摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-7页 |
引言 | 第7-9页 |
第1章 人髓核细胞的分离和培养 | 第9-15页 |
·材料 | 第9-10页 |
·标本 | 第9页 |
·主要实验设备 | 第9页 |
·培养所用器皿的处理 | 第9-10页 |
·玻璃器皿的处理 | 第9-10页 |
·胶塞的处理 | 第10页 |
·实验试剂及配置 | 第10页 |
·胎牛血清 | 第10页 |
·青霉素、链霉素 | 第10页 |
·DMEM/F12培养液 | 第10页 |
·胰蛋白酶 | 第10页 |
·Type-Ⅱ胶原酶 | 第10页 |
·实验方法 | 第10-12页 |
·人髓核细胞的获得、分离与培养 | 第10-11页 |
·髓核细胞计数 | 第11页 |
·细胞传代 | 第11-12页 |
·细胞爬片的制备 | 第12页 |
·细胞的形态学观察 | 第12-15页 |
第2章 人髓核细胞模型的建立和相关指标的检测方法 | 第15-23页 |
·材料 | 第15-16页 |
·主要实验仪器 | 第15页 |
·实验试剂 | 第15-16页 |
·实验方法 | 第16-22页 |
·细胞刺激模型及阻断模型的建立 | 第16-17页 |
·Annexin Ⅴ/PI染色流式细胞仪检测人髓核细胞凋亡 | 第17-18页 |
·基本原理 | 第17页 |
·实验步骤 | 第17-18页 |
·TUNEL法检测髓核细胞凋亡 | 第18-19页 |
·基本原理 | 第18页 |
·实验步骤 | 第18-19页 |
·免疫荧光检测P-P38MAPK和P-JNK/SAPK在细胞内的定位及表达 | 第19页 |
·Western印迹检测P-P38MAPK及P-JNK/SAPK的表达 | 第19-22页 |
·人髓核细胞的收获和电泳样品的制备 | 第20页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第20-21页 |
·转膜 | 第21页 |
·封闭、杂交和显影曝光 | 第21-22页 |
·统计学分析 | 第22-23页 |
第3章 实验结果 | 第23-31页 |
·Annexin Ⅴ/PI染色流式细胞仪检测人髓核细胞凋亡结果 | 第23-24页 |
·TUNEL法检测髓核细胞凋亡 | 第24-26页 |
·免疫荧光检测P-P38MAPK和P-JNK/SAPK在细胞内的定位及表达 | 第26-29页 |
·Western印迹法检测P-P38MAPK及P-JNK/SAPK的表达 | 第29-31页 |
第4章 讨论 | 第31-36页 |
结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-41页 |
文献综述 | 第41-54页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第54-55页 |
附录 | 第55-62页 |
致谢 | 第62-63页 |