引言 | 第13-15页 |
正文 | 第15-55页 |
一、实验目的 | 第15页 |
二、实验材料 | 第15-17页 |
(一) 实验动物 | 第15页 |
(二) 主要试剂 | 第15-16页 |
(三) 常用试剂及培养基的配制 | 第16页 |
(四)主要仪器 | 第16-17页 |
三、实验方法 | 第17-32页 |
(一) 猕猴相关脑组织总RNA的提取、纯化与鉴定 | 第17-19页 |
(二) SSH技术筛选差异表达基因片段 | 第19-30页 |
(三) 差异表达基因克隆、酶切鉴定 | 第30-32页 |
四、实验结果 | 第32-38页 |
(一) 总RNA质量和含量 | 第32-33页 |
(二) 长距离PCR合成cDNA最佳循环参数的确定 | 第33页 |
(三) cDNA合成量 | 第33-34页 |
(四) Rsa Ⅰ酶切效果的判定 | 第34页 |
(五) 接头连接效率的检测 | 第34-35页 |
(六) 消减杂交后第二次PCR产物的分析 | 第35-36页 |
(七) 蓝白斑筛选 | 第36-37页 |
(八) 酶切鉴定插入片段 | 第37-38页 |
五、讨论 | 第38-55页 |
(一) 肝主疏泄的理论渊源和研究现状 | 第38-41页 |
(二) 肝气逆证的理论渊源和研究现状 | 第41-43页 |
(三) 中医学对PMS的认识 | 第43-45页 |
(四) 动物模型的选择 | 第45-46页 |
(五) 猕猴脑组织相关脑区的选择 | 第46-47页 |
(六) SSH技术应用体会 | 第47-51页 |
(七) 构建消减cDNA文库意义 | 第51-53页 |
(八) 本研究存在问题及下步研究计划 | 第53-55页 |
结语 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
综述 | 第60-82页 |
附录 | 第82-84页 |
附录1 缩略词表 | 第82-83页 |
附录2 接头和引物序列 | 第83-84页 |
致谢 | 第84页 |