摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
上篇:文献综述 | 第8-24页 |
第一章 :小麦赤霉病致病菌禾谷镰刀菌及其致病机制 | 第8-10页 |
1 禾谷镰刀菌与赤霉病 | 第8-9页 |
2 禾谷镰刀菌致病机制 | 第9-10页 |
第二章 :植物抗病机制研究进展 | 第10-18页 |
1 植物的基础免疫和NB-LRR | 第10-12页 |
2 植物抗病反应中的信号转导 | 第12-13页 |
3 植物细胞壁在抗病和感病中的作用 | 第13-16页 |
4 小麦中的抗赤霉病基因及在抗病中的应用 | 第16-18页 |
第三章: 蛋白质互作研究方法 | 第18-24页 |
1 酵母双杂交技术 | 第18-21页 |
2 双分子荧光互补技术 | 第21-24页 |
下篇:研究报告 | 第24-60页 |
第一章: 实验方法与材料 | 第24-44页 |
1 实验材料: | 第24-27页 |
1.1 植物材料 | 第24页 |
1.2 菌株与质粒 | 第24页 |
1.3 酶与各种生化试剂 | 第24-25页 |
1.4 常用溶液及培养基 | 第25-27页 |
2 试验方法 | 第27-44页 |
2.1 酵母双杂交中常用方法 | 第27-32页 |
2.2 筛选片段全长序列的预测及扩增全长引物的设计 | 第32页 |
2.3 小麦RNA的提取和纯化及反转录,基因的克隆 | 第32-34页 |
2.4 PCR扩增产物的琼脂糖电泳、回收 | 第34-35页 |
2.5 感受态细胞的制备和大肠杆菌的转化,阳性克隆的PCR检测及大肠杆菌质粒的提取 | 第35-37页 |
2.6 载体的构建 | 第37页 |
2.7 半定量实验 | 第37-39页 |
2.8 拟南芥原生质体的制备和转化 | 第39-40页 |
2.9 质粒的大量提取和聚乙二醇纯化 | 第40-44页 |
第二章 :实验结果与分析 | 第44-56页 |
1 诱饵FG11304-pGBKT7对小麦酵母表达cDNA文库的筛选 | 第44页 |
2 克隆几丁质酶基因全长 | 第44-49页 |
2.1 提取小麦RNA | 第44-45页 |
2.2 克隆几丁质酶全长基因 | 第45-47页 |
2.3 生物信息学分析 | 第47-49页 |
3 去信号肽片段构建pGADT7载体,与诱饵验证互作 | 第49-50页 |
4 构建缺失载体寻找互作结合功能区域 | 第50-52页 |
5 双分子荧光互作(BIFC)验证几丁质酶和FG11304的互作 | 第52-53页 |
6 半定量研究几丁质酶基因随病菌诱导前后不同部位表达水平的差异 | 第53-56页 |
第三章: 讨论 | 第56-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66页 |