| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 水稻细菌性条斑病的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.1 水稻细菌性条斑病的发现及分布 | 第12页 |
| 1.1.2 水稻细菌性条斑病的发病特点 | 第12-13页 |
| 1.1.3 水稻细菌性条斑病的病原分化 | 第13页 |
| 1.1.4 水稻细菌性条斑病的防治 | 第13页 |
| 1.2 水稻细菌性条斑病的抗性研究进展 | 第13-19页 |
| 1.2.1 黄单胞杆菌Ⅲ型分泌系统的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2.2 水稻细菌性条斑病的抗性研究进展 | 第14-19页 |
| 1.2.2.1 质量抗病性的概念 | 第14-16页 |
| 1.2.2.2 数量抗病性的概念 | 第16-17页 |
| 1.2.2.3 水稻细菌性条斑病的抗性遗传研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)研究进展 | 第19-23页 |
| 1.3.1 多聚半乳糖醛酸酶(PGs)简介 | 第19-20页 |
| 1.3.2 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)的前期研究 | 第20-21页 |
| 1.3.3 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)的生物学特性和功能 | 第21-23页 |
| 1.4 目的及意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.1.1 植物材料品种及来源 | 第24页 |
| 2.1.2 菌株 | 第24页 |
| 2.1.3 引物设计与合成 | 第24页 |
| 2.2 OsPGIP1和OsPGIP4的组织特异性表达分析 | 第24-25页 |
| 2.2.1 不同生长时期的组织的选择 | 第24页 |
| 2.2.2 RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.3 第一链cDNA合成 | 第25页 |
| 2.2.4 荧光定量PCR | 第25页 |
| 2.3 在水稻中OsPGIP1和OsPGIP4受到不同胁迫诱导表达模式分析 | 第25-26页 |
| 2.3.1 OsPGIP1和OsPGIP4受到RS105的诱导表达模式分析 | 第25页 |
| 2.3.2 OsPGIP1和OsPGIP4受到PX099的诱导表达模式分析 | 第25-26页 |
| 2.3.3 OsPGIP1和OsPGIP4模拟盐和干旱胁迫表达模式分析 | 第26页 |
| 2.4 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第26页 |
| 2.5 转基因植株的阳性鉴定 | 第26-27页 |
| 2.6 转基因植株的接种检测 | 第27-28页 |
| 2.6.1 对转基因植株T_0代接种水稻条斑病的检测 | 第27页 |
| 2.6.2 对转基因植株T_0代进行基因表达量检测 | 第27页 |
| 2.6.3 转基因植株T_1代的种植以及阳性鉴定 | 第27页 |
| 2.6.4 对转基因植株T_1代接种水稻条斑病的检测 | 第27页 |
| 2.6.5 对转基因植株T_1代接种水稻白叶枯病的检测 | 第27-28页 |
| 2.7 OsPGIP1和OsPGIP4的超量表达植株检测相关抗性基因的表达量 | 第28页 |
| 2.8 OsPGIP1和OsPGIP4的亚细胞定位 | 第28-29页 |
| 2.8.1 OsPGIP1和OsPGIP4的亚细胞定位片段的克隆 | 第28页 |
| 2.8.2 目的片段的回收 | 第28页 |
| 2.8.3 OsPGIP1和OsPGIP4的亚细胞定位载体的构建 | 第28-29页 |
| 2.8.3.1 OsPGIP1和OsPGIP4的BP Recombination Reaction | 第28-29页 |
| 2.8.3.2 质粒的酶切 | 第29页 |
| 2.8.3.3 OsPGIP1和OsPGIP4的LR Recombination Reaction | 第29页 |
| 2.8.4 pEarlygate 103-OsPGIP1和pEarlygate 103-OsPGIP4在烟草中的瞬时表达 | 第29页 |
| 2.9 OsPGIP1和OsPGIP4以及PGs(Xoc)的原核表达 | 第29-32页 |
| 2.9.1 OsPGIP1和OsPGIP4的原核表达片段的克隆与目的片段的回收 | 第29页 |
| 2.9.2 PGs(Xoc)的原核表达片段的克隆与目的片段的回收 | 第29-30页 |
| 2.9.3 原核表达载体的构建 | 第30页 |
| 2.9.3.1 pEASY-E1-OsPGIP1、pEASY-E1-OsPGIP4载体的构建 | 第30页 |
| 2.9.3.2 pET42a-OsPGIP4、pET42a-PGs载体的构建 | 第30页 |
| 2.9.4 OsPGIP1和OsPGIP4以及PGs(Xoc)的原核表达过程 | 第30-32页 |
| 2.9.4.1 试表达 | 第30页 |
| 2.9.4.2 原核表达 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-52页 |
| 3.1 OsPGIP1和OsPGIP4的基因序列分析 | 第32页 |
| 3.2 OsPGIP1和OsPGIP4的组织特异性表达分析 | 第32-33页 |
| 3.3 不同胁迫下,基因OsPGIP1和OsPGIP4的表达模式分析 | 第33-35页 |
| 3.3.1 OsPGIP1和OsPGIP4受到水稻条斑病病菌RS105的诱导表达模式分析 | 第33-34页 |
| 3.3.2 OsPGIP1和OsPGIP4受到水稻白叶枯病病菌PX099的诱导表达模式分析 | 第34-35页 |
| 3.3.3 OsPGIP1和OsPGIP4受到盐和干旱胁迫的诱导表达模式分析 | 第35页 |
| 3.4 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第35-38页 |
| 3.4.1 OsPGIP4超量表达转基因植株的获得 | 第35-36页 |
| 3.4.2 pU1301：：OsPGIP1、ds1301：：OsPGIP1转基因植株T_0代抗性分析 | 第36-37页 |
| 3.4.3 pU1301：：OsPGIP4、ds1301：：OsPGIP4转基因植株T_0代抗性分析 | 第37-38页 |
| 3.5 T1代植株抗性检测 | 第38-43页 |
| 3.5.1 pU1301：：OsPGIP1、ds1301：：OsPGIP1转基因植株T_1代水稻条斑病抗性分析 | 第38-39页 |
| 3.5.2 pU1301：：OsPGIP4、ds1301：：OsPGIP4转基因植株T_1代水稻条斑病抗性分析 | 第39-42页 |
| 3.5.3 pU1301：：OsPGIP1、ds1301：：OsPGIP1转基因植株T_1代水稻白叶枯病抗性分析 | 第42页 |
| 3.5.4 ds1304：：OsPGIP4转基因植株T_1代水稻白叶枯病抗性分析 | 第42-43页 |
| 3.6 pU1301：：OsPGIP4转基因植株中抗性相关基因表达量检测 | 第43-44页 |
| 3.7 亚细胞定位分析 | 第44-45页 |
| 3.8 OsPGIP1和OsPGIP4以及PGs(Xoc)的原核表达 | 第45-52页 |
| 3.8.1 体外表达条件探索 | 第45-47页 |
| 3.8.1.1 OsPGIP1的体外表达条件探索 | 第45-46页 |
| 3.8.1.2 OsPGIP4体外表达条件的探索 | 第46页 |
| 3.8.1.3 PGs(Xoc)体外表达条件的探索 | 第46-47页 |
| 3.8.2 OsPGIP1和OsPGIP4以及PGs(Xoc)的诱导表达及纯化 | 第47-49页 |
| 3.8.2.1 OsPGIP1的诱导表达及纯化 | 第47-48页 |
| 3.8.2.2 OsPGIP4的诱导表达及纯化 | 第48-49页 |
| 3.8.2.3 PGs的诱导表达及纯化 | 第49页 |
| 3.8.3 Superdex 75凝胶过滤层析 | 第49-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 5.1 OsPGIP1和OsPGIP4正调控水稻对水稻条斑病的抗性 | 第54页 |
| 5.2 OsPGIP1不参与水稻对水稻白叶枯病的抗性 | 第54页 |
| 5.3 OsPGIP4可能通过影响抗性相关基因来影响植物的抗病性 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-66页 |
| 附录Ⅰ | 第66-68页 |
| 附录Ⅱ | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
