| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-19页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第14-15页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第15页 |
| 2.1.3 细胞株 | 第15页 |
| 2.1.4 主要试剂与耗材 | 第15-17页 |
| 2.1.5 主要配制溶液 | 第17-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-30页 |
| 2.2.1 E.coil DH5α感受态细菌的制备 | 第19-20页 |
| 2.2.2 连接产物转化 | 第20页 |
| 2.2.3 质粒抽提 | 第20-21页 |
| 2.2.4 质粒菌种保存 | 第21页 |
| 2.2.5 抽提产物的鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.6 细胞复苏和培养 | 第22-23页 |
| 2.2.7 细胞消化传代 | 第23页 |
| 2.2.8 细胞冻存 | 第23页 |
| 2.2.9 细胞计数 | 第23页 |
| 2.2.10 细胞转染(以E-cad质粒转染为例) | 第23-24页 |
| 2.2.11 实验分组 | 第24-25页 |
| 2.2.12 荧光显微镜下观察GEFP的表达及转染率的计算 | 第25页 |
| 2.2.13 流式细胞术评估转染率 | 第25页 |
| 2.2.14 基因水平检测 | 第25-27页 |
| 2.2.15 蛋白水平的检测 | 第27-30页 |
| 2.3 统计学处理 | 第30-31页 |
| 3 实验结果 | 第31-39页 |
| 3.1 E-cad质粒酶切电泳及RT-PCR检测结果 | 第31-32页 |
| 3.1.1 酶切电泳鉴定结果 | 第31页 |
| 3.1.2 RT-PCR检测结果 | 第31-32页 |
| 3.2 pIRES2-EGFP-ECAD质粒转染效率评估 | 第32-34页 |
| 3.2.1 pIRES2-EGFP-ECAD质粒转染HMrSV5后GEFP的表达情况 | 第32-33页 |
| 3.2.2 pIRES2-EGFP-ECAD质粒转染HMrSV5后转染率统计 | 第33-34页 |
| 3.3 pIRES2-EGFP-ECAD质粒转染HMrSV5对E-cad mRNA及蛋白的影响 | 第34-35页 |
| 3.4 TGF-β诱导HMrSV5细胞EMT的发生 | 第35-36页 |
| 3.5 过表达E-cad对TGF-β刺激HMrSV5细胞E-cad、α-SMA、Vimentin表达影响 | 第36-39页 |
| 4 讨论 | 第39-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 综述 | 第45-51页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 攻读学位期间主要研究成果 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
