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放射损伤致血管内皮细胞中外泌体miRNA的调变作用及机制研究

摘要第4-8页
Abstract第8-12页
主要英文缩略语索引(ABBREVIATIONS)第16-17页
第一章 前言第17-21页
第二章 材料与方法第21-43页
    2.1 材料第21-26页
        2.1.1 细胞第21页
        2.1.2 抗体第21-22页
        2.1.3 仪器第22页
        2.1.4 试剂第22-23页
        2.1.5 溶液配制第23-26页
    2.2 方法第26-43页
        2.2.1 细胞培养第26-28页
        2.2.2 ~(60)Coγ射线照射和样品收集第28页
        2.2.3 总RNA的提取(以 60mm为例)第28-29页
        2.2.4 外泌体的提取(超速离心法)第29-30页
        2.2.5 miRNA芯片分析第30-31页
        2.2.6 透视电镜鉴定外泌体第31页
        2.2.7 外泌体染色第31页
        2.2.8 Western Blot实验第31-34页
        2.2.9 polyA加尾(用于miRNA检测的模板)第34-35页
        2.2.10 cDNA的逆转录合成(用于miRNA检测的模板)第35页
        2.2.11 实时定量PCR(SYBR法检测miRNA的表达)第35-36页
        2.2.12 差异靶基因的显著性功能和通路富集分析第36-37页
        2.2.13 CCK-8 法检测细胞增殖第37-38页
        2.2.14 细胞克隆形成实验第38页
        2.2.15 流式细胞术检测细胞周期第38-39页
        2.2.16 Annexin V, FITC法检测细胞凋亡第39-40页
        2.2.17 细胞微核实验观察细胞核损伤第40-41页
        2.2.18 ROS实验检测细胞活性氧水平第41页
        2.2.19 统计学分析第41-43页
第三章 ~(60)Coγ射线照射血管内皮细胞外泌体中miRNAs的鉴定分析第43-59页
    3.1 前言第43-44页
    3.2 结果第44-55页
        3.2.1 不同剂量γ射线照射对HUVEC细胞存活的影响第44-45页
        3.2.2 外泌体的鉴定第45-46页
        3.2.3 总RNA完整性分析第46-47页
        3.2.4 受照细胞和外泌体中miRNA表达谱的变化第47-51页
        3.2.5 RT-qPCR验证 4Gy照射人脐静脉血管内皮细HUVEC细胞内mi RNA的表达变化第51-52页
        3.2.6 差异mi RNAs的靶基因预测和显著性功能分析第52-53页
        3.2.7 差异靶基因的显著性通路分析第53-54页
        3.2.8 利用PPI网络图筛选中心节点基因第54-55页
    3.3 讨论第55-59页
第四章 辐射旁效应在人脐静脉血管内皮细胞HUVEC中的生物学效应研究第59-75页
    4.1 前言第59-60页
    4.2 结果第60-72页
        4.2.1 ICCM抑制人脐静脉血管内皮细胞HUVEC细胞的增殖第60-61页
        4.2.2 ICCM对人脐静脉血管内皮细胞HUVEC细胞凋亡的影响第61-63页
        4.2.3 ICCM对人脐静脉血管内皮细胞HUVEC细胞基因组的损伤第63-66页
        4.2.4 ICCM对人脐静脉血管内皮细胞HUVEC细胞周期的影响第66-70页
        4.2.5 ICCM处理人脐静脉血管内皮细胞HUVEC细胞后细胞内活性氧ROS的变化第70-71页
        4.2.6 人脐静脉血管内皮细胞HUVEC细胞对外泌体的摄入第71-72页
    4.3 讨论第72-75页
第五章 结论第75-77页
参考文献第77-83页
综述第83-92页
    参考文献第88-92页
作者攻读学位期间的科研成果第92-94页
致谢第94-95页

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