| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第14-35页 |
| 1.1 西他列汀 | 第14-15页 |
| 1.2 西他列汀的合成方法 | 第15-17页 |
| 1.2.1 化学合成方法 | 第15-16页 |
| 1.2.2 化学-酶法合成方法 | 第16-17页 |
| 1.3 转氨酶的固定化研究进展 | 第17-27页 |
| 1.3.1 转氨酶 | 第17-21页 |
| 1.3.1.1 转氨酶的分类 | 第18-19页 |
| 1.3.1.2 转氨酶的催化机理 | 第19-20页 |
| 1.3.1.3 转氨酶的应用 | 第20-21页 |
| 1.3.2 转氨酶的固定化 | 第21-27页 |
| 1.3.2.1 固定化酶的介绍 | 第21-22页 |
| 1.3.2.2 酶固定化方法分类 | 第22-24页 |
| 1.3.2.2 共价固定化法 | 第24页 |
| 1.3.2.3 PLP-PLP依赖性酶共固定化 | 第24-26页 |
| 1.3.2.4 固定化转氨酶应用 | 第26-27页 |
| 1.4 本文的研究意义及研究内容 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-35页 |
| 第二章 西他列汀转氨酶的固定化 | 第35-57页 |
| 2.1 引言 | 第35页 |
| 2.2 实验材料 | 第35-37页 |
| 2.2.1 酶源与载体 | 第35-36页 |
| 2.2.2 培养基 | 第36页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第36页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第36-37页 |
| 2.3 实验方法 | 第37-42页 |
| 2.3.1 转氨酶转氨酶冻干粉制作 | 第37页 |
| 2.3.2 固定化载体的筛选 | 第37-38页 |
| 2.3.3 固定化转氨酶的制备 | 第38-41页 |
| 2.3.3.1 酶蛋白浓度对转氨酶固定化的影响 | 第39页 |
| 2.3.3.2 缓冲液盐浓度对转氨酶固定化的影响 | 第39页 |
| 2.3.3.3 pH对转氨酶固定化影响 | 第39页 |
| 2.3.3.4 温度对转氨酶固定化的影响 | 第39-40页 |
| 2.3.3.5 固定化时间对转氨酶固定化的影响 | 第40页 |
| 2.3.3.6 辅酶浓度对固定化转氨酶的影响 | 第40页 |
| 2.3.3.7 保温温度对固定化酶稳定性的影响 | 第40页 |
| 2.3.3.8 保温时间对固定化酶稳定性的影响 | 第40页 |
| 2.3.3.9 固定化酶工艺放大操作 | 第40-41页 |
| 2.3.4 酶活测定及固定化参数计算方法 | 第41页 |
| 2.3.4.1 酶活测定 | 第41页 |
| 2.3.4.2 蛋白浓度测定方法 | 第41页 |
| 2.3.5 液相检测方法 | 第41-42页 |
| 2.4 结果与分析 | 第42-54页 |
| 2.4.1 产物西他列汀的标准曲线 | 第42页 |
| 2.4.2 转氨酶冻干粉的获得 | 第42页 |
| 2.4.3 固定化酶载体的筛选 | 第42-44页 |
| 2.4.4 酶蛋白浓度对转氨酶固定化的影响 | 第44-45页 |
| 2.4.5 缓冲液盐浓度对转氨酶固定化的影响 | 第45-46页 |
| 2.4.6 缓冲液pH对转氨酶固定化的影响 | 第46-48页 |
| 2.4.7 温度对转氨酶固定化的影响 | 第48-49页 |
| 2.4.8 固定化时间对转氨酶固定化的影响 | 第49-50页 |
| 2.4.9 辅酶浓度对固定化转氨酶的影响 | 第50-51页 |
| 2.4.10 保温温度对固定化酶酶活及稳定性的影响 | 第51-52页 |
| 2.4.11 固定化保温时间对固定化酶稳定性的影响 | 第52-54页 |
| 2.5 本章小节 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 第三章 固定化转氨酶的酶学性质研究 | 第57-71页 |
| 3.1 引言 | 第57页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第57-59页 |
| 3.2.1 固定化转氨酶 | 第57页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第57页 |
| 3.2.3 试验仪器 | 第57页 |
| 3.2.4 实验方法 | 第57-59页 |
| 3.2.4.1 固定化转氨酶的最适pH的研究 | 第57-58页 |
| 3.2.4.2 固定化转氨酶的最适温度的研究 | 第58页 |
| 3.2.4.3 固定化转氨酶的pH稳定性考察 | 第58页 |
| 3.2.4.4 固定化转氨酶的温度稳定性考察 | 第58页 |
| 3.2.4.5 固定化酶催化转氨反应底物助溶剂的考察 | 第58页 |
| 3.2.4.6 固定化酶催化转氨反应氨基供体的考察 | 第58-59页 |
| 3.2.4.7 固定化酶催化转氨反应氨基供体浓度的选择 | 第59页 |
| 3.2.4.8 底物浓度对固定化酶催化转氨反应的影响 | 第59页 |
| 3.2.4.9 产物浓度对固定化酶催化转氨反应的影响 | 第59页 |
| 3.3 结果与分析 | 第59-69页 |
| 3.3.1 固定化转氨酶的最适pH的确定 | 第59-60页 |
| 3.3.2 固定化转氨酶的最适温度的确定 | 第60-61页 |
| 3.3.3 固定化转氨酶的pH稳定性 | 第61-62页 |
| 3.3.4 固定化转氨酶的热稳定性 | 第62-63页 |
| 3.3.5 固定化酶催化转氨反应底物助溶剂的选择 | 第63-64页 |
| 3.3.6 固定化酶催化转氨反应氨基供体的确定 | 第64-66页 |
| 3.3.7 固定化酶催化转氨反应氨基供体浓度的确定 | 第66页 |
| 3.3.8 底物浓度对固定化酶催化转氨反应的影响 | 第66-68页 |
| 3.3.9 产物浓度对固定化酶催化转氨反应的影响 | 第68-69页 |
| 3.4 本章小节 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-71页 |
| 第四章 固定化转氨酶催化制备西他列汀的研究 | 第71-80页 |
| 4.1 引言 | 第71页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第71-73页 |
| 4.2.1 固定化转氨酶 | 第71-72页 |
| 4.2.2 实验药品 | 第72页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第72页 |
| 4.2.4 实验方法 | 第72-73页 |
| 4.2.4.1 固定化酶在填充床中催化生产西他列汀 | 第72-73页 |
| 4.2.4.2 固定化酶填充床式反应器在催化生产西他列汀中的操作稳定性 | 第73页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第73-78页 |
| 4.3.1 固定化酶填充量对催化反应影响 | 第73-74页 |
| 4.3.2 固定化酶填充床高径比对催化反应影响 | 第74-75页 |
| 4.3.3 固定化酶填充床式反应器在催化生产西他列汀中的操作稳定性的考察 | 第75-76页 |
| 4.3.4 产品西塔列汀分离纯化及西他列汀磷酸盐的制备 | 第76-77页 |
| 4.3.5 产品西他列汀的鉴定 | 第77-78页 |
| 4.4 本章小节 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-80页 |
| 第五章 结论与展望 | 第80-83页 |
| 5.1 课题结论 | 第80-81页 |
| 5.2 课题展望 | 第81-83页 |
| 附录 | 第83-86页 |
| 攻读学位期间所取得的相关科研成果 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
