| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩写表 | 第17-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-28页 |
| 1.1 心肌病 | 第18-19页 |
| 1.1.1 心肌病的危害 | 第18页 |
| 1.1.2 心肌病的分类和临床诊断方法 | 第18-19页 |
| 1.2 心肌病的基因检测意义 | 第19-20页 |
| 1.3 扩张型心肌病 | 第20-21页 |
| 1.3.1 扩张型心肌病的基本特征 | 第20页 |
| 1.3.2 扩张型心肌病相关致病基因的研究 | 第20-21页 |
| 1.4 肥厚型心肌病 | 第21-24页 |
| 1.4.1 肥厚型心肌病的基本特征 | 第21-22页 |
| 1.4.2 肥厚型心肌病相关致病基因的研究 | 第22页 |
| 1.4.3 中国肥厚型心肌病人群MYH7基因突变谱 | 第22-24页 |
| 1.5 心肌病的主要基因检测技术 | 第24-26页 |
| 1.5.1 测序技术 | 第24-25页 |
| 1.5.2 荧光定量PCR技术 | 第25页 |
| 1.5.3 基因芯片技术 | 第25-26页 |
| 1.6 本研究的目的、意义及创新点 | 第26-28页 |
| 1.6.1 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 1.6.2 本研究的创新点 | 第27-28页 |
| 第二章 扩张型心肌病相关致病基因新突变位点的发现 | 第28-52页 |
| 2.1 引言 | 第28-29页 |
| 2.2 实验技术路线 | 第29-30页 |
| 2.3 材料与仪器 | 第30-35页 |
| 2.3.1 研究对象 | 第30页 |
| 2.3.2 主要仪器和试剂 | 第30-32页 |
| 2.3.3 目的基因引物 | 第32-35页 |
| 2.4 实验方法 | 第35-40页 |
| 2.4.1 临床资料的统计和临床样本的收集 | 第35页 |
| 2.4.2 样本DNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.4.3 PCR扩增 | 第36-37页 |
| 2.4.4 PCR琼脂糖凝胶电泳 | 第37页 |
| 2.4.5 PCR产物胶回收 | 第37-38页 |
| 2.4.6 Sanger测序 | 第38-40页 |
| 2.5 实验结果 | 第40-43页 |
| 2.5.1 患者临床资料的统计与分析 | 第40-41页 |
| 2.5.2 样本DNA提取结果 | 第41-42页 |
| 2.5.3 部分PCR扩增琼脂糖凝胶电泳 | 第42页 |
| 2.5.4 部分测序结果图 | 第42-43页 |
| 2.6 结果分析 | 第43-49页 |
| 2.6.1 测序结果分析 | 第43-44页 |
| 2.6.2 保守性分析 | 第44-45页 |
| 2.6.3 致病性预测 | 第45-48页 |
| 2.6.4 同源建模分析 | 第48-49页 |
| 2.7 讨论 | 第49-51页 |
| 2.7.1 云南地区扩张型心肌病基因检测的必要性 | 第49页 |
| 2.7.2 与扩张型心肌病发病相关的靶基因的选择 | 第49-50页 |
| 2.7.3 扩张型心肌病发病相关的新突变位点的发现 | 第50页 |
| 2.7.4 本研究存在的缺点及研究展望 | 第50-51页 |
| 2.8 本章小结 | 第51-52页 |
| 第三章 家族性肥厚型心肌病致病基因MYH7的突变筛查 | 第52-66页 |
| 3.1 引言 | 第52-53页 |
| 3.2 实验技术路线 | 第53-54页 |
| 3.3 材料与仪器 | 第54-57页 |
| 3.3.1 研究对象 | 第54页 |
| 3.3.2 主要仪器和试剂 | 第54-56页 |
| 3.3.3 引物序列 | 第56-57页 |
| 3.4 实验方法 | 第57-58页 |
| 3.4.1 临床资料的统计和临床样本的收集 | 第57页 |
| 3.4.2 样本DNA的提取 | 第57页 |
| 3.4.3 PCR扩增 | 第57-58页 |
| 3.4.4 PCR琼脂糖凝胶电泳 | 第58页 |
| 3.4.5 PCR产物胶回收 | 第58页 |
| 3.4.6 Sanger测序 | 第58页 |
| 3.5 实验结果 | 第58-64页 |
| 3.5.1 家系图谱 | 第58-60页 |
| 3.5.2 样本DNA提取结果 | 第60页 |
| 3.5.3 PCR扩增靶基因琼脂糖凝胶电泳结果 | 第60-61页 |
| 3.5.4 部分测序结果图示及分析结果 | 第61-64页 |
| 3.6 讨论 | 第64-65页 |
| 3.6.1 双杂合突变位点的基因突变的剂量效应 | 第64-65页 |
| 3.6.2 MYH7基因在家族性肥厚型心肌病中的重要性 | 第65页 |
| 3.7 本章小结 | 第65-66页 |
| 第四章 MYH7基因突变TaqMan-MGB检测方法的建立 | 第66-88页 |
| 4.1 引言 | 第66-67页 |
| 4.2 实验技术路线 | 第67-68页 |
| 4.3 实验材料 | 第68-72页 |
| 4.3.1 研究对象 | 第68页 |
| 4.3.2 主要仪器和试剂 | 第68-71页 |
| 4.3.3 引物序列 | 第71-72页 |
| 4.3.3.1 基因引物的设计 | 第71页 |
| 4.3.3.2 TaqMan-MGB荧光定量PCR引物和探针的设计 | 第71-72页 |
| 4.4 实验方法 | 第72-78页 |
| 4.4.1 临床资料的统计和临床样本的收集 | 第72页 |
| 4.4.2 样本DNA的提取 | 第72-73页 |
| 4.4.3 PCR扩增 | 第73页 |
| 4.4.4 PCR琼脂糖凝胶电泳 | 第73页 |
| 4.4.5 PCR产物胶回收 | 第73-74页 |
| 4.4.6 标准品制备 | 第74-76页 |
| 4.4.7 TaqMan-MGB实时荧光定量PCR反应体系的建立和优化 | 第76-78页 |
| 4.5 实验结果 | 第78-86页 |
| 4.5.1 标准品构建 | 第78-79页 |
| 4.5.2 TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法最适条件 | 第79-81页 |
| 4.5.3 TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的评价结果 | 第81-85页 |
| 4.5.4 TaqMan-MGB荧光定量检测方法临床应用 | 第85-86页 |
| 4.6 讨论 | 第86-87页 |
| 4.6.1 TaqMan-MGB荧光标记的选择 | 第86页 |
| 4.6.2 本研究TaqMan-MGB的灵敏性、特异性和重复性的评价 | 第86-87页 |
| 4.6.3 研究展望 | 第87页 |
| 4.7 本章小结 | 第87-88页 |
| 第五章 总结 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-100页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第100-102页 |
| 附录B 作者简介 | 第102页 |
