| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-12页 |
| 第1章 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 HIV-1 与限制因子 A3G 研究概述 | 第12-22页 |
| 1.1.1 HIV-1 简介 | 第12页 |
| 1.1.2 限制因子及病毒辅助蛋白 | 第12-14页 |
| 1.1.3 辅助蛋白 Vif 的功能研究 | 第14-15页 |
| 1.1.4 抗病毒因子 A3G 的研究 | 第15-16页 |
| 1.1.5 Vif 降解 A3G 的机制研究 | 第16-17页 |
| 1.1.6 RING E3 连接酶的研究 | 第17-20页 |
| 1.1.7 Cullin-RING 连接酶（CRLs）的研究 | 第20-22页 |
| 1.2 本课题的研究目的与实验设计 | 第22-24页 |
| 1.2.1 研究目的 | 第22-23页 |
| 1.2.2 实验设计 | 第23-24页 |
| 第2章 材料与方法 | 第24-36页 |
| 2.1 材料、试剂及仪器 | 第24-29页 |
| 2.1.1 质粒、菌种、细胞、抗体 | 第24-26页 |
| 2.1.2 主要试剂配制 | 第26-28页 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-36页 |
| 2.2.1 真核体系质粒构建 | 第29-30页 |
| 2.2.2 原核体系质粒构建 | 第30-32页 |
| 2.2.3 蛋白表达 | 第32页 |
| 2.2.4 Ni 柱亲和纯化 | 第32页 |
| 2.2.5 细胞培养及转染 | 第32-33页 |
| 2.2.6 RNA 干扰方法-siRNA | 第33页 |
| 2.2.7 稳定转染 shRBX2 细胞系的建立 | 第33-34页 |
| 2.2.8 Western Blot 检测方法 | 第34页 |
| 2.2.9 免疫共沉淀分析技术 | 第34-35页 |
| 2.2.10 Nedd8 结合分析 | 第35页 |
| 2.2.11 体外泛素化检测 | 第35-36页 |
| 第3章 结果与分析 | 第36-66页 |
| 3.1 CRL 的骨架蛋白 Cul5 与 RBX 蛋白的相互作用 | 第36-43页 |
| 3.1.1 质粒 VR1012-Cul5、VR1012-RBX1、VR1012-RBX2 构建表达 | 第36-38页 |
| 3.1.2 Cullin5 与 RBX 蛋白的相互作用分析 | 第38-43页 |
| 3.2 不同 RBX 组成的 E3 复合物对 A3G 降解机制的影响 | 第43-52页 |
| 3.2.1 细胞体系内对降解机制的影响 | 第43-50页 |
| 3.2.2 病毒体系内对降解机制的影响 | 第50-52页 |
| 3.3 含有不同 RBX 的 E3 复合体泛素化 A3G 的讨论 | 第52-66页 |
| 3.3.1 质粒构建 | 第52-57页 |
| 3.3.2 含有不同 RBX 的 E3 复合物的蛋白表达与纯化 | 第57-62页 |
| 3.3.3 不同 E3 复合物对 Cul5 Nedd8 结合的分析 | 第62-64页 |
| 3.3.4 不同 E3 复合物对 A3G 泛素化比较 | 第64-66页 |
| 讨论 | 第66-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |
