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苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒ac130(gp16)和ac132的功能研究

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一章 文献综述第14-26页
    1.1 杆状病毒第14页
    1.2 杆状病毒的形态结构和两相复制周期第14-16页
    1.3 杆状病毒基因组第16-18页
    1.4 杆状病毒基因表达的调控第18页
    1.5 杆状病毒结构蛋白第18-22页
        1.5.1 BV特有的囊膜蛋白第19页
        1.5.2 ODV特有的囊膜蛋白第19-20页
        1.5.3 BV和ODV共有的囊膜蛋白第20-21页
        1.5.4 BV和ODV的核衣壳蛋白第21-22页
    1.6 杆状病毒非结构蛋白第22-25页
    1.7 研究目的和意义第25-26页
第二章 ac130(gp16)的功能研究第26-76页
    2.1 研究背景第26页
    2.2 实验材料第26-35页
        2.2.1 菌株、病毒、昆虫细胞和实验昆虫第26-27页
        2.2.2 引物、质粒和bacmids第27-30页
        2.2.3 培养基第30-32页
        2.2.4 试剂盒、工具酶和分子量标准第32页
        2.2.5 抗生素和化学试剂第32-35页
        2.2.6 主要仪器第35页
    2.3 实验方法第35-47页
        2.3.1 感受态细胞的制备第35-36页
        2.3.2 质粒提取第36-37页
        2.3.3 Bacmid的提取第37页
        2.3.4 PCR第37页
        2.3.5 从凝胶中回收DNA片段第37-38页
        2.3.6 重组bacmid构建第38-39页
        2.3.7 转染和感染第39页
        2.3.8 病毒滴度测定第39页
        2.3.9 SDS-PAGE和Western-blot第39-40页
        2.3.10 病毒DNA复制检测第40-41页
        2.3.11 病毒感染细胞和病毒电镜分析第41页
        2.3.12 病毒感染细胞亚细胞组分分离第41-42页
        2.3.13 生物测定第42-43页
        2.3.14 酵母双杂交第43-47页
    2.4 结果第47-73页
        2.4.1 gp16缺失和回复突变体构建第47-50页
        2.4.2 gp16缺失和回复突变体在Sf9细胞中的复制产率第50-53页
        2.4.3 gp16缺失和回复突变体在受感染细胞中的DNA复制分析第53页
        2.4.4 gp16缺失和回复突变体VP39和多角体蛋白表达分析第53-55页
        2.4.5 gp16缺失和回复突变体在受感染细胞中的形态发生第55-59页
        2.4.6 GP16在受感染细胞中的亚细胞定位第59-61页
        2.4.7 gp16缺失对病毒杀虫毒力的影响第61-64页
        2.4.8 gp16过表达和早表达突变体在Sf9细胞中的复制产率第64-67页
        2.4.9 与AcMNPV GP16蛋白相互作用的寄主细胞蛋白的筛选第67-73页
    2.5 讨论第73-76页
第三章 ac132的功能研究第76-106页
    3.1 研究背景第76页
    3.2 实验材料第76-80页
        3.2.1 菌株、病毒和昆虫细胞第76页
        3.2.2 引物、bacmids和质粒第76-78页
        3.2.3 培养基第78-79页
        3.2.4 试剂盒、工具酶和分子量标准第79页
        3.2.5 抗生素和化学试剂第79-80页
        3.2.6 主要仪器第80页
    3.3 实验方法第80-84页
        3.3.1 感受态细胞的制备第80页
        3.3.2 质粒和bacmid提取第80页
        3.3.3 PCR反应第80页
        3.3.4 重组bacmid构建第80页
        3.3.5 转染和感染第80页
        3.3.6 病毒滴度测定第80页
        3.3.7 SDS-PAGE和Western-blot第80-81页
        3.3.8 病毒核衣壳和囊膜分离、纯化以及AC132检测第81-82页
        3.3.9 免疫荧光实验第82-83页
        3.3.10 病毒感染细胞电镜分析第83页
        3.3.11 免疫共沉淀第83-84页
    3.4 实验结果第84-102页
        3.4.1 ac129、ac130、ac131和ac132多基因缺失突变体的构建及其对病毒BV复制影响的分析第84-89页
        3.4.2 ac132缺失突变体的构建及其对病毒BV复制影响的分析第89-93页
        3.4.3 ac132缺失对病毒基因组DNA复制以及晚期基因表达无显著影响第93-94页
        3.4.4 ac132缺失对病毒形态发生的影响第94-97页
        3.4.5 AC132序列分析第97页
        3.4.6 AC132的病毒结构定位第97-99页
        3.4.7 AC132在受感染细胞中的表达时程第99-100页
        3.4.8 AC132在受感染细胞中的亚细胞定位第100-102页
        3.4.9 AC132与E18和P6.9发生相互作用第102页
    3.5 讨论第102-106页
结论第106-107页
本论文的主要创新点第107-108页
参考文献第108-118页
附录第118-120页
攻读博士学位期间发表的学术论文第120-121页
致谢第121页

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