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广西牛星状病毒分子流行病学调查与全基因克隆及序列分析

ABSTRACT第4-5页
摘要第6-11页
Abbreviations第11-13页
Chapter Ⅰ. LITERATURE AND REVIEW第13-30页
    1.1 History of astrovirus第13-15页
    1.2 Mamastrovirus第15-17页
        1.2.1 Human astrovirus第15-16页
        1.2.2 Animal astrovirus第16-17页
    1.3 Avastrovirus第17-18页
    1.4 Astrovirus genome第18-21页
        1.4.1 Non structural proteins(nsp1a,nsp1ab)第20-21页
        1.4.2 Structural proteins(Capsid protein)第21页
    1.5 Astrovirus pathogenesis第21-24页
        1.5.1 Astrovirus pathogenesis in humans第22页
        1.5.2 Astrovirus pathogenesis in animals第22-24页
    1.6 Astrovirus hazard in the food-chain第24页
    1.7 Astrovirus antigenicity第24-25页
    1.8 Astrovirus diagnostic第25页
        1.8.1 Electron microscopy and virus isolation第25页
        1.8.2 Serological essay第25页
        1.8.3 Biotechnology第25页
    1.9 Astrovirus immunization and control第25-26页
    1.10 Bovine astrovirus(BAstV)第26-28页
    1.11 Brief history of water buffalo第28-29页
    1.12 Aims and importance of the research第29-30页
        1.12.1 Importance第29页
        1.12.2 Aims第29-30页
Chapter Ⅱ.MOLECULAR EPIDEMIOLOGY OF BOVINE ASTROVIRUS IN CATTLEAND WATER BUFFALO IN GUANGXI第30-53页
    2.0 Experimental design and technical route第30-31页
    2.1 Materials第31-34页
        2.1.1 Samples第31页
        2.1.2 Samples preparation第31页
        2.1.3 Principal Reagents第31-32页
        2.1.4 Reagents and culture media preparation第32-33页
        2.1.5 Principal Instruments and Equipments第33-34页
    2.2 Methods第34-41页
        2.2.1 Primers design第34-35页
        2.2.2 Total RNA extraction第35-36页
        2.2.3 1st strand cDNA synthesis (RT)第36页
        2.2.4 PCR detection for Astrovirus and gene amplification第36-38页
        2.2.5 Agarose Gel Electrophoresis (AGE)第38页
        2.2.6 Gene cloning第38-40页
        2.2.7 Gene sequencing第40页
        2.2.8 Results analysis and computation第40-41页
    2.3 Results analysis第41-49页
        2.3.1 RT-PCR detection results第41-42页
        2.3.2 Partial ORF2 amplification results第42-43页
        2.3.3 Trial study on co-infection of Astrovirus and other known viral enteropathogens第43-46页
        2.3.4 Phylogenetic analysis based on partial ORF2 of the Guangxi BAstVs第46-49页
    2.4 Discussion第49-53页
Chapter Ⅲ. COMPLETE GENOME CLONING AND SEQUENCE ANALYSIS OF THEGUANGXI BOVINE ASTROVIRUSES (BAstV-GX/CHN/2014)第53-82页
    3.0 Experimental design and technical route第53页
    3.1 Introduction第53-54页
    3.2 Materials第54页
        3.2.1 Samples第54页
        3.2.2 Principal Reagents, instruments and equipments第54页
    3.3 Methods第54-59页
        3.3.1 Primers design第54-55页
        3.3.2 Total RNA extraction第55页
        3.3.3 1~(st) strand cDNA bank synthesis第55页
        3.3.4 3'-end amplification 1~(st) strand cDNA bank synthesis第55-56页
        3.3.5 5'-end amplification 1~(st) strand cDNA bank synthesis第56-57页
        3.3.6 The complete genome PCR amplification第57-59页
        3.3.7 Gene cloning and sequencing第59页
        3.3.8 Computation and analysis第59页
    3.4 Results analysis第59-78页
        3.4.1 ORF1a analysis第60-65页
        3.4.2 ORF1b analysis第65-66页
        3.4.3 ORF2 analysis第66-75页
        3.4.4 Analysis of the ORF1b/ORF2 junction and the overlap region第75-76页
        3.4.5 Complete genome sequences analysis第76-78页
    3.5 Discussion第78-82页
Chapter Ⅳ. GENERAL CONCLUSION第82-85页
REFERENCES第85-96页
ANNEXES第96-102页
ACKOWLEDMENTS第102页

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