| 摘要 | 第4-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 目录 | 第12-15页 |
| 1 绪论 | 第15-39页 |
| 1.1 植物花发育研究进展 | 第15-32页 |
| 1.1.1 开花决定 | 第15-20页 |
| 1.1.2 花的发端 | 第20页 |
| 1.1.3 花器官发育及其ABC模型发展 | 第20-27页 |
| 1.1.4 MADS-box基因的研究进展 | 第27-32页 |
| 1.2 抑制消减杂交(SSH)技术及其在植物上的应用 | 第32-34页 |
| 1.2.1 抑制消减杂交(SSH)技术特点 | 第32-33页 |
| 1.2.2 SSH技术在植物中的应用 | 第33-34页 |
| 1.3 枣花发育研究进展 | 第34-36页 |
| 1.3.1 枣概述 | 第34-35页 |
| 1.3.2 枣花芽分化 | 第35-36页 |
| 1.3.3 枣花器特征与开花 | 第36页 |
| 1.3.4 枣花发育相关基因的克隆 | 第36页 |
| 1.4 本研究的设计思想 | 第36-37页 |
| 1.4.1 本研究的目的 | 第36-37页 |
| 1.4.2 本研究的意义 | 第37页 |
| 1.4.3 研究内容 | 第37页 |
| 1.5 本研究的技术路线 | 第37-39页 |
| 2 枣花发育解剖学研究 | 第39-59页 |
| 2.1 枣花芽形态分化研究 | 第39-44页 |
| 2.1.1 材料与方法 | 第39-40页 |
| 2.1.2 结果与分析 | 第40-43页 |
| 2.1.3 小结与讨论 | 第43-44页 |
| 2.2 枣雌雄配子体发育研究 | 第44-59页 |
| 2.2.1 材料与方法 | 第44页 |
| 2.2.2 结果与分析 | 第44-56页 |
| 2.2.3 结论与讨论 | 第56-59页 |
| 3 枣花器官SSH文库的构建 | 第59-75页 |
| 3.1 材料 | 第59-61页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第59-60页 |
| 3.1.2 实验试剂及仪器设备 | 第60-61页 |
| 3.2 方法 | 第61-64页 |
| 3.2.1 总RNA提取 | 第61-62页 |
| 3.2.2 总RNA的DnaseⅠ处理 | 第62页 |
| 3.2.3 mRNA的分离纯化 | 第62页 |
| 3.2.4 cDNA的合成 | 第62-63页 |
| 3.2.5 RsaⅠ酶切 | 第63页 |
| 3.2.6 PCR产物纯化 | 第63页 |
| 3.2.7 感受态细胞的制备 | 第63页 |
| 3.2.8 T-载体连接及转化 | 第63页 |
| 3.2.9 单克隆检测 | 第63-64页 |
| 3.3 结果与分析 | 第64-72页 |
| 3.3.1 枣花和叶总RNA提取方法筛选 | 第64-66页 |
| 3.3.2 mRNA的分离 | 第66-67页 |
| 3.3.3 cDNA合成及酶切效果检测 | 第67-68页 |
| 3.3.4 接头连接 | 第68-69页 |
| 3.3.5 两轮PCR扩增 | 第69-70页 |
| 3.3.6 蓝白斑筛选结果 | 第70-71页 |
| 3.3.7 SSH文库单克隆检测 | 第71-72页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第72-75页 |
| 4 枣花和枣叶SSH文库EST序列的生物信息学分析 | 第75-109页 |
| 4.1 材料 | 第75页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第75页 |
| 4.1.2 主要试剂与仪器设备 | 第75页 |
| 4.2 方法 | 第75-76页 |
| 4.2.1 菌体培养 | 第75页 |
| 4.2.2 PCR扩增 | 第75-76页 |
| 4.2.3 EST测序及生物信息学分析 | 第76页 |
| 4.3 结果与分析 | 第76-106页 |
| 4.3.1 测序结果及组装 | 第76-81页 |
| 4.3.2 Unigene功能注释 | 第81-106页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第106-109页 |
| 5 枣MADS-BOX基因的分子克隆、序列分析与表达特征 | 第109-137页 |
| 5.1 材料 | 第109页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第109页 |
| 5.1.2 实验试剂及仪器设备 | 第109页 |
| 5.2 方法 | 第109-113页 |
| 5.2.1 枣花SSH文库的菌液PCR检测 | 第110页 |
| 5.2.2 5’和3’RACE | 第110-112页 |
| 5.2.3 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第112页 |
| 5.2.4 PCR产物回收 | 第112页 |
| 5.2.5 载体连接 | 第112页 |
| 5.2.6 大肠杆菌转化 | 第112页 |
| 5.2.7 质粒DNA提取 | 第112页 |
| 5.2.8 测序及生物信息学分析 | 第112-113页 |
| 5.2.9 半定量RT-PCR检测基因的表达 | 第113页 |
| 5.3 结果与分析 | 第113-135页 |
| 5.3.1 枣MADS-box基因的cDNA末端克隆 | 第113-118页 |
| 5.3.2 枣MADS-box基因编码区碱基组成 | 第118-120页 |
| 5.3.3 枣MADS-box基因的结构特征 | 第120-126页 |
| 5.3.4 枣MADS-box蛋白的理化性质预测分析 | 第126-127页 |
| 5.3.5 枣MADS-box蛋白的疏水性的预测分析 | 第127-129页 |
| 5.3.6 枣MADS-box蛋白质的信号肽切割位点预测分析 | 第129-131页 |
| 5.3.7 枣MADS-box蛋白质二级结构预测 | 第131-133页 |
| 5.3.8 枣MADS-box基因组织特异性表达分析 | 第133-135页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第135-137页 |
| 6 枣LFY基因的克隆与功能研究 | 第137-169页 |
| 6.1 材料 | 第137-138页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第137页 |
| 6.1.2 实验试剂及仪器设备 | 第137-138页 |
| 6.2 方法 | 第138-142页 |
| 6.2.1 总RNA的提取 | 第138页 |
| 6.2.2 逆转录 | 第138页 |
| 6.2.3 简并引物设计 | 第138-139页 |
| 6.2.4 简并RT-PCR | 第139页 |
| 6.2.5 RACE | 第139页 |
| 6.2.6 半定量RT-PCR检测基因的表达 | 第139页 |
| 6.2.7 转基因拟南芥 | 第139-142页 |
| 6.3 结果与分析 | 第142-165页 |
| 6.3.1 枣LFY基因的克隆与生物信息学分析 | 第142-160页 |
| 6.3.2 枣ZjLFY基因组织特异性表达分析 | 第160-162页 |
| 6.3.3 枣ZjLFY转基因拟南芥 | 第162-165页 |
| 6.4 小结与讨论 | 第165-169页 |
| 7 结论与展望 | 第169-173页 |
| 7.1 结论 | 第169-170页 |
| 7.2 展望 | 第170-173页 |
| 7.2.1 枣花SSH文库中其他基因的功能 | 第170-171页 |
| 7.2.2 筛选枣花发育基因的其他途径 | 第171页 |
| 7.2.3 枣2个MADS-box基因的功能 | 第171页 |
| 7.2.4 枣ZjLFY基因的应用 | 第171-173页 |
| 参考文献 | 第173-186页 |
| 个人简介 | 第186-187页 |
| 导师简介 | 第187-189页 |
| 获得成果目录清单 | 第189-190页 |
| 致谢 | 第190页 |
