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谷氨酰胺tRNA合成酶Ser70、Lys394和Tyr491对其形成氨酰tRNA合成酶复合体的影响

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 综述第10-22页
    1 氨酰tRNA合成第10-19页
        1.1 氨酰tRNA合成酶的经典功能第10-11页
        1.2 氨酰tRNA合成酶的演变第11-13页
        1.3 氨酰tRNA合成酶(Aminoacyl-tRNA synthetasethetases,AARS)的分类第13-15页
        1.4 氨酰tRNA合成酶(Aminoacyl-tRNA synthetase)与疾病的联系第15-17页
        1.5 氨酰-tRNA合成酶(Aminoacyl-tRNA synthetasethetases,AARS)应用前景第17-19页
    2 氨酰tRNA合成酶复合物(Aminoacyl-tRNA synthetase complex,MSC)第19-20页
    3 谷氨酰胺tRNA合成酶(Glutamine tRNA Synthetase,QRS)第20-22页
第二章 材料与方法第22-34页
    1 材料与试剂第22-27页
        1.1 细胞、菌种及载体第22页
        1.2 分子生物学试剂第22-23页
        1.3 主要试剂的配置第23-27页
    2 主要仪器设备第27-28页
    3 实验方法第28-34页
        3.1 感受态细胞DH5α 制备第28-29页
        3.2 PCR扩增目的基因第29-30页
        3.3 琼脂糖凝胶电泳第30页
        3.4 切胶回收纯化第30-31页
        3.5 质粒DNA的提取第31页
        3.6 质粒浓缩第31页
        3.7 酶切反应第31-32页
        3.8 连接反应第32页
        3.9 重组DNA的转化第32-33页
        3.10 单克隆菌落PCR鉴定第33-34页
第三章 人谷氨酰胺tRNA合成酶Ser~(70)、Lys~(394)和Tyr~(491)突变对形成MSC的影响第34-45页
    1 材料与方法第34-41页
        1.1 材料试剂第34页
        1.2 方法第34-41页
    2 结果分析第41-43页
    3 讨论第43-45页
第四章 谷氨酰胺tRNA合成酶突变对细胞凋亡的影响第45-50页
    1 材料与方法第45-46页
        1.1 实验材料与试剂第45页
        1.2 实验方法第45-46页
    2 结果分析第46-48页
        2.1 MTT检测HELA细胞活性第46-47页
        2.2 MTT检测HEK293细胞活性第47-48页
    3 讨论第48-50页
第五章 QRS Ser~(70)、Lys~(394)和Tyr~(491)突变体的亚细胞定位第50-58页
    1 材料与方法第50-52页
        1.1 材料试剂第50页
        1.2 方法第50-52页
    2 结果第52-56页
        2.1 PEGFP-N2-QRS重组质粒的构建第52-56页
            2.1.1 QRS野生型基因扩增第52-53页
            2.1.2 PEGFP-N1载体酶切鉴定第53页
            2.1.3 PEGFP-N1-QRS连接产物鉴定第53-55页
            2.1.4 构建PEGFP-N1-QRS突变型质粒第55页
            2.1.5 PEGFP-N1-QRS野生型及突变型重组质粒转染HELA细胞第55页
            2.1.6 PEGFP-N2-QRS野生型与突变型重组质粒表达定位第55-56页
    3 讨论第56-58页
第六章 总结与展望第58-60页
    1 总结第58-59页
        1.1 成功构建了QRS Ser~(70)、Lys~(394)和Tyr~(491)突变体第58页
        1.2 证明了QRS-Lys~(394)和QRS-Tyr~(491)突变体影响MSC稳定性第58页
        1.3 证明了QRS-Lys~(394)和QRS-Tyr~(491)突变可以抑制肿瘤细胞凋亡第58-59页
        1.4 有待进一步研究第59页
    2 展望第59-60页
参考文献第60-68页
附录第68-69页
研究生期间科研成果第69-70页
致谢第70-71页

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