摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
1.1 PML 核体 | 第10-13页 |
1.1.1 PML 简介 | 第10-11页 |
1.1.2 PML 基因结构及PML 蛋白 | 第11-12页 |
1.1.3 PML 的功能 | 第12页 |
1.1.4 PML 核体的动态变化 | 第12-13页 |
1.2 SUMO 修饰与PML 核体形成的关系 | 第13-16页 |
1.2.1 SUMO修饰简介 | 第13-15页 |
1.2.2 SUMO蛋白与PML核体形成 | 第15页 |
1.2.3 SIM与PML核体形成 | 第15-16页 |
1.3 RNF4 及ATO 诱导对PML 核体的降解作用 | 第16-17页 |
1.4 FRET 技术在研究PML 核体分子动态变化中的应用 | 第17-18页 |
1.5 本研究目的与意义 | 第18-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-29页 |
2.1 材料 | 第19-22页 |
2.1.1 实验材料及试剂 | 第19页 |
2.1.2 试验试剂 | 第19-22页 |
2.2 主要仪器设备 | 第22-23页 |
2.3 试验方法 | 第23-29页 |
2.3.1 技术路线 | 第23页 |
2.3.2 CaCl_2 法制备超级感受态细胞(DH5α) | 第23页 |
2.3.3 转化 | 第23-24页 |
2.3.4 无内毒素质粒大抽提 | 第24-25页 |
2.3.5 10% SDS-PAGE 蛋白电泳 | 第25页 |
2.3.6 Hela细胞培养 | 第25-26页 |
2.3.7 Hela 细胞的脂质体瞬时转染(6 孔板) | 第26页 |
2.3.8 免疫荧光鉴定多克隆抗体 | 第26页 |
2.3.9 SUMO-1/2 对PML 的修饰 | 第26-27页 |
2.3.10 PML 核体的亚细胞结构定位及SUMO-1/2 与PML 的共定位 | 第27页 |
2.3.11 细胞周期不同阶段,SUMO-1/2 与PML 核体的共定位 | 第27页 |
2.3.12 RNF4 与PML 及SUMO-1/2 的共定位 | 第27-29页 |
第三章 结果 | 第29-35页 |
3.1 兔抗人PML多克隆抗体的鉴定 | 第29页 |
3.1.1 免疫荧光鉴定 | 第29页 |
3.2 外源性的SUMO-1/2 对PML 的修饰 | 第29-31页 |
3.2.1 western blot鉴定 | 第29-30页 |
3.2.2 免疫荧光检测PML 核体的亚细胞结构定位及与SUMO-1/2 的共定位 | 第30-31页 |
3.3 细胞周期中PML 核体的变化及与SUMO-1/2 的共定位 | 第31-34页 |
3.4 RNF4 和PML 及SUMO-1/2 的共定位 | 第34-35页 |
第四章 讨论 | 第35-38页 |
4.1 兔抗人PML 多克隆抗体的鉴定 | 第35页 |
4.2 SUMO-1/2 对PML 的修饰 | 第35-36页 |
4.3 细胞周期中PML核体和SUMO蛋白的共定位 | 第36-37页 |
4.4 RNF4 和PML 及SUMO-1/2 的共定位 | 第37-38页 |
第五章 总结及展望 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
作者简介 | 第44页 |