| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 第一章 引言 | 第12-20页 |
| 1.1 骨骼肌的发育 | 第12页 |
| 1.2 参与骨骼肌发育调节的基因 | 第12-13页 |
| 1.2.1 生肌调节因子家族和肌细胞增强因子家族 | 第12页 |
| 1.2.2 Pax基因家族 | 第12-13页 |
| 1.2.3 肌肉生长抑制因子（MSTN） | 第13页 |
| 1.2.4 非编码基因 | 第13页 |
| 1.3 环状RNA的概述 | 第13-16页 |
| 1.3.1 环状RNA的成环方式 | 第13-15页 |
| 1.3.2 环状RNA的主要特征 | 第15页 |
| 1.3.3 环状RNA的功能研究 | 第15-16页 |
| 1.4 环状RNA研究策略 | 第16-18页 |
| 1.4.1 环状RNA鉴定与差异筛选 | 第16-17页 |
| 1.4.2 环状RNA的生物信息学分析 | 第17-18页 |
| 1.4.3 环状RNA的功能验证 | 第18页 |
| 1.5 miRNAs的简介 | 第18-19页 |
| 1.5.1 miRNAs的生成机制 | 第18页 |
| 1.5.2 miRNAs的作用机制及作用 | 第18-19页 |
| 1.5.3 miRNAs在肌肉发育中的作用 | 第19页 |
| 1.6 环状RNA在肌肉发育中研究的现状 | 第19-20页 |
| 第二章 实验仪器设备、材料与方法 | 第20-35页 |
| 2.1 实验仪器设备 | 第20页 |
| 2.2 实验材料及试剂及配制 | 第20-23页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.2.2 试剂配制 | 第21-23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-33页 |
| 2.3.1 细胞复苏 | 第23页 |
| 2.3.2 细胞传代 | 第23-24页 |
| 2.3.3 细胞冻存 | 第24页 |
| 2.3.4 细胞分化 | 第24页 |
| 2.3.5 细胞转染 | 第24-25页 |
| 2.3.6 CCK8细胞增殖测定实验 | 第25-26页 |
| 2.3.7 C2C12细胞的流式分析 | 第26-27页 |
| 2.3.8 C2C12细胞核质分离实验 | 第27页 |
| 2.3.9 细胞RNA提取 | 第27-28页 |
| 2.3.10 RNA的反转录（cDNA的合成） | 第28页 |
| 2.3.11 miRNA的反转录 | 第28-29页 |
| 2.3.12 荧光定量PCR（qPCR）体系及反应程序 | 第29页 |
| 2.3.13 环状RNA的酶切实验（RNase R） | 第29页 |
| 2.3.14 基因克隆 | 第29-32页 |
| 2.3.15 环状RNA与miRNA结合位点的靶标验证 | 第32页 |
| 2.3.16 环状RNA的过表达 | 第32页 |
| 2.3.17 细胞蛋白质提取及Western Blotting实验 | 第32-33页 |
| 2.4 本实验所用引物 | 第33-35页 |
| 第三章 实验结果 | 第35-53页 |
| 3.1 环状RNA的芯片检测 | 第35-41页 |
| 3.1.1 总RNA的提取与质检结果 | 第35页 |
| 3.1.2 环状RNA芯片检测的结果 | 第35-37页 |
| 3.1.3 环状RNA的差异表达研究 | 第37-41页 |
| 3.2 环状RNA的鉴定分析及其表达量检测 | 第41-44页 |
| 3.2.1 PCR扩增 | 第41-42页 |
| 3.2.2 Rnase R酶切 | 第42-43页 |
| 3.2.3 环状RNA的表达量验证 | 第43-44页 |
| 3.3 环状RNA的细胞定位 | 第44页 |
| 3.4 环状RNA的敲低实验 | 第44-45页 |
| 3.5 Circ2196敲低后对C2C12成肌细胞增殖的影响 | 第45页 |
| 3.6 Circ2196敲低后对C2C12成肌细胞周期的影响 | 第45-46页 |
| 3.7 Circ2179敲低后后对C2C12成肌细胞对分化的影响 | 第46-47页 |
| 3.8 环状RNA与miRNA的作用 | 第47-50页 |
| 3.8.1 环状RNA与miRNA结合位点预测 | 第47-48页 |
| 3.8.2 环状RNA与miRNA结合位点（靶标）的荧光素酶的验证 | 第48页 |
| 3.8.3 Circ2196敲低后相应miRNA的表达量 | 第48-49页 |
| 3.8.4 过表达miRNAs后circ2196的表达量 | 第49页 |
| 3.8.5 siRNA、miRNA、inhibitor共转染对C2C12细胞增殖的影响 | 第49-50页 |
| 3.9 Circ2196过表达实验 | 第50-51页 |
| 3.10 Circ2196敲低和过表达对mi RNA-133 靶标基因SRF表达的影响 | 第51页 |
| 3.11 Circ2196和Circ2179的时空表达谱 | 第51-53页 |
| 第四章 讨论 | 第53-56页 |
| 第五章 全文结论 | 第56-57页 |
| 5.1 本论文研究结论 | 第56页 |
| 5.2 论文创新点 | 第56页 |
| 5.3 后续实验安排 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简历 | 第65页 |
