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白介素-6对小鼠脂肪形成的作用与机理研究

中文摘要第9-11页
Abstract第11-12页
1 前言第13-31页
    1.1 肥胖第13-14页
        1.1.1 肥胖对人类和社会的危害第13页
        1.1.2 肥胖的发生机制第13-14页
    1.2 脂肪组织的类型第14-16页
    1.3 脂肪细胞的形成第16-17页
    1.4 脂肪细胞形成的转录调控第17-22页
        1.4.1 转录因子PPARγ第18-19页
        1.4.2 转录因子C/EBPs第19-20页
        1.4.3 其他转录因子第20-22页
    1.5 白介素家族第22-23页
    1.6 IL-6的生物学功能第23-25页
        1.6.1 IL-6在炎症和免疫方面的生物学功能第23-24页
        1.6.2 IL-6在其他疾病方面的生物学功能第24-25页
        1.6.3 IL-6与脂肪的关系第25页
    1.7 STATs家族第25-27页
    1.8 STAT3信号通路第27-29页
        1.8.1 STAT3信号通路在细胞发展和分化中的作用第27-28页
        1.8.2 IL-6与STAT3信号通路第28-29页
    1.9 本研究的目的及意义第29-31页
2 材料与方法第31-47页
    2.1 试验材料第31-34页
        2.1.1 细胞材料第31页
        2.1.2 试验动物第31页
        2.1.3 主要试剂第31-32页
        2.1.4 主要仪器设备第32页
        2.1.5 工具软件与数据库第32-33页
        2.1.6 PCR引物第33-34页
    2.2 实验方法第34-47页
        2.2.1 SVF细胞的分离与培养第34页
        2.2.2 SVF 细胞的成脂诱导分化第34页
        2.2.3 Edu法细胞增殖检测试验第34-36页
            2.2.3.1 Edu标记第34-35页
            2.2.3.2 细胞固定、透膜处理第35页
            2.2.3.3 Edu检测第35页
            2.2.3.4 DNA染色第35-36页
        2.2.4 细胞总RNA提取第36页
        2.2.5 cDNA的合成第36-37页
        2.2.6 利用管家基因验证cDNA的质量第37页
        2.2.7 荧光定量PCR第37-38页
        2.2.8 细胞总蛋白提取第38页
        2.2.9 BCA法蛋白浓度测定第38-39页
        2.2.10 Western杂交技术第39-40页
        2.2.11 油红O染色第40-41页
        2.2.12 Bodipy染色第41页
        2.2.13 小鼠基因型鉴定第41-43页
            2.2.13.1 鼠尾DNA提取第41-42页
            2.2.13.2 PCR基因型鉴定第42-43页
        2.2.14 Elisa酶联免疫吸附实验第43页
        2.2.15 石蜡切片、HE染色第43-44页
        2.2.16 病毒扩增、滴度测定实验第44-47页
            2.2.16.1 293细胞传代、扩增第44页
            2.2.16.2 病毒扩增、收毒第44-45页
            2.2.16.3 病毒大量扩增及收毒第45页
            2.2.16.4 病毒上清处理第45页
            2.2.16.5 细胞沉淀处理第45-46页
            2.2.16.6 病毒滴度测定第46-47页
3 结果与分析第47-59页
    3.1 IL-6对SVF细胞向白色脂肪细胞形成的作用第47-52页
        3.1.1 IL-6抑制白色脂肪细胞的形成第47-48页
            3.1.1.1 细胞形态学的变化第47-48页
            3.1.1.2 细胞mRNA、蛋白水平的变化第48页
        3.1.2 IL-6对SVF细胞生长的作用第48-49页
        3.1.3 IL-6激活STAT3信号通路第49页
        3.1.4 抑制白色成脂过程中的STAT3信号通路第49-51页
        3.1.5 IL-6通过介导PPARγ的下调发挥抑制白色脂肪细胞形成的作用第51-52页
    3.2 IL-6基因的敲除对小鼠脂肪形成的影响第52-59页
        3.2.1 小鼠基因型鉴定第53页
        3.2.2 小鼠血脂指标检测第53-54页
        3.2.3 IL-6基因敲除对小鼠WAT、BAT及肝脏组织的影响第54-58页
            3.2.3.1 小鼠WAT、BAT、肝脏组织体重百分比第54-55页
            3.2.3.2 IL-6基因敲除对脂肪组织形态的影响第55-56页
            3.2.3.3 IL-6基因敲除对白色脂肪组织相关基因及蛋白的影响第56-57页
            3.2.3.4 IL-6基因敲除对棕色脂肪组织相关基因的影响第57-58页
        3.2.4 腺病毒扩增结果第58-59页
4 讨论第59-62页
5 结论第62-63页
参考文献第63-73页
致谢第73-74页
攻读学位期间发表的论文及成果第74页

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