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嗜线虫致病杆菌HB310菌株几丁质酶基因的克隆及其可湿性粉剂的研制

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 文献综述第10-15页
    1.1 昆虫病原线虫及其共生菌第10-11页
    1.2 昆虫病原线虫共生菌的致病因子第11-13页
        1.2.1 脂多糖第11页
        1.2.2 次生代谢产物第11页
        1.2.3 杀虫毒素蛋白第11页
        1.2.4 几丁质酶第11-13页
    1.3 微生物农药及其剂型的研究第13-14页
    1.4 本研究的目的及意义第14-15页
第二章 嗜线虫致病杆菌 HB310 几丁质酶及其抑菌活性第15-23页
    2.1 材料第15-16页
        2.1.1 供试菌株第15页
        2.1.2 实验药品第15页
        2.1.3 培养基第15-16页
        2.1.4 磷酸盐缓冲液(PBS)试剂配制第16页
        2.1.5 蛋白电泳试剂第16页
        2.1.6 实验仪器第16页
    2.2 实验方法第16-18页
        2.2.1 Xn HB310 菌液的培养第16-17页
        2.2.2 Xn HB310 菌株胞内蛋白的制备第17页
        2.2.3 苹果病原真菌菌种培养第17页
        2.2.4 昆虫病原线虫共生菌对苹果病原真菌的生长速率测定法第17页
        2.2.5 Xn HB310 菌液对苹果腐烂病菌菌落生长抑制和菌丝形态影响的观察第17-18页
        2.2.6 Xn HB310 胞内总蛋白的 SDS-PAGE 分析第18页
        2.2.7 Xn HB310 蛋白毒素的质谱鉴定第18页
    2.3 结果与分析第18-22页
        2.3.1 Xn HB310 发酵液和胞内总蛋白对苹果病原菌的抑制作用第18-19页
        2.3.2 Xn HB310 发酵液和胞内蛋白对苹果腐烂病菌菌落生长和菌丝形态的影响第19-20页
        2.3.3 Xn HB310 几丁质酶的分析和鉴定第20-22页
    2.4 讨论第22-23页
第三章 嗜线虫致病杆菌 HB310 几丁质酶基因的克隆及表达第23-33页
    3.1 材料第23-24页
        3.1.1 菌株和质粒第23页
        3.1.2 实验药品第23页
        3.1.3 培养基第23-24页
        3.1.4 琼脂糖核酸电泳缓冲液第24页
        3.1.5 溶液配置第24页
        3.1.6 实验仪器第24页
    3.2 实验方法第24-28页
        3.2.1 Xn HB310 细胞总 DNA 的提取第24-25页
        3.2.2 几丁质酶基因的克隆第25-27页
        3.2.3 几丁质酶 CHI60 和 CHI70 基因的原核表达第27-28页
    3.3 结果与分析第28-32页
        3.3.1 chi 60 与 chi70 基因的克隆第28-30页
        3.3.2 几丁质酶 CHI60 和 CHI70 的原核表达第30-32页
    3.4 讨论第32-33页
第四章 几丁质酶蛋白生物信息学分析第33-48页
    4.1 生物信息学分析软件和网址第33页
    4.2 chi60 和 chi70 基因的生物信息学分析第33-34页
    4.3 结果与分析第34-46页
        4.3.1 chi60 和 chi70 基因的氨基酸序列第34-38页
        4.3.2 CHI60 蛋白和 CHI70 蛋白的二级结构预测第38-43页
        4.3.3 CHI60 蛋白和 CHI70 蛋白的三级结构第43-44页
        4.3.4 多序列比对第44-45页
        4.3.5 系统进化分析第45-46页
    4.4 讨论第46-48页
第五章 嗜线虫致病杆菌 HB310 可湿性粉剂的研制第48-57页
    5.1 材料第48-49页
        5.1.1 供试菌株和试虫第48页
        5.1.2 供试农药助剂及药剂第48页
        5.1.3 实验仪器第48-49页
    5.2 方法第49-51页
        5.2.1 嗜线虫致病杆菌 HB310 菌粉的制备第49页
        5.2.2 制剂加工工艺第49页
        5.2.3 润湿性的测定方法第49页
        5.2.4 悬浮率的测定方法第49页
        5.2.5 细度的测定方法第49-50页
        5.2.6 含水量的测定第50页
        5.2.7 pH 值的测定方法第50页
        5.2.8 冷贮稳定性的测定方法第50页
        5.2.9 载体的筛选第50-51页
        5.2.10 表面活性剂的筛选第51页
        5.2.11 润湿剂和分散剂的最佳配比及其使用浓度的筛选方法第51页
        5.2.12 主要质量指标检测方法第51页
        5.2.13 田间药效试验第51页
    5.3 结果与分析第51-55页
        5.3.1 载体的筛选结果第51-52页
        5.3.2 表面活性剂的筛选结果第52-53页
        5.3.3 分散剂与润湿剂的最佳配比的筛选第53-54页
        5.3.4 分散剂与润湿剂最佳用量的筛选第54页
        5.3.5 嗜线虫致病杆菌 HB310 可湿性粉剂的指标测定第54-55页
        5.3.6 制剂的贮稳定性的测定第55页
        5.3.7 田间药效试验第55页
    5.4 讨论第55-57页
第六章 结论与展望第57-58页
    6.1 结论第57页
    6.2 展望第57-58页
参考文献第58-64页
在读期间发表论文第64-65页
作者简历第65-66页
致谢第66-67页

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