中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-16页 |
1.1 模式生物斑马鱼的在生命科学研究中的应用 | 第11-12页 |
1.2 生物钟模型构建研究进展 | 第12-13页 |
1.3 斑马鱼生物钟基因和功能的研究进展 | 第13-14页 |
1.4 生物钟对生殖系统的调节 | 第14页 |
1.5 立题意义和主要研究内容 | 第14-16页 |
第二章 材料与方法 | 第16-40页 |
2.1 模式生物-斑马鱼 | 第16页 |
2.2 实验仪器及生产公司 | 第16-17页 |
2.3 实验试剂 | 第17-19页 |
2.4 常用试剂配制 | 第19-21页 |
2.4.1 细菌培养 | 第19页 |
2.4.2 核酸电泳相关缓冲液 | 第19页 |
2.4.3 Western Blot相关试剂 | 第19-20页 |
2.4.4 原位杂交相关试剂 | 第20页 |
2.4.5 H&E染色相关试剂 | 第20页 |
2.4.6 免疫荧光相关试剂 | 第20-21页 |
2.5 实验设计与方法 | 第21-40页 |
2.5.1 斑马鱼交配与胚胎收集 | 第21页 |
2.5.2 斑马鱼胚胎/组织Total RNA提取 | 第21页 |
2.5.3 RNA反转录制备cDNA模板 | 第21页 |
2.5.4 荧光定量PCR | 第21-22页 |
2.5.5 引物序列 | 第22-27页 |
2.5.6 PCR反应扩增目的DNA片断 | 第27页 |
2.5.7 DNA片段胶回收 | 第27-28页 |
2.5.8 目的片段连接到载体上及酶切鉴定 | 第28页 |
2.5.9 转化 | 第28-29页 |
2.5.10 转化试验重组子的鉴定 | 第29页 |
2.5.11 质粒提取(试剂盒) | 第29-30页 |
2.5.12 原位杂交过程 | 第30-31页 |
2.5.13 冰冻切片原位杂交 | 第31-32页 |
2.5.14 石蜡切片和HE染色 | 第32页 |
2.5.15 冰冻切片免疫荧光 | 第32-33页 |
2.5.16 Western blot | 第33-34页 |
2.5.17 细胞实验 | 第34-36页 |
2.5.18 ChIP | 第36-37页 |
2.5.19 转录Capped mRNA | 第37页 |
2.5.20 mRNA的纯化 | 第37-38页 |
2.5.21 性激素检测 | 第38页 |
2.5.22 性激素注射 | 第38页 |
2.5.23 数据统计分析 | 第38-40页 |
第三章 Bmal1b对斑马鱼生物钟和生殖功能的调控 | 第40-65页 |
3.1 Bmal1b蛋白的节律表达以及bmal1b在斑马鱼大脑和卵巢的表达 | 第40-41页 |
3.2 bmal1b对斑马鱼产卵及卵泡发育的影响 | 第41-44页 |
3.3 bmal1b对斑马鱼卵泡膜发育的影响 | 第44-45页 |
3.4 bmal1b对斑马鱼性激素分泌的影响 | 第45-47页 |
3.4.1 bmal1b对雌性斑马鱼性激素分泌的影响 | 第45页 |
3.4.2 bmal1b对雄性斑马鱼性激素分泌的影响 | 第45-47页 |
3.5 bmal1b对斑马鱼性别发育的影响 | 第47-48页 |
3.6 bmal1b对斑马鱼性别发育过程中性激素分泌的影响 | 第48-50页 |
3.7 bmal1b对成年雌性斑马鱼性激素及受体基因表达的影响 | 第50-52页 |
3.8 Bmal1b对斑马鱼性激素及受体的调控 | 第52-58页 |
3.8.1 斑马鱼性激素及受体基因启动子区E-box及E'-box的分析 | 第52-53页 |
3.8.2 Bmal1b对斑马鱼性激素及受体基因启动子区E-box及E'-box绑定 | 第53-55页 |
3.8.3 Bmal1b对斑马鱼性激素及受体基因启动子区E-box及E'-box调控节律 | 第55-56页 |
3.8.4 Bmal1b对斑马鱼性激素及受体基因表达的调控 | 第56-58页 |
3.9 Bmal1b对斑马鱼HPG轴的调控 | 第58-62页 |
3.9.1 bmal1b在斑马鱼幼鱼中的表达 | 第58-59页 |
3.9.2 Bmal1b对斑马鱼HPG轴的调控 | 第59-62页 |
3.10 讨论 | 第62-65页 |
第四章 博士期间其他研究工作—利用CRISPR/Cas9技术构建斑马鱼突变体 | 第65-67页 |
第五章 结论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-80页 |
攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文 | 第80-81页 |
博士研究生期间参加的国内外学术会议及所获奖励 | 第81-82页 |
在读期间参加科研情况 | 第82-83页 |
附录 | 第83-84页 |
致谢 | 第84页 |