| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-31页 |
| 1.1 启动子 | 第14-25页 |
| 1.1.1 启动子的概念 | 第14-15页 |
| 1.1.2 增强子与沉默子 | 第15-16页 |
| 1.1.3 启动子的分类 | 第16-21页 |
| 1.1.3.1 组成型启动子 | 第17页 |
| 1.1.3.2 组织特异性启动子 | 第17-19页 |
| 1.1.3.3 诱导型启动子 | 第19-21页 |
| 1.1.3.4 双向启动的启动子 | 第21页 |
| 1.1.4 启动子的研究方法 | 第21-25页 |
| 1.1.4.1 生物信息学的分析预测 | 第21-22页 |
| 1.1.4.2 筛选鉴定启动子核心功能区段及顺式调控元件的方法 | 第22-24页 |
| 1.1.4.3 反式作用因子与顺式作用元件的结合特性分析 | 第24-25页 |
| 1.2 转录因子 | 第25-27页 |
| 1.3 磷脂酰肌醇信号途径简介 | 第27-30页 |
| 1.3.1 磷脂酰肌醇合成酶(PIS)的研究进展 | 第28-29页 |
| 1.3.2 磷脂酰肌醇合成酶基因 | 第29-30页 |
| 1.4 本工作的目的及意义 | 第30-31页 |
| 第二章 材料与方法 | 第31-39页 |
| 2.1 材料 | 第31-32页 |
| 2.1.1 植物材料及培养条件 | 第31页 |
| 2.1.2 菌株及植物表达载体 | 第31页 |
| 2.1.3 培养基及药品试剂等 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-39页 |
| 2.2.1 质粒的重组与转化 | 第32-34页 |
| 2.2.1.1 质粒DNA的提取与酶切 | 第32页 |
| 2.2.1.2 DNA片段的回收与定量 | 第32-33页 |
| 2.2.1.3 目的DNA片段与载体DNA的连接 | 第33页 |
| 2.2.1.4 大肠杆菌的转化及重组质粒的鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.1.5 农杆菌的转化 | 第34页 |
| 2.2.2 ZmPIS启动子序列的生物信息学分析及缺失突变体的构建 | 第34-35页 |
| 2.2.3 农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第35页 |
| 2.2.4 转基因烟草的生物学检测 | 第35-37页 |
| 2.2.4.1 转基因烟草的PCR检测 | 第35-36页 |
| 2.2.4.2 转基因烟草的GUS组织化学染色 | 第36-37页 |
| 2.2.5 转基因烟草的GUS荧光活性测定 | 第37-38页 |
| 2.2.6 转基因烟草的胁迫处理分析 | 第38-39页 |
| 2.2.6.1 转基因烟草离体叶片的胁迫处理实验 | 第38页 |
| 2.2.6.2 转基因烟草活体植株的胁迫处理实验 | 第38-39页 |
| 第三章 结果与分析 | 第39-58页 |
| 3.1 ZmPIS启动子序列的生物信息学分析 | 第39-41页 |
| 3.2 启动子5’端系列缺失片段的植物表达载体的构建 | 第41-43页 |
| 3.3 烟草的遗传转化及转基因植株的获得 | 第43-44页 |
| 3.4 启动子5’端系列缺失突变体转基因烟草的GUS荧光活性分析 | 第44-45页 |
| 3.5 PZ7转基因烟草的组织表达模式分析 | 第45-46页 |
| 3.6 PZ1-PZ8转基因烟草离体叶片的胁迫处理分析 | 第46-51页 |
| 3.6.1 PZ1-PZ8转基因烟草离体叶片的盐胁迫响应特性分析 | 第47-49页 |
| 3.6.2 PZ1-PZ8转基因烟草离体叶片的渗透胁迫响应特性分析 | 第49-51页 |
| 3.6.3 PZ1-PZ8转基因烟草离体叶片的冷胁迫响应特性分析 | 第51页 |
| 3.7 PZ1、PZ2、PZ6、PZ7、PZ8转基因烟草植株的胁迫响应特性分析 | 第51-58页 |
| 3.7.1 转基因烟草活体植株的盐胁迫响应特性分析 | 第53-55页 |
| 3.7.2 转基因烟草活体植株的渗透胁迫响应特性分析 | 第55-58页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第58-61页 |
| 4.1 玉米ZmPIS启动子466 bp片段(PZ7：-1至-466 bp)为该启动子具有盐和渗透胁迫响应特性的高启动活性区段 | 第58-59页 |
| 4.2 ZmPIS启动子的110 bp片段(-466至-357 bp)中存在未报道的盐和渗透胁迫响应元件 | 第59-60页 |
| 4.3 关于进一步开展本工作的几点想法 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第75页 |
