| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-33页 |
| 1.1 FK506 概述 | 第9-18页 |
| 1.1.1 FK506 的发现 | 第9页 |
| 1.1.2 FK506 的理化性质 | 第9页 |
| 1.1.3 FK506 的生物合成途径 | 第9-11页 |
| 1.1.4 FK506 的免疫抑制作用机制与器官移植市场 | 第11-13页 |
| 1.1.5 发酵法在 FK506 生产的应用现状 | 第13-14页 |
| 1.1.6 代谢工程在 FK506 生产的应用现状 | 第14-16页 |
| 1.1.7 分子生物学在 FK506 合成的研究现状 | 第16-18页 |
| 1.2 FK506 产量提高的主要瓶颈 | 第18-20页 |
| 1.3 基于质谱的代谢组学及其主要应用 | 第20-30页 |
| 1.3.1 代谢组学的研究策略 | 第21-29页 |
| 1.3.2 代谢组学解析微生物生理特征方面研究进展 | 第29-30页 |
| 1.4 本课题的研究意义和研究内容 | 第30-33页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第33-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第33-36页 |
| 2.1.1 菌种 | 第33页 |
| 2.1.2 实验药品 | 第33-34页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第34-35页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第35页 |
| 2.1.5 培养基和培养方法 | 第35-36页 |
| 2.2 出发菌株筛选方法 | 第36-38页 |
| 2.3 培养基的动态检测 | 第38-42页 |
| 2.3.1 总糖的动态检测方法 | 第38-39页 |
| 2.3.2 总氮的动态检测方法 | 第39页 |
| 2.3.3 溶氧的动态检测方法 | 第39-40页 |
| 2.3.4 有机酸的动态检测方法 | 第40页 |
| 2.3.5 生物量的动态检测方法 | 第40页 |
| 2.3.6 pH 值的动态检测方法 | 第40-41页 |
| 2.3.7 FK506、FK520 和 FK506D 的动态检测方法 | 第41-42页 |
| 2.4 代谢轮廓学实验方法 | 第42-46页 |
| 2.4.1 胞内代谢物的淬灭 | 第42页 |
| 2.4.2 胞内代谢物的提取 | 第42-43页 |
| 2.4.3 样品的衍生化 | 第43页 |
| 2.4.4 GC-MS 检测代谢物 | 第43-45页 |
| 2.4.5 个别代谢物的 LC-MS 检测方法 | 第45-46页 |
| 2.4.6 代谢物分析及数据处理 | 第46页 |
| 2.5 前体的理性添加强化 | 第46-47页 |
| 2.5.1 中心碳代谢前体添加方法 | 第46-47页 |
| 2.5.2 莽草酸途径、氨基酸途径、哌可酸途径前体添加方法 | 第47页 |
| 2.5.3 脂肪酸途径前体添加方法 | 第47页 |
| 2.6 实验的准确性设计 | 第47-48页 |
| 第三章 FK506 合成的关键代谢物和关键途径确定 | 第48-67页 |
| 3.1 基于培养基动态检测揭示关键代谢物的理论分析 | 第48页 |
| 3.2 高产培养基(M2)与地产培养基(M1)发酵过程比较解析 | 第48-50页 |
| 3.3 培养基成分动态检测无法揭示关键因素的原因分析 | 第50页 |
| 3.4 代谢组学的必要性分析 | 第50-51页 |
| 3.5 利用代谢轮廓学确定胞内关键代谢物和代谢途径 | 第51-61页 |
| 3.5.1 筑波链霉菌发酵 FK506 过程中胞内代谢物的分析 | 第51-55页 |
| 3.5.2 多元统计分析筑波链霉菌胞内代谢差异 | 第55-61页 |
| 3.6 筑波链霉菌关键代谢物和代谢途径的不足性分析 | 第61-66页 |
| 3.6.1 中心碳代谢途径（EMP、PPP 和 TCA） | 第61-62页 |
| 3.6.2 莽草酸途径 | 第62-64页 |
| 3.6.3 氨基酸代谢 | 第64-65页 |
| 3.6.4 脂肪酸代谢 | 第65-66页 |
| 3.7 本章小结 | 第66-67页 |
| 第四章 代谢轮廓分析指导下的理性强化 | 第67-73页 |
| 4.1 M2 发酵特性理性强化 | 第67-70页 |
| 4.1.1 中心碳代谢途径（EMP、PPP、TCA）理性强化 | 第68页 |
| 4.1.2 莽草酸代谢途径理性强化 | 第68-69页 |
| 4.1.3 氨基酸代谢途径理性强化 | 第69页 |
| 4.1.4 脂肪酸代谢途径理性强化 | 第69-70页 |
| 4.2 组合优化培养基 M3 发酵产物监测和强化效果验证 | 第70-72页 |
| 4.3 本章小结 | 第72-73页 |
| 第五章 结论与展望 | 第73-75页 |
| 5.1 本文结论 | 第73页 |
| 5.2 创新点 | 第73-74页 |
| 5.3 展望 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-79页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
