| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 玉米弯孢菌叶斑病致病性研究进展 | 第13-37页 |
| 1 玉米弯孢菌叶斑病菌致病性分化研究方法 | 第13-24页 |
| 1.1 限制性内切酶介导整合突变 | 第13-18页 |
| 1.1.1 原理 | 第13-15页 |
| 1.1.2 鉴定真菌致病基因 | 第15-16页 |
| 1.1.3 该方法优缺点 | 第16-18页 |
| 1.2 农杆菌介导突变 | 第18-21页 |
| 1.2.1 原理 | 第18页 |
| 1.2.2 影响因素 | 第18-20页 |
| 1.2.3 农杆菌介导转化的优点 | 第20-21页 |
| 1.3 蛋白质组学研究方法 | 第21-24页 |
| 1.3.1 蛋白质组学定义 | 第21页 |
| 1.3.2 蛋白质组学研究内容 | 第21-23页 |
| 1.3.3 蛋白质组学应用 | 第23-24页 |
| 2 玉米弯孢叶斑病菌致病性分化主要途径 | 第24-25页 |
| 2.1 病原菌本身的变异 | 第24页 |
| 2.1.1 基因突变 | 第24页 |
| 2.1.2 生殖方式 | 第24页 |
| 2.2 外界条件的影响 | 第24-25页 |
| 2.2.1 寄主品种的更新换代 | 第24-25页 |
| 2.2.2 地理条件和环境条件 | 第25页 |
| 2.2.3 病原物、寄生和环境条件相互作用 | 第25页 |
| 3 玉米叶斑病菌致病性分化研究进展 | 第25-33页 |
| 3.1 玉米大斑病 | 第25-29页 |
| 3.1.1 玉米大斑病发生与危害 | 第25-26页 |
| 3.1.2 大斑病菌生理小种 | 第26-27页 |
| 3.1.3 大斑病菌致病性分化与黑色素 | 第27-28页 |
| 3.1.4 大斑病菌致病性分化与毒素 | 第28页 |
| 3.1.5 大斑病菌致病性分化分子机理 | 第28-29页 |
| 3.2 玉米弯孢菌叶斑病研究进展 | 第29-33页 |
| 3.2.1 弯孢菌叶斑病发生与危害 | 第29-30页 |
| 3.2.2 弯孢菌致病性分化研究进展 | 第30-33页 |
| 4 展望 | 第33-37页 |
| 4.1 品种布局与致病性分化 | 第33-34页 |
| 4.2 致病性分化预警技术 | 第34-37页 |
| 4.2.1 传统生理小种鉴定方法的缺点 | 第34页 |
| 4.2.2 生理分化检测方法的优势 | 第34-36页 |
| 4.2.3 弯孢叶斑病菌生理分化检测发展方向 | 第36-37页 |
| 第二章 玉米对弯孢菌叶斑病菌致病性分化定向选择的蛋白组学研究 | 第37-54页 |
| 1 材料与方法 | 第37-42页 |
| 1.1 材料 | 第37页 |
| 1.2 方法 | 第37-42页 |
| 1.2.1 菌种扩繁 | 第37页 |
| 1.2.2 接种及采样 | 第37页 |
| 1.2.3 病害调查 | 第37-38页 |
| 1.2.4 蛋白样品的制备 | 第38页 |
| 1.2.5 标准曲线的制作 | 第38-39页 |
| 1.2.6 2-D SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第39-42页 |
| 1.2.7 图象采集与分析 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-48页 |
| 2.1 病菌形态观察与鉴定 | 第42-44页 |
| 2.2 继代接种后病菌致病性的测定 | 第44页 |
| 2.3 蛋白质图谱差异比较 | 第44-48页 |
| 2.4 致病性分化相关的特异蛋白质图谱鉴定结果分析 | 第48页 |
| 3 结论与讨论 | 第48-54页 |
| 3.1 寄主的选择压力是病菌致病性分化的重要原因 | 第48页 |
| 3.2 寄主诱导特异变化蛋白可作为致病演变分子标记 | 第48-50页 |
| 3.3 蛋白组学是研究病菌致病性分化的有效工具 | 第50-54页 |
| 第三章 玉米弯孢叶斑病菌产生细胞壁降解酶诱导效应 | 第54-61页 |
| 1 材料与方法 | 第54-58页 |
| 1.1 材料 | 第54页 |
| 1.2 方法 | 第54-58页 |
| 1.2.1 接种及采样 | 第54页 |
| 1.2.2 寄主－病菌互作对降解酶种类及活性影响 | 第54-56页 |
| 1.2.3 葡萄糖标准曲线的制作 | 第56-57页 |
| 1.2.4 半乳糖标准曲线的制作 | 第57页 |
| 1.2.5 纤维素降解酶活性测定 | 第57页 |
| 1.2.6 果胶酶活性测定 | 第57-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-60页 |
| 2.1 葡萄糖标准曲线的绘制 | 第58页 |
| 2.2 半乳糖标准曲线的绘制 | 第58页 |
| 2.3 接种后病情指数变化情况 | 第58页 |
| 2.4 病菌产生细胞壁降解酶测定 | 第58-60页 |
| 3 结论与讨论 | 第60-61页 |
| 3.1 弯孢叶斑病菌致病性对寄主选择作用敏感 | 第60页 |
| 3.2 寄主定向选择作用可以诱导病菌产生的细胞壁降解酶活性增加 | 第60-61页 |
| 第四章 玉米弯孢叶斑病菌致病性相关基因初步鉴定 | 第61-78页 |
| 1 材料与方法 | 第62-69页 |
| 1.1 材料 | 第62-65页 |
| 1.1.1 供试菌株、自交系、质粒 | 第62页 |
| 1.1.2 培养基 | 第62-63页 |
| 1.1.3 试剂配制与试剂盒 | 第63-65页 |
| 1.2 方法 | 第65-69页 |
| 1.2.1 原生质体制备 | 第65页 |
| 1.2.2 质粒提取 | 第65-66页 |
| 1.2.3 REMI 转化 | 第66页 |
| 1.2.4 突变株稳定性测定 | 第66页 |
| 1.2.5 突变株致病性测定 | 第66页 |
| 1.2.6 出发菌和转化子DNA 提取 | 第66-67页 |
| 1.2.7 突变株的PCR 检测 | 第67页 |
| 1.2.8 突变株southern blot 检测 | 第67-69页 |
| 1.2.9 质粒拯救 | 第69页 |
| 2 结果与分析 | 第69-75页 |
| 2.1 REMI 转化子构建 | 第69-72页 |
| 2.1.1 原生质体制备与再生 | 第69-70页 |
| 2.1.2 质粒的提取与检测 | 第70-71页 |
| 2.1.3 转化子的获得和稳定性的检测 | 第71页 |
| 2.1.4 转化子致病性检测 | 第71-72页 |
| 2.2 转化子检测与筛选 | 第72-75页 |
| 2.2.1 转化子PCR 检测 | 第72-73页 |
| 2.2.2 转化子SOUTHERN 检测 | 第73-74页 |
| 2.2.3 质粒拯救 | 第74-75页 |
| 2.2.4 测序与检索 | 第75页 |
| 3 结论与讨论 | 第75-78页 |
| 参考文献 | 第78-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 发表论文及目录 | 第93页 |
