| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 主要符号表 | 第14-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-23页 |
| 1.1 木质纤维素简介 | 第15-16页 |
| 1.2 纤维素酶简介 | 第16-17页 |
| 1.3 纤维素资源简介及其利用现状 | 第17-18页 |
| 1.4 解脂耶氏酵母表达系统简介 | 第18-19页 |
| 1.5 秸秆生物饲料研究现状 | 第19-20页 |
| 1.6 本研究的内容和意义 | 第20-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 质粒及菌株 | 第23页 |
| 2.1.2 主要培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要酶及试剂 | 第24页 |
| 2.1.4 主要缓冲液 | 第24页 |
| 2.1.5 主要引物 | 第24-25页 |
| 2.1.6 仪器设备 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-34页 |
| 2.2.1 SDS碱裂解法抽提质粒 | 第25-26页 |
| 2.2.2 PCR引物设计及基因片段扩增 | 第26-27页 |
| 2.2.3 酶切质粒DNA凝胶电泳分离回收 | 第27-28页 |
| 2.2.4 基因片段与载体连接 | 第28页 |
| 2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
| 2.2.6 质粒快速转化方法 | 第28-29页 |
| 2.2.7 质粒常规转化方法 | 第29页 |
| 2.2.8 大肠杆菌重组菌筛选 | 第29页 |
| 2.2.9 解脂耶氏酵母Polh菌株感受态制备及转化 | 第29-30页 |
| 2.2.10 解脂耶氏酵母重组菌株的筛选 | 第30-31页 |
| 2.2.11 DNS法测定重组菌株酶活 | 第31-32页 |
| 2.2.12 农作物秸秆发酵方法 | 第32-33页 |
| 2.2.13 凯氏定氮法测定粗蛋白含量 | 第33-34页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第34-52页 |
| 3.1 纤维素酶分泌表达载体的构建及其验证 | 第34-39页 |
| 3.1.1 分泌表达载体pINA1297-BG的构建 | 第34-35页 |
| 3.1.2 分泌表达载体pINA1297-CBH的构建 | 第35-36页 |
| 3.1.3 分泌表达载体pINA1297-EG的构建 | 第36-37页 |
| 3.1.4 重组载体的验证 | 第37-39页 |
| 3.2 解脂耶氏酵母转化及重组菌株的筛选 | 第39-41页 |
| 3.3 解脂耶氏酵母重组菌株酶学性质的研究 | 第41-44页 |
| 3.4 以玉米秸秆为底物的混合重组酵母发酵 | 第44-47页 |
| 3.4.1 以玉米秸秆为底物的发酵产物粗蛋白含量测定结果 | 第44-45页 |
| 3.4.2 以玉米秸秆为底物的发酵产物粗蛋白含量测定结果分析 | 第45-47页 |
| 3.5 以水稻秸秆为底物的重组酵母混合发酵 | 第47-52页 |
| 3.5.1 以水稻秸秆为底物的发酵产物粗蛋白含量测定结果 | 第47-49页 |
| 3.5.2 以水稻秸秆为底物的发酵产物粗蛋白含量测定结果分析 | 第49-52页 |
| 第4章 结论与展望 | 第52-54页 |
| 研究生期间发表论文 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
