第34-35页 |
| 3.5 NtACS1基因在'云香'水仙花瓣和副冠不同时期的表达 | 第35-36页 |
| 3.6 NtACS1基因的正义表达载体构建 | 第36-39页 |
| 3.7 NtACS1基因转化烟草抗性植株的鉴定 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 水仙NtACO1基因的克隆分析及遗传转化 | 第42-56页 |
| 1 材料 | 第42页 |
| 1.1 植物材料 | 第42页 |
| 1.2 菌种及试剂 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-45页 |
| 2.1 水仙花瓣总RNA提取及cDNA的合成 | 第42页 |
| 2.2 PCR引物的设计与合成 | 第42-43页 |
| 2.3 '云香'水仙NtACO1基因cDNA克隆 | 第43页 |
| 2.4 生物信息学分析 | 第43页 |
| 2.5 NtACO1基因的表达分析 | 第43-44页 |
| 2.6 NtACO1的正、反义表达载体的构建 | 第44页 |
| 2.7 NtACO1基因转化烟草及抗性植株的鉴定 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-54页 |
| 3.1 '云香'水仙NtACO1基因的克隆与序列分析 | 第45页 |
| 3.2 NtACO1蛋白的结构分析 | 第45-46页 |
| 3.3 NtACO1蛋白的基本特性分析 | 第46-47页 |
| 3.4 NtACO1蛋白的系统发育分析 | 第47-48页 |
| 3.5 NtACO1基因的多重序列比对分析 | 第48-49页 |
| 3.6 NtACO1基因在'云香'水仙中的特异性表达 | 第49-50页 |
| 3.7 NtACO1的正、反义表达载体构建 | 第50-51页 |
| 3.8 NtACO1基因转化烟草及抗性植株的鉴定 | 第51-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 第四章 NtACOY2基因的克隆分析及遗传转化 | 第56-73页 |
| 1 材料 | 第56页 |
| 1.1 植物材料 | 第56页 |
| 1.2 菌种及试剂 | 第56页 |
| 2 方法 | 第56-58页 |
| 2.1 NtACOY2基因的克隆 | 第56-57页 |
| 2.2 生物信息学分析 | 第57页 |
| 2.3 表达模式分析 | 第57页 |
| 2.4 植物表达载体构建 | 第57-58页 |
| 2.5 农杆菌介导法转化烟草及转基因植株的初步鉴定 | 第58页 |
| 2.6 转基因植株的表型观察 | 第58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-71页 |
| 3.1 '云香'水仙NtACOY2基因的克隆和序列分析 | 第58-59页 |
| 3.2 NtACOY2蛋白的结构分析 | 第59-60页 |
| 3.3 NtACOY2蛋白的基本特性分析 | 第60-61页 |
| 3.4 NtACOY2蛋白的系统发育分析 | 第61-62页 |
| 3.5 NtACOY2基因与NtACO1基因的序列比对分析 | 第62-63页 |
| 3.6 NtACOY2基因表达模式分析 | 第63-65页 |
| 3.7 转基因植株的获得与检验 | 第65-71页 |
| 4 讨论 | 第71-73页 |
| 第五章 结论与展望 | 第73-75页 |
| 1 结论 | 第73页 |
| 2 展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-86页 |
| 附录A '云香'水仙NtACS1、NtACO1、NtACOY2基因的ORF序列 | 第86-88页 |
| 附录B 培养基配方 | 第88-89页 |
| 附录C '云香'水仙NtACS1、NtACO1、NtACOY2蛋白的生物信息学预测结果 | 第89-93页 |
| 攻读学位期间的学术论文与研究结果 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
