中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 前言 | 第13-31页 |
1.1 肥胖 | 第13-14页 |
1.1.1 肥胖对人类和社会的危害 | 第13页 |
1.1.2 肥胖的发生机制 | 第13-14页 |
1.2 脂肪组织的类型 | 第14-16页 |
1.3 脂肪细胞的形成 | 第16-17页 |
1.4 脂肪细胞形成的转录调控 | 第17-22页 |
1.4.1 转录因子PPARγ | 第18-19页 |
1.4.2 转录因子C/EBPs | 第19-20页 |
1.4.3 其他转录因子 | 第20-22页 |
1.5 白介素家族 | 第22-23页 |
1.6 IL-6的生物学功能 | 第23-25页 |
1.6.1 IL-6在炎症和免疫方面的生物学功能 | 第23-24页 |
1.6.2 IL-6在其他疾病方面的生物学功能 | 第24-25页 |
1.6.3 IL-6与脂肪的关系 | 第25页 |
1.7 STATs家族 | 第25-27页 |
1.8 STAT3信号通路 | 第27-29页 |
1.8.1 STAT3信号通路在细胞发展和分化中的作用 | 第27-28页 |
1.8.2 IL-6与STAT3信号通路 | 第28-29页 |
1.9 本研究的目的及意义 | 第29-31页 |
2 材料与方法 | 第31-47页 |
2.1 试验材料 | 第31-34页 |
2.1.1 细胞材料 | 第31页 |
2.1.2 试验动物 | 第31页 |
2.1.3 主要试剂 | 第31-32页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第32页 |
2.1.5 工具软件与数据库 | 第32-33页 |
2.1.6 PCR引物 | 第33-34页 |
2.2 实验方法 | 第34-47页 |
2.2.1 SVF细胞的分离与培养 | 第34页 |
2.2.2 SVF 细胞的成脂诱导分化 | 第34页 |
2.2.3 Edu法细胞增殖检测试验 | 第34-36页 |
2.2.3.1 Edu标记 | 第34-35页 |
2.2.3.2 细胞固定、透膜处理 | 第35页 |
2.2.3.3 Edu检测 | 第35页 |
2.2.3.4 DNA染色 | 第35-36页 |
2.2.4 细胞总RNA提取 | 第36页 |
2.2.5 cDNA的合成 | 第36-37页 |
2.2.6 利用管家基因验证cDNA的质量 | 第37页 |
2.2.7 荧光定量PCR | 第37-38页 |
2.2.8 细胞总蛋白提取 | 第38页 |
2.2.9 BCA法蛋白浓度测定 | 第38-39页 |
2.2.10 Western杂交技术 | 第39-40页 |
2.2.11 油红O染色 | 第40-41页 |
2.2.12 Bodipy染色 | 第41页 |
2.2.13 小鼠基因型鉴定 | 第41-43页 |
2.2.13.1 鼠尾DNA提取 | 第41-42页 |
2.2.13.2 PCR基因型鉴定 | 第42-43页 |
2.2.14 Elisa酶联免疫吸附实验 | 第43页 |
2.2.15 石蜡切片、HE染色 | 第43-44页 |
2.2.16 病毒扩增、滴度测定实验 | 第44-47页 |
2.2.16.1 293细胞传代、扩增 | 第44页 |
2.2.16.2 病毒扩增、收毒 | 第44-45页 |
2.2.16.3 病毒大量扩增及收毒 | 第45页 |
2.2.16.4 病毒上清处理 | 第45页 |
2.2.16.5 细胞沉淀处理 | 第45-46页 |
2.2.16.6 病毒滴度测定 | 第46-47页 |
3 结果与分析 | 第47-59页 |
3.1 IL-6对SVF细胞向白色脂肪细胞形成的作用 | 第47-52页 |
3.1.1 IL-6抑制白色脂肪细胞的形成 | 第47-48页 |
3.1.1.1 细胞形态学的变化 | 第47-48页 |
3.1.1.2 细胞mRNA、蛋白水平的变化 | 第48页 |
3.1.2 IL-6对SVF细胞生长的作用 | 第48-49页 |
3.1.3 IL-6激活STAT3信号通路 | 第49页 |
3.1.4 抑制白色成脂过程中的STAT3信号通路 | 第49-51页 |
3.1.5 IL-6通过介导PPARγ的下调发挥抑制白色脂肪细胞形成的作用 | 第51-52页 |
3.2 IL-6基因的敲除对小鼠脂肪形成的影响 | 第52-59页 |
3.2.1 小鼠基因型鉴定 | 第53页 |
3.2.2 小鼠血脂指标检测 | 第53-54页 |
3.2.3 IL-6基因敲除对小鼠WAT、BAT及肝脏组织的影响 | 第54-58页 |
3.2.3.1 小鼠WAT、BAT、肝脏组织体重百分比 | 第54-55页 |
3.2.3.2 IL-6基因敲除对脂肪组织形态的影响 | 第55-56页 |
3.2.3.3 IL-6基因敲除对白色脂肪组织相关基因及蛋白的影响 | 第56-57页 |
3.2.3.4 IL-6基因敲除对棕色脂肪组织相关基因的影响 | 第57-58页 |
3.2.4 腺病毒扩增结果 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-62页 |
5 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读学位期间发表的论文及成果 | 第74页 |